辅助生殖

体外受精（In Vitro Fertilization，IVF）是指哺乳动物的精子和卵子在体外完成受精过程的技术。小鼠体外受精技术可以分为冷冻精子的体外受精和新鲜分离精子的体外受精。在小鼠体外受精技术的发展中，有3个技术优化特别重要，显著提高了小鼠体外受精的成功率。（1）添加环状糊精（MBCD）提高了精子获能的效率，超活化（鞭打运动）精子的比例增加，从而提高IVF的效率。获能后的精子才具有受精能力，研究表明牛血清蛋白（BSA）、牛精浆蛋白（BSP）、高密度脂蛋白（HDL）和MBCD等会促使精子膜上胆固醇流失，诱导精子获能。MBCD增加蛋白质酪氨酸磷酸化的能力，与胆固醇强烈结合，破坏脂筏（lipid rafts），从而实现高比例的精子获能。（2）精子和卵子IVF过程的优化，①高钙(2.04mM提高到5.09mM)、添加Reduced glutathione (GSH)和不含脂肪酸的BSA-HTF受精液；②合适的卵母细胞采集时间，包括超数排卵和体外采集卵母细胞的时间。（3）精子冻存的优化，经典的方法是1990年报道的R18S3的方法（18%的棉子糖+3%脱脂乳）。在2010年Takeo和Nakagata教授报道添加l-glutamine可以精子的冷冻复苏效率（小鼠精子冻存复苏和IVF的发展历史，见下图。摘至Cryobiology, 2018, doi: 10.1016/j.cryobiol.2018.04.008.）。