下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

 

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有      个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越      。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是     。

（4）与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止      。

（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入      酶。

（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了     

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在      的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

答案

（1）0.2

（2）高

（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA a免费Q.cOoco.Net.cn提问中心g
中的目的基因

（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化

（5）DNA连接

（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞

（7）蔗糖为唯一含碳营养物质