starseacow (站内联系TA)
楼主提的问题很好，以前也困惑了我很久，根据看过的一些资料，整理回答如下，希望有更专业的虫友指正：
首先，明确概念，总糖也可称为碳水化合物，它包括单糖，寡糖，多糖等等（其中有些单糖和二糖，由于分子中含有游离醛基或酮基，所以具有还原性，成为还原性糖，有一些专门的方法测定它们，如斐林试剂和班氏试剂法）。能溶于水和乙醇的糖称为可溶性糖（有的地方笼统的成为可溶性固形物），一般单糖和二糖都是可溶性糖。对于多糖，如纤维素，淀粉，几丁质之类是不可溶性糖，果胶等是可溶性糖。
接下来，考虑硫酸蒽酮法的原理。蒽酮法本身，是利用蒽酮可以与游离的已糖或多糖中的已糖基、戊糖基及已糖醛酸起反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有最大吸收来进行测定。蒽酮法只可用于可溶性糖的测定。而硫酸蒽酮法，在测定前，用硫酸使糖类脱水生成糠醛以进行测定，在这一过程中，淀粉、纤维素等不溶性多糖也在强酸下水解，形成单糖参加蒽酮反应。因此，使用硫酸蒽酮法，在不细致划分各种碳水化合物的前提下，测定的结果可以认为是总糖。
幽幽深谷竹 (站内联系TA)
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
楼主提的问题很好，以前也困惑了我很久，根据看过的一些资料，整理回答如下，希望有更专业的虫友指正：
首先，明确概念，总糖也可称为碳水化合物，它包括单糖，寡糖，多糖等等（其中有些单糖和二糖，由于分子中含 ...感谢这位虫友，本虫豁然开朗啊！祝实验顺利。
幽幽深谷竹 (站内联系TA)
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
楼主提的问题很好，以前也困惑了我很久，根据看过的一些资料，整理回答如下，希望有更专业的虫友指正：
首先，明确概念，总糖也可称为碳水化合物，它包括单糖，寡糖，多糖等等（其中有些单糖和二糖，由于分子中含 ...再请教一下，硫酸苯酚法提取糖时，怎么加入的是盐酸呢？确定不是硫酸?
starseacow (站内联系TA)
苯酚硫酸法的原理实质仍然是依靠酸水解多糖为单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应进行测定。根据最早原始文献报道，该方法并不会用到盐酸，直接硫酸水解脱水即可（见下文）。在提取多糖过程中，加入盐酸和氢氧化钠，应该是后来的一种改进方案，我没有查到这种改进的来源，不过估计是利用盐酸给多糖提供一个水解环境，再进一步用硫酸脱水。使用这样的两种酸，可能与苯酚反应的某些性质有关，楼主感兴趣可以进一步研究文献或到化学区去问问。
Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances
Michel. DuBois , K. A. Gilles , J. K. Hamilton , P. A. Rebers , Fred. Smith
Anal. Chem., 1956, 28 (3), pp 350–356
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=128047116roysdooz6y1dvt4
幽幽深谷竹 (站内联系TA)
5楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-18 16:43:02
苯酚硫酸法的原理实质仍然是依靠酸水解多糖为单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应进行测定。根据最早原始文献报道，该方法并不会用到盐酸，直接硫酸水解脱水即可（见下文）。在提取多糖过程中，加入盐酸和氢氧化 ...感谢！
幽幽深谷竹 (站内联系TA)
5楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-18 16:43:02
苯酚硫酸法的原理实质仍然是依靠酸水解多糖为单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应进行测定。根据最早原始文献报道，该方法并不会用到盐酸，直接硫酸水解脱水即可（见下文）。在提取多糖过程中，加入盐酸和氢氧化 ...我问错了，是蒽酮法提取总糖时，加入的是盐酸，然后沸水浴。是这样的吗？
starseacow (站内联系TA)
7楼: Originally posted by 幽幽深谷竹 at 2012-09-19 09:00:01
我问错了，是蒽酮法提取总糖时，加入的是盐酸，然后沸水浴。是这样的吗？...总糖提取方法有很多种，硫酸蒽酮法只是个检测手段，跟你用什么方法提取无关。最简单的方法，把样品烘干粉碎后加水煮沸也可提取。
jsls (站内联系TA)
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
楼主提的问题很好，以前也困惑了我很久，根据看过的一些资料，整理回答如下，希望有更专业的虫友指正：
首先，明确概念，总糖也可称为碳水化合物，它包括单糖，寡糖，多糖等等（其中有些单糖和二糖，由于分子中含 ...请问，硫酸苯酚法和硫酸蒽酮法测定的糖中都包括纤维素吗。如您帖子中所说"在测定前，用硫酸使糖类脱水生成糠醛以进行测定，在这一过程中，淀粉、纤维素等不溶性多糖也在强酸下水解"，那么这两种方法都用硫酸做前处理，是不是结果都包括了纤维素？
