玉米粉120克、黄豆粉20克、蔗糖(白糖)20克、1000毫升。
二:蜜环菌母种制作
1.培养基的煮制
先将称量好的玉米粉、黄豆粉用适量水调匀,再添足水,于加热设备上煮制,煮沸至35分钟即可,注意在加热过程中需不时搅拌,以免粘锅煮糊,另还需注意添水,以补充加热过程中损失的水分。
2.分装
培养基煮好后,勿要过滤,直接采用注射筒或其他分装装置分装,分装量需因试管型号而定,一般装至试管1/2长为宜。在分装过程中千万不要将培养基滴在试管口内外壁,若试管口内外壁粘有培养基,一定将其擦洗干净。分装后塞好棉塞,将试管竖直放置,以免试管内壁过长地粘着培养基。
3.灭菌
由于该培养基营养相当丰富,再加上玉米粉彻底灭菌相对较难,因此灭菌时间应比常规培养基稍长一点,一般将其控制在高压(1.5压力)30—35分钟、常压1小时即可。灭菌完成后,待冷至试管不烫手时,将其取出,竖直放置(蜜环菌母种培养基一般做成柱式),培养基将随着温度的下降而逐渐“凝固”,待完全冷却后,培养基在试管内就彻底固型了。
4.接种
在无菌条件下,每支试管接入一豌豆粒大小的块菌种,所接菌种必须保证具有生活力,培养基褐化、蜜环菌严重角质化的菌种最好勿用,但在实在没有好菌种的情况下,该培养基也能对退化菌种起到复壮作用。
5.培养与保藏
培养基接种好后,在25摄氏度左右避光培养,一般在7—10天内即可满管。满管后将菌种放于冰箱中冷藏,一般可保存半年至一年,若需长时间保藏,最好试管采用蜡封。
三.该方法制作母种的优点
1.制种原料简单、易找,制种技术简便、易操作,适用于广大菌种生产者,尤其是偏远地区的天麻种植者。
2.制作成本低廉,比常规琼脂培养基制作划算得多。
3.由于培养基改善了水分的供给状况,且营养相当丰富,再加上玉米粉、黄豆粉中含有多种生长因子,因此所制母种不易褐化、角质化,具有相当强的抗衰老、抗退化能力,对严重衰老、退化的菌种也具有相当强的复壮能力(笔者就通过该方法“拯救”了不少优秀的蜜环菌菌种)。另外,该方法制作的母种还可大大地延长保藏时间,减少了保存过程中的转代次数,对抑制菌种退化可起到很大作用。
4.该方法制作的母种生活力旺盛,转接到母种、原种或栽培种培养基上的菌种块萌发快,生长速度明显快于常规方法所制作的母种。
另外,试验过程中发现了一种简单的可生产出蜜环菌子实体的方法,其培养基配方为:玉米粉40克、大米粉40克、黄豆粉20克、蔗糖20克、水1000毫升,栽培、管理方法略。
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