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病理切片技术规范(一)

来源:病理诊断与技术规范


病理技术主要包括常规切片、冷冻切片、组织化学、免疫组织化学及分子病理学等技木其中常规切片是最主要、最基础的工作;迄今为止,病理切片制作过程的许多步骤还需手工操作,因此,强化技术人员的责任意识,加强基本技能训练,严格执行规范化操作,是确保病理技术质量稳步提高的前提和保证。


一、标本的接收与清点制度

(1)巨检结束后,病理医师应向技术组当面交付组织块,点清块数,记录并签收。有特殊要求的标本(如脱钙、糖原染色等)应当面向技术组说明,以便进行特殊处理。


(2)组织包埋完成后必须清点蜡块数量,以防组织块在脱水、包埋过程中遗失。


(3)切片完成后交付医师时,必须按照记录当面清点验收。


二、制片过程中的注意事项

1、组织处理:此过程包括固定、脱水、透明、浸蜡和包埋,是制作优质切片的关键,一旦组织处理有欠缺,往往导致无法挽回的后果。


(1)制片过程按操作流程进行。

(2)有条件的单位应将手术大标本与活检小标本分开固定、脱水。

(3)取材后组织应补充固定。手术标本不应少于6h,活检标本不应少于3h;固定液必须及时更换,固定后组织宜流水冲洗处理。

(4)固定、脱水温度不得高于37℃。

(5)包埋用石蜡必须过滤。

(6)试剂必须及时更换(详见试剂的配制及更换制度)。


2、切片:是制片技术中技能要求很高的步骤,即使是同一蜡块,使用同一台切片机和同一切片刀,不同的操作者也会切出不同质量的片子。


(1)切片刀必须锋利,用力均匀;切片厚度以4um为宜,切片必须完整,无污染、皱褶和刀痕


(2)组织片贴附应在除去标签位置后居玻片的中间,各块组织的方向应一致。


(3)胃镜、支气管镜、穿刺等小活检组织须做间断连续切片,一般数量不少于8张。


3、染色封片

(1)烤片温度应在60-62℃左右,不得高于65℃,时间不能少于20min。


(2)染色试剂必须根据切片染色质量按要求及时更换。


(3)切片封固前必须经乙醇充分脱水、二甲苯透明,湿封。不得用温箱烤干或用电吹风吹干后封片。


(4)盖玻片使用前必须清洗(真空包装除外)。


(5)封片时不应有气泡,不得有树胶外溢。


4、其他

(1)标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚、整齐,且不易褪色,有条件者尽量采用打印标签。


(2)取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。


三、资料归档

(1)所有送检病例资料均必须预先登记、编号,编号应包括受检年份和登记序号,不宜采用多年流水编号方式。若用计算机管理,必须有文字打印材料及资料备份(以光盘刻录为佳)。


(2)医生完成诊断、发出病理报告后,切片及相关资料应及时送档案室归档。负责资料管理的技术员应与医生认真清点切片及相关资料,做好交接工作,并做出书面记录。


(3)切片必须晾干或烘干后,才能整理存档。存档切片应按序排列。


(4)蜡块必须在切面封上蜡后才能人柜。归档蜡块应按序排列,编号标签应朝上,以利查找。


(5)各种档案柜外面应写明年份和编号,以利查找。


(6)各种申请单应及时清点,归类(组织病理学、细胞病理学、术中冷冻会诊、会诊、尸检等检查申请单),按年份和顺序装订成册,人柜备查。


四、试剂的配制及管理

(1)配制、更换试剂必须详细登记。


(2)各种染料、试剂应选用化学纯以上的级别。


(3)化学试剂应通风,常温避光存放,禁止接触明火及其他热源,危险或有毒试剂应由专人专柜保管。


(4)配好的试剂染料应盛于磨口瓶内,避光试剂必须用棕色瓶,需冷藏试剂应放置于冰箱内备用。


(5)各种备用试剂染料瓶签上应标明试剂名称、浓度和配置时间。


(6)各类化学试剂应进行定期更换,更换的时间应根据标本的多少进行量化。


(7)废弃试剂建议由专业公司回收。目前应排入具有污水处理功能的下水道,不得直接排入雨水管。


五、仪器的使用和保养

(1)显微镜:应加罩,放置于干燥、少灰的房间,勿暴露在日光中。电光源显微镜使用完毕后必须先将亮度打到最小,然后关闭电源(目镜上的灰尘,应该先用吸耳球吹净,再用擦镜纸由内向外擦拭;物镜应用擦镜纸擦拭);每次用完后须盖好,由专业维修人员定期维修保养。


(2)切片机:切片时应用力均匀,每次用完后将机器清扫干净,然后用松节油擦拭,需要加油的地方加上润滑油。


(3)自动脱水机(全封闭式):设定好程序,检查液体瓶有无插紧,浸蜡用石蜡必须过滤,每次用完后必须擦拭干净。


(4)自动脱水机(提篮式):设定好程序,检查加热部分的水位;检查试剂量是否足够;检查提篮周围有无大头针外露,以防提篮卡住。每次用完后必须擦拭干净。


(5)磨刀机:保持磨石清洁,磨刀角度尽可能不发生改变;当磨石不平整时,应及时修正。 每次用完后必须擦拭干净。


(6)温箱:应定时检查水位。


(7)冷冻切片机(恒温冷藏式):为保证压缩机正常工作,不应经常开关,以24h恒温(零下15℃至零下20℃)为佳。夜间应设定自动除霜功能,并定期停机清洗,以保持冷冻切片机工作窗的清洁。

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