我看有些帖子中说硫酸苯酚法测得的不包括纤维素，所以有此一问。谢谢
starseacow (站内联系TA)
9楼: Originally posted by jsls at 2012-10-02 09:09:34
请问，硫酸苯酚法和硫酸蒽酮法测定的糖中都包括纤维素吗。如您帖子中所说"在测定前，用硫酸使糖类脱水生成糠醛以进行测定，在这一过程中，淀粉、纤维素等不溶性多糖也在强酸下水解"，那么这两种方法都用 ...两种方法都经过硫酸处理，因此测定结果中都包含纤维素脱水生成的那部分糖。
jsls (站内联系TA)
10楼: Originally posted by starseacow at 2012-10-02 16:12:05
两种方法都经过硫酸处理，因此测定结果中都包含纤维素脱水生成的那部分糖。...恩，谢谢，跟我想的一样
嘟嘟才靖 (站内联系TA)
是这样的 硫酸蒽酮法其实原理是这样的 利用硫酸将多糖分解为单糖，然后呢进行测定 就是测定总糖，至于测定可溶性糖 需要选择合适的提取方法 你如果用水或者80%醇提取 这样提取的都是可溶性单糖和可溶性多糖 :tiger09:
夏天的风雪儿 (站内联系TA)
楼主能不能把1956年的文献Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances
分享下，谢谢。。QQ1054079700
幽幽深谷竹 (站内联系TA)
13楼: Originally posted by 夏天的风雪儿 at 2013-04-17 22:38:34
楼主能不能把1956年的文献Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances
分享下，谢谢。。QQ1054079700我目前不在学校，校外不好下载，等我回去了再说吧
夏天的风雪儿 (站内联系TA)
:hand::hand:
xiaozhe026 (站内联系TA)
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
楼主提的问题很好，以前也困惑了我很久，根据看过的一些资料，整理回答如下，希望有更专业的虫友指正：
首先，明确概念，总糖也可称为碳水化合物，它包括单糖，寡糖，多糖等等（其中有些单糖和二糖，由于分子中含 ...你好，我用苯酚硫酸法测定提取物中多糖含量，计算方面有些不懂。我做小麦麸皮中阿拉伯木聚糖的提取。麦麸经过脱脂、去淀粉、去蛋白处理，然后乙醇沉淀得到阿拉伯木聚糖，采用地衣酚-盐酸法测定提取物中阿拉伯木聚糖含量，苯酚-硫酸法测定提取物中总糖含量，以此计算阿拉伯木聚糖的纯度。苯酚-硫酸法是先测定样品提取液的吸光度，还要计算转换因子，用的是精制糖（脱脂、去淀粉、去蛋白后乙醇沉淀的糖）来测定的，我提取的糖也相当于是精制糖了，那么不就没法测定提取液的吸光度了?不知道可明白我的表述，有些混乱。
starseacow (站内联系TA)
16楼: Originally posted by xiaozhe026 at 2013-07-20 15:03:16
你好，我用苯酚硫酸法测定提取物中多糖含量，计算方面有些不懂。我做小麦麸皮中阿拉伯木聚糖的提取。麦麸经过脱脂、去淀粉、去蛋白处理，然后乙醇沉淀得到阿拉伯木聚糖，采用地衣酚-盐酸法测定提取物中阿拉伯木聚糖 ...确实不明白，你的问题到底是什么？
xiaozhe026 (站内联系TA)
17楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-20 15:29:40
确实不明白，你的问题到底是什么？...额，好吧，就是计算问题。
以一篇文献为例：木瓜粉样：精确称取野木瓜粉末0.2g，用80%乙醉浸泡过夜，索氏抽提器中用80%乙醉回流3h，以去除单搪、低聚糖、普类及生物碱等成分。残渣挥干乙醇后用蒸馏水抽提2h，反复洗至250ml容量瓶中，定容成样品液。吸取样品液0.5ml，测吸光度，按标准曲线和下式计算样品中多糖的百分含量。多糖含量(%)=CxDxF/W。式中,C为样品液中葡萄糖的浓度;D为样品液的稀释因素:F为换算因子;W为样品的重量。换算因子的测定，精确称取干操至恒重的精制野木瓜多糖（样品处理一脱脂—浸提一抽滤除渣一减压浓缩一乙醇沉淀多糖—真空干燥—粗多糖—复溶—脱蛋白—离心分离—乙醉沉淀多糖一真空干燥—精制多糖）4mg，置于50ml容量瓶中，加水溶解至刻度。吸取上述溶液1.0ml，测定吸光度，求出此精制多糖中葡萄糖的浓度，按下式计算出换算因子F,F=w/(cxD)。式中,w为多糖重量(mg);C为精制多糖中葡萄糖的浓度(ug/ml)，D为多糖的稀释因素。
以上是文献中测定的方法。我做的是麦麸中的阿拉伯木聚糖，提出的阿拉伯木聚糖已经过脱脂、去淀粉、去蛋白处理，然后乙醇沉淀的。现在我想测提取物中的总糖含量，用苯酚-硫酸法。上面文献中样品多糖是直接提取的，没经过除蛋白等步骤，而且测得是提取液，我现在的提取物已经除过蛋白、脂肪、淀粉等，而且是冻干的，那我要怎么计算呢？
xiaozhe026 (站内联系TA)
17楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-20 15:29:40
确实不明白，你的问题到底是什么？...也就是说，一般都是用苯酚硫酸法测定某种东西（如木瓜、无花果、油菜籽粉等）中的多糖含量，而我是测定提取物（阿拉伯木聚糖）中的总糖含量
联系客服
