光合细菌是兼性厌氧的,不同的光合细菌用的培养基不一样我现在就在做关于光合细菌的问题,这几中细菌都是常见的细菌,培养基在许多微生物上后面都有,光合细菌的富集培养基是: NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO2 0.02g NaCl0.05-0.2g 三生长因子1ml 微量元素溶液1ml 蒸馏水97ml PH7.0 生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐等)及可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊 光合细菌富集纯化详见网易网盘 光合细菌培养基配方 氯化氨1克,磷酸氢二钾0.5克,氯化镁0.2克,氯化钠2克,酵母膏0.1克,水900毫升。 各成份溶解后15磅灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可。 响应面设计法优化光合细菌培养基配方。培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培养基配方为:醋酸钠1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液OD600可以达到0.5以上 光合细菌(含生产工艺) 优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样? 一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几点:
1、外观上看比较均匀,基本无上下分层。 相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,包括我中心初期的产品也是这样,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深,最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。 而优秀的光合细菌菌种和产品,上下都是比较均匀的,没有较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目。(当然,除了培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外) 这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的。少数地方,由于水质的原因,可能会产生稍稍的差别。 2、没有粘壁现象。 很多市场上的产品都有粘壁现象,即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层,就象是油漆一样,洗不掉,抹不去。这主要是在培养过程中形成的,也有在保存过程中形成的。 优秀的光合细菌菌种和产品,应该是没有一丝一毫的粘壁现象。所以外观上看起来质量也更好。 3、颜色的深度比较深。 根据国家质量标准,可以用721分光光度计,测量A660nm处的吸光值,如果大于1.5,则说明,浓度一般都在30亿/毫升以上,好的光合细菌菌种和产品都在1.5以上。 4、颜色鲜艳无杂色。 优秀的菌种和产品,不仅颜色深,而且,比较鲜艳,没有杂色,比如是大红色,血红色,或是深紫色,看起来是很悦目的,没有不良的杂色,或是暗暗的颜色。 5、保存期限长。 可以保存夏天3月以上,冬天6月以上。在期限内外观基本无变化。保持80%以上的活力。 6、培养周期短,接种量少。 好的菌种,接种量在10--20%即可,我中心推崇20%接种量,培养条件好的,可只用10%接种量,都可以在3--5天内培养好(条件是用白炽灯培养, 温度在30--37度),或在7天培养好(条件是用太阳光照培养,阳光充足时,仅是白天照射培养,液体温度在30--38度,晚上不培养)。 而市场上很多菌种要50%以上接种量,当然,在有条件情况下,用大接种量是有好处的,在有条件的情况下,我中心也推荐您用30%的接种量,能更稳妥,更快地培养成功。 7、基本不存在杂菌污染 在保证清洁培养的情况下,一般不存在杂菌污染的情况,当然,这也与培养基配方技术有一定关系。 8、可以无限制地循环培养下去。 不仅可以无限制地循环培养下去,而且,性能不变,质量不减。当然,这也与培养基配方技术有一定关系。
小规模光合细菌灯光培养中用60--100瓦白炽灯较好 在实验室用纸箱法培养光合细菌时,要用到白炽灯(注意,不能用日光灯,日光灯的光波不适合培养光合细菌,所以日光灯是没有用的),以前做的试验由于是用 500*500*350mm的小纸箱,所以有40瓦的白炽灯就可以维持箱内温度在35℃左右,甚至到40℃,用40瓦的白炽灯培养,一般需要5天以上才能 长得非常深红色。 后来用到了700*700mm的大纸箱,我们才改用60瓦的白炽灯,发现培养的时间可以大大缩短了,而且进入冬季后,纸箱中的温度只能维持到25℃,我们 发现,即使是在25℃的箱内温度下,也只要培养4天左右就长得非常深红色了,所以我们分析,可能是60瓦以上的白炽灯的光波更加适合于光合细菌的生长繁 殖,所以我们建议各位用户,改用60瓦的白炽灯,可以大大提高培养的成功率,和大大缩短培养的时间。 如果是夏天,若用60瓦的白炽灯太热,可以在纸箱上戮大量孔洞,用于散热,维持箱内温度在35度左右。 光合细菌发生剂的用法(即光合细菌的生产工艺) 一、光合细菌生长所需的营养条件 用“光合细菌发生剂”生产的终端产品:光合细菌液,PSB细胞浓度达到30--100亿/毫升,生产成本只要0.30元/公斤,而使 用价值可达到2元/公斤,投入产出比达到1:6--12以上。