野木瓜注射液

 　　1.对完整Wistar大鼠模型,应用微电极细胞外记录技术,观察了在坐骨神经处分别加入10 %,25 %,50 %,75 %和95 %的野木瓜注射液前后,电刺激大鼠坐骨神经诱发的脊髓背角广动力范围神经元放电活动的变化.结果表明:野木瓜注射液在坐骨神经处加药时能降低大鼠脊髓背角广动力范围神经元的诱发放电频率和幅度(P<0.05),并具有浓度依赖性,这与野木瓜注射液对离体背根神经节细胞产生的效应是一致的.野木瓜注射液可以在外周水平上阻滞痛觉信息的传导,这可能是其产生镇痛作用的原因之一.
2.研究野木瓜注射液对背根神经节细胞电压门控性钠通道电流的影响,分析野木瓜注射液阻滞神经传导、产生镇痛作用的药理机制。方法在急性分离的大鼠背根神经节细胞膜上,进行全细胞膜片钳记录,观察10%、25%和50%的野木瓜注射液对电压门控性钠通道电流的影响。结果野木瓜注射液浓度依赖地抑制背根神经节细胞钠通道电流峰值,并影响通道的激活和失活过程。结论野木瓜注射液除影响髓鞘和轴突膜结构外还通过调制初级感觉神经元电压门控性钠通道,影响痛觉信息中枢传入产生镇痛作用。
3.野木瓜注射液的药理作用并不完全清楚，需要进一步探索其有效成分和作用靶点。 本文首先用全细胞膜片钳技术观察了不同浓度野木瓜注射液作用后大鼠背根神经节细胞的电压门控性钠离子通道电流。实验结果表明,野木瓜注射液对大鼠背根神经节细胞电压门控性钠离子通道电流峰值有明显的浓度依赖的抑制作用,并且还影响了电压门控性钠离子通道的激活和失活过程,具体表现在半激活电压向去极化方向偏移和半失活电压向超极化方向偏移。在电压门控离子通道药理学研究中,对药物对离子通道动力学影响的讨论一般都根据脉冲刺激得到的电流峰值和反转电位等观察值计算得到电导值,然后参考刺激电压制作离子通道的激活和失活曲线。这种研究方法仅仅利用了离子通道电流的最大值,并没有将实验数据提供的信息全部利用,例如钠通道电流达到峰值的时间信息没有用上。 Hodgkin和Huxley在对大量电压钳实验数据的基础上提出了描述离子通道动力学特征的Hodgkin-Huxley模型,通过模型参数的变化可以定量描述离子通道动力学的改变。为了更准确地研究野木瓜注射液对钠离子通道动力学的影响,本文在全细胞膜片钳实验的基础上,用Hodgkin-Huxley模型拟合不同浓度野木瓜注射液作用前后的大鼠背根神经节细胞钠离子通道全细胞膜片钳实验数据,拟合效果比较理想。拟合结果表明,野木瓜注射液作用后,拟合得到的模型参数V2 m向去极化方向偏移,这一点和离子通道激活曲线的变化是一致的。与模型参数V2 m相对应的模型参数V2 h以及τm,τh等其它参数并没有明显变化。 在通过膜片钳实验技术观察药物对神经元动作电位产生影响的实验操作中,很难控制药物使其不对钠离子通道外的其他离子通道产生影响(不能使用钾离子通道阻断剂)。因此很难断定实验观察得到的动作电位变化就仅仅是因为细胞表面钠离子通道受到药物影响所致。为了探究野木瓜注射液对背根神经节细胞钠离子通道的影响是否能够产生对背根神经节细胞动作电位的抑制作用,本文用上述拟合膜片钳实验结果获得的Hodgkin-Huxley参数为依据,借助neuron神经元建模软件建立人工神经元,并对其进行计算机仿真刺激产生动作电位。计算机仿真刺激人工神经元结果显示,野木瓜注射液对神经元钠离子通道动力学的影响可以导致神经元产生动作电位的阈值提高。由此推断,野木瓜注射液的镇痛作用来源于此。 综上所述,野木瓜注射液可能通过影响初级感觉神经元钠离子通道激活过程从而阻滞动作电位产生而达到镇痛效果。通过数学建模和计算机仿真的方法能够简化实验条件,简化模型,更好地说明中药对离子通道动力学特征的影响,定量描述中药作用效果。这种数学建模加计算机仿真的方法给中药药理学研究提供了一种新方法。