淡紫拟青霉菌剂研发及其生物肥药对香蕉枯萎病防治效果研究

【摘要】：香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)引起的毁灭性土传病害，造成香蕉产业的巨大损失。本文以香蕉枯萎病生防真菌淡紫拟青霉为基础，对该菌的菌剂进行相关的研发并研究该菌及其菌剂-生物肥药对香蕉枯萎病的防治效果。 淡紫拟青霉菌液在不同浓度、不同pH、不同紫外线照射时间和不同NaCl浓度等不同条件下对香蕉枯萎病菌都有较强的的抑制作用。但其中40℃条件下处理30min对香蕉枯萎病菌FJAT-3076和香蕉枯萎病菌FJAT-370的抑菌率分别84.38%和85.68%。60℃条件下处理可保持部分活性，对在85℃和105℃条件下处理基本失去活性。 利用气相色谱-质谱联用仪对淡紫拟青霉发酵过程中的次生代谢物进行了组分分析。共分离并鉴定了25种高匹配率的次生代谢物，其中烷烃类最多（17种）苯2种、酚2种、烯烃1种、丙腈1种、酯1种、羧酸1种。116-228h主要次生代谢物为烷烃类。 淡紫拟青霉菌在分别添加米糠、花生饼粉、大米粉、地瓜干粉、面粉、马铃薯淀粉、菜籽粉的垫料中可以发酵生长，其中在垫料200g中添加60g地瓜干粉发酵能力最强，初始活菌数为1.0×106cfu/g，发酵8天后活菌数增加到7.5×108cfu/g。固体发酵后制备的生物肥药在4℃和常温条件下保存，淡紫拟青霉活菌含量均能很好的维持，含水量为30%和50%的生物肥药中活菌含量最高。 海藻酸钠包埋法是包埋淡紫拟青霉菌最好的方法，最佳固化温度为4℃。单因素试验表明海藻酸钠包埋淡紫拟青霉菌的最佳固化时间为2h，最佳接菌量为25%，最佳海藻酸钠浓度为5%，最佳CaCl2浓度为12%。淡紫拟青霉的固定化颗粒在查式培养基中发酵7天可以增加活菌数。包埋对淡紫拟青霉有良好的保护和增殖作用，淡紫拟青霉固定化细胞颗粒初始活菌数2.63×107cfu/g，在4℃冰箱中保存60天，活菌数为5.50×107cfu/g。 淡紫拟青霉菌及其菌剂生物肥药对香蕉枯萎病的盆栽防效分别是78.67%和72.84%，同时还能显著促进香蕉植株根、茎、叶的生长，其中用量占土壤质量比为15%的淡紫拟青霉生物肥药对香蕉的促长作用最大。该菌可以在香蕉根际土壤和根围土壤定殖，但不能在香蕉植株的根、茎、叶内定殖。该菌及其生物肥药能提高香蕉植株PPO和SOD的活性，但对过氧化物酶（POD）活性变化没有影响。 淡紫拟青霉菌及其生物肥药可以提高香蕉根际土壤的几丁质酶、脲酶和过氧化氢酶活性。不同时间淡紫拟青霉生物肥药处理组和对照组香蕉根际土壤共检测到45种PLFAs标记。整体上处理组微生物总量和细菌总量、真菌总量和优势度指数、丰富度指数、多样性指数均大于对照组。