芽孢染色方法

　　方法1

　　(1)将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。

　　(2)滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。

　　(3)用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5min。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液(约7.6%)染10min。

　　(4)倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。

　　(5)用番红水溶液复染1min，水洗。

　　(6)待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。

　　方法2

　　(1)取二支洁净的小试管，分别加入0.2ml无菌水，再往一管中加入1-2环的蜡状芽孢杆菌的菌苔，另一管中加入1-2环的生孢梭菌的菌苔，两管各自充分混合成浓厚的菌悬液。

　　(2)在菌悬液中分别加入0.2ml苯酚品红溶液，充分混合后，于沸水浴中加热3-5min。

　　(3)用接种环分别取上述混合液2-3环于两片载玻片上，涂薄，风干后，将载玻片稍倾斜于烧杯上，用95%乙醇冲洗至无红色液流出。

　　(4)再用自来水冲洗，滤纸吸干。

　　(5)取1-2环黑色素溶液于涂片处，立即展开涂薄，自然干燥后，油镜观察，在淡紫灰色背景的衬托下，菌体为白色，菌体内的芽孢为红色。