老药新用之丹参酮：丹参酮与病毒性心肌炎

夏天和 吴婷婷 邬涛 任跃 王珍全 吴蓉洲

《中华心血管病杂志》2015年2期

目的

观察丹参酮对病毒性心肌炎小鼠心肌是否具有保护作用，并探讨其作用机制。

方法

清洁级近交系Balb/c小鼠，雄性，4～6周龄，共110只。采用随机数字表法将小鼠分为5组，分别为心肌炎对照组、JAK激酶2(janus kinase 2，JAK2)抑制剂组(JAK2抑制剂组)、丹参酮ⅡA组(丹参酮组)、JAK2抑制剂加用丹参酮组(JAK2抑制剂＋丹参酮组)各25只，以及正常对照组10只。

苏木精伊红(HE)染色后光镜下观察小鼠心肌组织病理学改变。免疫组织化学法、蛋白质印迹分析法检测心肌信号转导子与转录激活子1(STAT1)磷酸化表达水平。化学发光法测定小鼠血清心肌肌钙蛋白－I(cTnI)的表达水平。

将心肌病理积分与磷酸化STAT1(p－STAT1)的免疫组织化学吸光度值、血清cTnI含量作相关性分析。

结果

(1)心肌病理炎症积分检测结果：JAK2抑制剂组和JAK2抑制剂＋丹参酮组小鼠心肌病理炎症积分均明显高于心肌炎对照组(3.35±0.57和3.34±0.54比2.12±0.39，P均<0.01)，丹参酮组小鼠心肌病理炎症积分明显低于心肌炎对照组(1.40±0.34比2.12±0.39，P<0.01)。

(2)心肌细胞p－STAT1表达水平的检测结果：JAK2抑制剂组和JAK2抑制剂＋丹参酮组小鼠心肌p－STAT1表达水平的平吸光度值均明显低于心肌炎对照组(0.017±0.010和0.020±0.010比0.246±0.010，P均<0.01)，与正常对照组比较差异则无统计学意义(P>0.05)，而丹参酮组心肌p－STAT1表达水平则明显高于心肌炎对照组(0.444±0.060比0.246±0.010，P<0.01)。

(3)血清cTnI水平检测结果：心肌炎对照组、JAK2抑制剂组、丹参酮组及JAK2抑制剂＋丹参酮组小鼠血清cTnI水平均明显高于正常对照组[(0.42±0.06)、(1.17±0.25)、(0.23±0.05)和(1.04±0.19)μg/L比(0.02±0.01)μg/L，P均<0.01]。

JAK2抑制剂组和JAK2抑制剂＋丹参酮组小鼠血清cTnI水平均明显高于心肌炎对照组[(1.17±0.25)和(1.04±0.19)μg/L比(0.42±0.06)μg/L，P均<0.01]，丹参酮组小鼠血清cTnI水平则明显低于心肌炎对照组[(0.23±0.05)μg/L比(0.42±0.06)μg/L，P<0.01]。

(4)相关性分析结果：p－STAT1的免疫组织化学吸光度值与心肌病理炎症积分呈负相关(R²＝0.738，P<0.01)，血清cTnI含量与心肌病理炎症积分呈正相关(R²＝0.766，P<0.01)。

结论

丹参酮可通过活化JAK2－STAT1通路，上调p－STAT1表达，从而减轻病毒性心肌炎小鼠的心肌损伤。

丹参酮ⅡA是中国传统中药丹参中的主要活性成分，现已广泛应用于心脑血管疾病、肿瘤、白血病、肝纤维化等疾病的治疗，可有效抵抗氧化应激，改善心肌能量代谢，抗细胞凋亡，保护血管内皮、抑制病毒复制，抑制心肌纤维化，增加心肌收缩力，但参与其中的信号机制尚不清楚。

Xu等在刀豆素A介导的小鼠肝炎模型中发现，丹参酮ⅡA对γ干扰素(IFN－γ)/STAT1信号通路具有调控作用。故推测丹参酮在病毒性心肌炎中可能通过JAK2/STAT1通路对心肌起保护作用。

本研究通过JAK2抑制剂、丹参酮干预心肌炎小鼠发现，丹参酮组小鼠心肌炎症细胞浸润范围局限，坏死区域小，病理炎症积分较心肌炎对照组低，与血清cTnI值呈正相关。

应用免疫印迹法检测心肌炎对照组、JAK2抑制剂组、丹参酮组及JAK2抑制剂＋丹参酮组的STAT1蛋白表达水平，发现各组小鼠心肌总STAT1蛋白表达水平差异无统计学意义，而心肌炎对照组小鼠心肌p－STAT1蛋白表达水平明显高于正常对照组及JAK2抑制剂组，丹参酮组小鼠心肌p－STAT1蛋白表达水平升高更为显著，相关性分析显示STAT1蛋白磷酸化水平与炎症病理积分呈负相关。

推测丹参酮可上调JAK2/STAT1通路，对病毒感染心肌炎小鼠的心肌具有保护作用。

综上所述，病毒性心肌炎中存在JAK2/STAT1信号通路表达，丹参酮可活化JAK2/STAT1通路，上调p－STAT1蛋白的表达水平，从而发挥对心肌的保护作用。