光合细菌培养基配方及扩培方法

　　光合细菌的培养基对光合细菌培养条件进行了优化研究，结果表明：菌株的生长温度为30℃时，最适培养光照为3000lx，最低接种浓度为6%。培养基正交试验研究表明其最优培养基配方为：氯化铵2.00g、磷酸氢二钾0.20g、乙酸钠4.00g、碳酸氢钠2.00g、氯化钠1.00g、酵母膏0.15g、硫酸镁0.20g、T.M储液少量、蒸馏水1000mL;其中乙酸钠为最大影响因子。酵母膏对产品品质影响较大，要求酵母膏质量稳定，无杂菌。目前应用的光合细菌有多种配方，现介绍一种常用的配方：

　　磷酸氢二钾(K2HPO4) 　　0.5g

　　磷酸二氢钾(KH2PO4)　　 0.5g

　　硫酸铵((NH4)2SO4 )　　 1g

　　硫酸镁(MgSO4.7H2O 　　0.5g

　　乙酸钠　　 2g　(或95%酒精3ml )

　　酵母浸出汁(或酵母膏) 　　2g

　　消毒海水 　　1000m

　　光合细菌培养基的制备

 

 

 　　1、灭菌和消毒

　　菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用

　　2、接种

　　培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的接种量比较高，一般为20—50%，即菌种母液量和新配培养液量之比为1：4—1：1，不应低于20% ，尤其微气培养接种量应高些，否则，光合细菌在培养液中很难占绝对优势，影响培养的最终产量和质量。

　　3、培养管理

　　光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试、生长情况的观察和检查以及出现问题的分析处理等三个方面。

　　4、日常管理和测试

　　1)搅拌和充气：光合细菌培养过程中必须充气或搅拌，作用是帮助沉淀的光合细菌上浮获得光照，保持菌细胞的良好生长。

 

　　2)调节光照度：培养光合细菌需要连续进行照明。在日常管理工作中，应根据需要经常调整光照度。白天可利用太阳光培养，晚上则需要人工光源照明，或完全利用人工光源培养。人工光源一般使用碘钨灯或白炽灯泡。不同的培养方式所要求的光照强度有所不同。一般培养光照强度控制在2000—5000lux之间。如果光合细菌生长繁殖快，细胞密度高，则光照强度应提高到5000—10000lux。调节光照强度可通过调整培养容器与光源的距离或使用可控电源箱调节。

　　3)调节温度：光合细菌对温度的适应范围很广，一般在23—39℃的范围内，均能正常生长繁殖，可不必调整温度，在常温下培养。也可通过调整，将温度控制在光合细菌生长繁殖最适宜的范围内，使光合细菌更好地生长。

　　5、酸光合细菌碱度的测定和调整

　　在培养光合细菌的过程中，必须注意酸碱度的变化。由于光合细菌的大量繁殖，菌液的pH值上升，这意味着光合细菌正处于指数生长期。但当pH超过最适范围甚至生长的适应范围时，说明光合细菌的生长已达到顶点，随后生长下降。如果能及时调整菌液的酸碱度，使pH保持在最适范围，则光合细菌能继续生长繁殖。为了延长光合细菌的指数生长期，提高培养基的利用率和单位水体的产量，测定和调整pH值是非常重要的。