斑翅果蝇(Drosophila suzukii)是一种入侵世界诸多地区的作物害虫,对水果生产造成了重大的农业和经济损失。斑翅果蝇将卵深深地产在不腐烂的成熟果实的软肉中,导致果实损坏,且限制了喷雾式杀虫剂的有效性。樱桃、覆盆子、黑莓、蓝莓、草莓、桃子、李子、油桃、葡萄,橄榄、西红柿、猕猴桃、无花果和苹果都被发现受其危害。2008 年,在美国加利福尼亚州、俄勒冈州和华盛顿州,斑翅果蝇导致的损失估计 50 亿美元。
目前用于抑制斑翅果蝇种群的主要方式是杀虫剂。然而,越来越多的证据表明,斑翅果蝇正在对杀虫剂产生有可能广泛的抗药性。考虑到这些非特异性广谱杀虫剂对环境的影响,寻找环境友好的害虫管理方法十分必要。
(来源:Agragene 官网)
近日,加州大学圣地亚哥分校(University of California San Diego)的研究人员将基于 CRISPR 的新技术应用在了斑翅果蝇的控制上。
该校生物科学学院细胞与发育生物学系教授 Omar Akbari 和 Nikolay Kandul 等其他研究人员于 2019 年首次在普通果蝇(Drosophila melanogaster)中展示了“精确引导的昆虫不育技术(Precision Guided Sterile Insect Technology,pgSIT)”。该方法使用可编程的 CRISPR 技术来编辑控制昆虫性别决定和生育能力的关键基因,后来也被证明适用于蚊子。
Akbari 共同创立了生物技术公司 Agragene,该公司已从加州大学 Riverside 分校(Akbari 最初领导该技术的开发)获得了 pgSIT 基础技术许可,并正在实施由美国农业部管理的 pgSIT 田间试验。该公司希望这些试验能够证明 pgSIT 的安全性和有效性,并能通过监管部门批准,以在农业上广泛应用。
pgSIT 开发的昆虫卵被部署到目标种群中,只有不育的雄性昆虫才能孵化;不育雄性交配后产生的后代不育,从而达到抑制种群数量的目标。
(来源:Agragene 官网)
现在,他们已将该技术用于斑翅果蝇,研究成果“Precision Guided Sterile Males Suppress Populations of an Invasive Crop Pest”一文发表在 GEN Biotechnology 期刊。
“这是一个安全、进化稳定的系统。”Akbari 说,“此外,该系统不会导致不受控制的传播,也不会在环境中持续存在——这两项重要的安全保障都将有助于其获得使用批准。”
昆虫不育技术(sterile insect technique,SIT)已经使用了半个多世纪。而其背后的概念可以追溯到 20 世纪 30 年代,当时农民找到了将不育雄性释放到田间以减少害虫的方法。到本世纪中叶,美国农民开始使用紫外线辐射对螺旋锥蝇(Cochliomyia hominivorax)进行不育诱导。
SIT 一般通过反复释放绝育的雄性昆虫来抑制种群,这些不育的雄性将与野生雄性竞争,以与野生雌性交配。为了有效地利用昆虫不育技术,理想的解决方案是:(1)大规模饲养昆虫,(2)对雌性进行有效的遗传选择,(3)确保雄性不育,(4)培育具备环境适应力和性竞争力的雄性,(5)具有成本效益的运输和部署、田间投放措施。
传统 SIT 利用 DNA 损伤(如紫外线辐射)来产生绝育雄性,因此需要按照较大的雄/雌比例释放雄性才能抑制当地种群。
而 Akbari 之前通过普通果蝇和埃及伊蚊开发的基于下一代昆虫不育技术的方法,称为“精确引导昆虫不育技术(pgSIT)”,利用 CRISPR/Cas9 技术对导致雌性致死性和雄性不育的特定基因突变位点进行编程诱导。
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▲图 | SIT 和 pgSIT 的比较(来源:[3])
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