意大利外长(坐者左)、德国希特勒(坐者右)和日本大使出席条约签字仪式
1940年9月27日，德意日3国法西斯军事轴心正式形成。这个轴心的建立，预示着第二次世界大战即将爆发。
德意日法西斯出于共同对付英、法、美、苏等国的共同目的，早在1936年就签订了《反共产国际协定》。
到1940年，迫于形势的发展，德意日进一步互相勾结。此时，日本为了争夺殖民地利益，决定不顾一切地发动涉及英美的太平洋战争。日为了与英美作战，希望得到德国战略上的支持;而当时的德国，已确定于次年6月发动侵苏战争，因而也需要日本的支持，它希望日发动远东战争能够拖住英美。由此，德意日尽弃前嫌，迅速接近。
1940年9月，德特使史塔玛来到日本，同日本外相松冈洋右举行会谈，提出了3国同盟的具体目标，包括努力共同防止美国参战。
早在史塔玛访日的前几个月，日本就一直在讨论是否要加强同德意联盟的问题。以松冈洋右为代表的一派提出了如下宗旨：“对于德国，要扩充防共协定的精神，使之进一步发展为针对苏联的军事同盟;对于意大利，则主要是缔造可以用来牵制英法的秘密协定。”随着9月德国特使史塔玛的访日，日本的这一图谋终于如愿以偿。
日本政府在德国特使到来之前，就数次召开首相、外相、陆相和海相四相会议，讨论外务省提出的《关于加强日德意轴心事宜》的议案，决定了同史塔玛特使谈判的要点。根据这个决定，松冈洋右同史塔玛在9日及10日举行了两天会议，并就3国条约取得了一致意见。
9月16日，日本召开御前会议，讨论日本外相松冈洋右与史塔玛的会谈结果。在这次会议上，松冈洋右等人认为3国军事同盟具有防止美国干涉和参加欧洲战争与中日战争的作用，并主张同苏联结合起来，共同反对美英。
日本在召开御前会议之后，又于9月26日，将日德意3国条约的草本交枢密院咨询。次日晚8时15分，终于在3国条约上签字。德国虽然在联苏还是反苏问题上与日本不一致，但仍含糊其辞与日本签订此约。意大利也同时签了字。
《德意日三国同盟条约》有效期为10年，其内容主要是：日本承认并尊重德国和意大利在欧洲建设新秩序的领导地位;德意则承认日本在大东亚建设新秩序的领导地位;德意日约定，3国中任何一国遭到现在尚未参加欧洲战争及日华纠纷的一国攻击时，3国须用全部的政治、经济和军事手段互相援助;上述条款对各国同苏联的现存的政治状况并无任何影响。
条约签字后，松冈洋右还同德国驻日大使鄂图互换了关于德国委任日本统治一战前德国在太平洋的岛屿以及关于对苏政策等秘密文件。
3国同盟条约签订的第二年，德国便发动了侵苏战争，日本发动了太平洋战争。1942年1月18日，德意日又签订军事协定，以东经70°为界，划定了各自的作战区域。
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