我们知道临床上少数患者会发生EDTA依赖性假性血小板减少,他们的血小板在EDTA诱导下聚集成堆,使血细胞分析仪的检测结果不真实。这种情况可能存在聚集程度不同的问题。
一天上午,有份眼科患者的血常规让我们费了点儿功夫。这个结果中,血小板数为88×10^9/L,但血小板直方图有点儿问题,其余正常。
LIS中的信息是:患者女,68岁,白内障。
我们关于血小板的复检规则是:
①首次结果<80×10^9/L或>1000×10^9/L;
②直方图异常;
③5天内增加或减少100%。
这个结果触犯了其中一条,而且血细胞分析仪也出现了多项报警。标本外观合格,未发现小凝块儿。
图1 患者EDTA管血常规结果和直方图
图2 患者EDTA管的Q-Flag
“PLT Clumps”?是不是EDTA依赖性假性血小板减少?
赶快推了血涂片,染色观察。果然,血小板有聚集,不过并没有典型的成堆现象,只是5、6个血小板聚在一起,但也有散在的。
看来血细胞分析仪对血小板聚集还是比较敏感的。从涂片估计,血小板数大约在190×10^9/L左右。
图3 患者EDTA管血涂片
因为这样的血小板聚集不够明显,我们首先想到用PLT-F通道再做一次。这次结果稍微提高一些,血小板上升到108×10^9/L,但还是出现了血小板直方图异常和报警。
图4 患者EDTA管PLT-F通道的血常规结果和直方图
图5 患者EDTA管PLT-F通道的Q-Flag
幸好病房同时送来了患者的枸橼酸钠管检查凝血功能。
于是我们又用枸橼酸钠管并打开PLT-F通道做了血常规,情况明显好转,血小板数变为174×10^9/L,并且其直方图已明显改善,血小板和它的四项参数PDW、MPV、P-LCR和PCT的报警“*”已消失,“PLT Clumps?”也没再出现,其它项目与EDTA管相差不多。
同时我们又用枸橼酸钠管标本推片观察,未发现血小板聚集,从涂片上估计的血小板数值也与仪器结果相符。
图6 患者枸橼酸钠管PLT-F通道的血常规结果和直方图
图7患者枸橼酸钠管PLT-F通道的Q-Flag
图8 患者枸橼酸钠管血涂片
本科室的血细胞分析仪常规使用的是PLT-I通道检测血小板,它是根据电阻抗原理区分待测细胞的。当细胞通过小孔时形成脉冲,脉冲数量代表细胞数量,脉冲振幅反映细胞体积。
这种方法的优点是精密度高,简便高效。缺点是由于血小板与红细胞同时用这个通道检测,只是判断阈值不同,所以血小板数量易受小红细胞和红细胞碎片影响。根据它的检测原理,血小板聚集会使检测结果假性减低。
PLT-F通道是通过新型荧光染色剂针对红细胞和血小板进行染色,捕捉前向散射光(FSC)和侧向荧光(SFL)强度。前向散射光反映细胞大小,侧向荧光反映细胞种类和数量。
PLT-F通道还使用5倍颗粒计数法,即计算量是PLT-I通道的5倍。这个通道的优点是提高了检测特异性,能有效对抗小红细胞和红细胞碎片的干扰,并且适宜低值标本,缺点在于成本较高和检测时间延长[1]。
有报道说当仪器有聚集的报警时使用PLT-F通道检测血小板结果比较接近真实[2],但从本文实践来看,PLT-F通道并没有明显优势,即使对于轻度EDTA依赖性血小板聚集问题也不能完全解决。
后来我们从LIS中查询,发现患者住院号是新产生的,之前无住院的历史,近半年内无检查结果(我们的LIS只能查到半年内的数据)。
患者同时做了肝功能、肾功能、血糖、凝血功能、乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、艾滋病抗体、尿常规、便常规,除血糖为7.95mmol/L,稍高一些,其余无异常。
患者的白内障可能是糖尿病引起的并发症。有报道说糖尿病、肝功异常、高尿酸等问题可以促进EDTA依赖性血小板聚集[3]。
EDTA依赖性假性血小板减少的原因不明,有报道说其发生率为0.09%~0.21%[4]。从这个案例可以看出,EDTA依赖性假性血小板减少可能存在聚集程度不同的问题。
这类患者中,有些人血小板聚集严重,造成仪器检测的数量极低,提醒我们要按照复检规则处理;而另一些人则是部分聚集,仪器检测出的血小板数只比参考区间稍低一点儿,这样更容易成为“漏网之鱼”。我们在日常工作中需要注意。
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