浅谈细胞形态学在流式细胞术中的作用

王术国 青岛市市立医院检验科

流式细胞术在血液病诊断中的重要作用已经逐渐为大家熟知，然而却献有人提及细胞形态学在流式细胞术中的作用，现就此方面谈谈自己的工作体会。

1．细胞形态学可以帮助确定送检的流式标本是否合格。

把送检的流式标本涂片染色，通过和骨髓涂片形态学对比，观察流式标本稀释程度，确定标本是否合格。如骨髓涂片原始白血病细胞占20％，而流式标本染色镜检白血病细胞只有5％，则可以确定是送检的标本稀释，而不能据此诊断为MDS，这是由于骨髓穿刺时一般先抽取少量骨髓液涂片，然后再抽较多骨髓用于流式、染色体及基因检测，再次抽取的量较大，容易稀释。

2．细胞形态学帮助确定流式测定方向，合理抗体组合。

形态学确定疾病方向后，流式才能有的放矢。比如说，形态学考虑是典型浆细胞骨髓瘤，流式就不必做急性白血病的相关抗体，其实大部分急性白血病和骨髓瘤光凭形态学就可以确诊，这部分患者做流式时完全可以少加些无关的抗体，比如形态学确定是AML-M3，那就不用加CD3 CD41等了。再比如形态学怀疑AML-M7，那么就一定要加上巨核细胞的抗体。抗体的组合可以结合形态学更加合理确定，因人而异，避免浪费，减轻患者负担。

3．帮助流式数据分析

当在流式图中发现不明的细胞团时，可以结合形态做出分析。比如骨髓成骨细胞较多时，流式分析发现异常细胞团，抗体又不够全面，则很难确定是什么细胞，而形态学认定成骨细胞较为容易，流式分析时通过和细胞形态学分类的百分比进行比较，可以考虑到成骨细胞，再有针对性的添加抗体。再比如骨髓中发现3％的疑似大B细胞淋巴瘤，在流式细胞分析时可能不易发现异常细胞团，可有针对性的用FSC/CD19设门寻找体积较大的CD19+细胞进行分析。

4．在淋巴瘤的诊断过程中，单凭抗体的表达有时难以做出判断，二者的结合能够提高分类的准确性。

比如脾边缘带淋巴瘤细胞的绒毛，淋巴浆淋巴瘤的淋巴样浆细胞，幼淋巴细胞白血病中存在明显的核仁，形态上的特点再结合抗体的表达情况，往往有利于正确判断。淋巴瘤的诊断大多流式实验室根据CD5、CD10的表达情况只报告到CD5-CD10-、CD5+CD10-、CD5+CD10+、CD5-CD10+淋巴细胞肿瘤这一层次，不再继续深入报告，个人认为可以根据抗体的表达情况缩小诊断范围，然后结合形态进一步缩小范围，最后给临床进一步的可能提示。

5．在M0 M7 混合细胞白血病及髓和淋的鉴别上，免疫分型比较特异，在粒和单的鉴别上则缺乏特异性，要结合形态学和细胞化学染色。

慢性粒单细胞白血病（CMML）形态学上不难确诊，CMML中的异常单核细胞，流式有时会误认为幼稚单核，原因在于CD34阴性时，流式不易区分原幼单核和成熟单核。今年碰到过一例，形态诊断为CMML，流式结果考虑为AML-M4，几经辗转最终确定是CMML。还有M3与嗜碱性粒细胞白血病的鉴别上，流式鉴别艰难，形态结合化学染色有很大优势。

目前流式细胞术和细胞形态学的结合存在体制上和认识上的误区，很多医院细胞形态和流式细胞术分居两个科室，做流式的老师并不懂形态学，流式标本收到后并不知道标本取材如何，做什么方向，而形态室也不了解流式细胞仪的操作及分析，二者不能结合起来，这样就不能很好的解决碰到的问题。我院检验科的模式借鉴山东省立医院的模式，就是形态室中有流式细胞仪，两个方面知识互相补充，相互提高，提升了诊断水平，同时也降低了执业风险，希望这种模式得以推广。

个人工作的一点体会，不对之处，恳请批评指正。

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