做成的液体产品,密封保存在通气干燥处,可保质达1年以上。 二、光合细菌生长所需环境条件 有了营养全面的“光合细菌发生剂”,还必须有一个良好的培养环境条件,才能生产出优质产品出来。PSB所需的环境条件有以下几个: 1:培养介质,含杂菌较少的清洁淡水。地下水、河水、海水等,硬度低的水更好(如河水),选取水源时,最好先做几种水源的对比试验,使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色(生长良好),就选用哪里的水作为生产用水。自来水取自河水,硬度低,杂菌少,只要菌种能耐漂白粉杀菌剂,用自来水比其它水反而更好更快。您不妨做一次自来水的试验。 2:酸碱度,PH值在8~8.5为最好,光合细菌的适应PH范围在6~10之间。 3:温度,以28~36℃为最适生长温度,其适应的生长温度范围为15~41℃。 4:光照强度,以3000~4000勒克斯(LX)为最佳,即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯作光源,而太阳光照为最好且不要成本。宜春专利中心提供光合细菌发生剂。 三、光合细菌成品的生产 1、培养液的配制 将购得的我中心的光合细菌发生剂取一公斤,放入一个干净的容器中,加入100公斤水,搅拌均匀,直到发生剂(培养基)溶化为止。若容器不够大,则可以少配一点。 注意事项:水源一定要选择好,含菌量较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水。从经济、实用的角度考虑,地下水(井水)含菌量低,为最佳水源,另外,若当地 自来水含氯较低,也可用,效果很好;清洁的地表水也可使用;含氯量较高的自来水应敞口放置两三天或调PH值至偏碱后使用;蒸馏水及纯净水固然很好,但成本 太高,可用于提纯菌种。 选择容器:少量生产可用透明度较高的白色或透明塑料桶、玻璃容器。大量生产可用水泥池、水泥船,也可临时开挖土池,垫上双层塑料膜防漏防浑浊,培养液的深度为30公分最佳。 2、培养方式有以下三种: (1)做小试验培养的方法 容器为:1.25升的饮料瓶,即小规模生产方法,由于饮料瓶的量小,瓶子透明度好,又密封,所以培养环境好,需要的接种量也少, 比较简单。 设备为:光照箱,用一个大的纸箱,放一个40瓦的白炽灯悬挂在箱子的空中(注意防火),纸箱内壁四周,堆放着已装好了培养液并 接了种的饮料瓶,这样,既达到了保温到25—40度的效果,又达到了光照的效果。 较大的箱子要用60瓦的白炽灯,一般一个箱子,可 放这种饮料瓶8个以上,即一次可生产约10公斤/箱。 灯泡与瓶子的距离不超过20厘米。夏天,可撤去纸箱,以防温度过高,春秋秋 天,也要在纸箱四周钻孔以散热。 操作规程如下: 配料:培养液为1%浓度的发生剂溶液,接种量为20%,注意水源必须一干净卫生,最好用地下水,自来水可以试用一下, 第一次做试验时,要多选择几种水源同时做,以确定哪种水源最好,最先转成红色的水源最好,可确定为今后的生产用水。 培养:在箱子内,打开白炽灯,照几天即可,一般可达到温度在35度,控制在30--40度之内,所以要密切注意温度不要过高,第一次培养可能需要5天以上,一定要注意,每天要摇晃两次,这很重要,菌种适应了贵地的水源后,一般只需要2天即可长成深红色。 培养成熟标准:以培养液长成深红色为准,这时一般成品的光合细菌浓度可达到30--100亿/毫升。 (2)用塑料桶进行大规模生产 或用培养虾苗用的塑料袋来做效果更好。一袋20公斤的样子。 例如容器选用25公斤装的大塑料桶,由于条件不如做小试验的培养方法好,所以接种量要达到至少20%以上的量。即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培养液(即1%的培养基溶液),再加入2.5公斤的菌种液,摇匀。 ①利用太阳能培养: 把上述塑料桶放到太阳底下晒即可,只要注意:夏季气温过高,若用太阳作为光照能源,则应采取部分遮阳(用黑色的遮阳塑料网),通风的降温措施,以防光合细 菌快速老化死亡;冬天则气温低,则要采取搭建一个塑料暖棚增温的方法,把塑料桶放入暖棚内晒太阳即可;春秋季则可直接放在太阳底下不用管即可。总之要使之 温度在25度--36度之间最好。过些日子它自然会长成深红色的成品。经方法即是懒汉培养工艺法, ②利用白炽灯作为光能生产:在一个容器内悬挂一个白炽灯,容器内装的培养液深度不得大于30公分,灯泡与液面距离不得大于20公分。 (3)用塑料膜做的池子来大规模生产 您还可以这样利用太阳能大规模培养(以培养2吨菌液为例): 选择阳光充足的地方,开挖一土池(长5米、宽1.8米、深0.4米),有现成的水泥池更好。垫上塑料薄膜,然后再铺上桶状塑料薄膜,并将其一端密封,从 另一端加入1.8吨配制好的培养液,和0.2吨的菌种,一共2吨,排尽薄膜中空气后,再将该端密封。保持适当的温度,冬天如果温度过低,搭建透明塑料薄膜 棚增温。这样,几天后,菌液培养成熟。长成深红色。 也可以在室外挖一个土坑,深40厘米,垫上 一层塑料薄膜,再倒入培养液,液面上再盖一层塑料薄膜,以免与大量空气接触,造成污染杂菌,再用太阳照射培养成熟,天气冷就搭塑料棚升温。 当然这一套装置也可放于室内,用每半平方料一个60瓦白炽灯照射,灯与液面距离小于25厘米,温度不够,也要搭一个室内塑料棚,棚内放一炉火即可保温到 30度以上。 四、光合细菌固态产品的生产 将高浓度PSB菌液用蛭石粉或沸石粉吸附后,阴干或风干粉碎即得粉状固体PSB产品。可包装出厂,便于运输和售卖。也更象一个产品了。一般售价可达到2元/公斤以上,光合细菌︰沸石粉=1︰3~4。也可用其它载体来做 干燥吸附剂,如草炭、硅藻土等。
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