快速冰冻切片的几点体会

作者：杨月红，袁永辉 （武汉市中心医院，武汉市同济医科大学附属同济医院）

来源：实用医技杂志

快速切片是临床医生在实施手术过程中，就与手术方案有关的诊断问题请求病理医师快速进行的紧急会诊。快速做好精良的冰冻切片是病理医师快速诊断的重要保证。因此，怎样快速做好冰冻切片也是病理技师面临的一个重要问题。从1994年到2004年，我院做了近3000例组织冰冻切片，在不断的摸索过程中，我们现在可以在20min内做出一张高质量的冰冻切片，现将我的体会简介如下。

1、取材

新鲜的手术标本忌浸入酒精、甲醛中，以防组织脱水，尤其注意在取材过程中器械干燥，不沾水，组织不能冲洗，以防冰晶形成，细胞变形。组织块大小合适，长径<>

2、温度

冰冻切片机昼夜24h处于预冷的-4℃左右，做快速切片时将温度降到组织块所需温度。不同组织对温度要求不同，温度过低，组织变脆、易碎，温度过高则组织过软，不能切片[1]。

根据我院多年快速切片的经验，不同组织的适宜温度见表1。

表1 我院常见手术组织适宜温度

组织类型温度（℃）

甲状腺、淋巴结、肝肾-16～-17

子宫、乳腺、卵巢-21～-22

胃、肠、肺-19～-20

皮肤-20～-21

3、切片

先要做好准备工作，使用前将刀架与组织块的角度调整好，调整好后不需要经常变换角度，刀要及时打磨，保持刀口锋利。切片机内要保持清洁，用冰冻切片机消毒液喷洒消毒。切片时用力均匀，厚度约在4Λm～5Λm，特殊要求时，可达到3Λm，切好的组织在干净的玻片上粘附时可顺着一个方向稍微用力轻轻一带，可避免组织摊片过程中皱折，切好后立即放入提前配制好的冰冻切片固定液中及时固定1min～2min[2]。固定液使用专门配制的冰冻切片固定液，经过长期摸索，我院现使用的一种苦味酸固定液，配制方便，固定迅速，对组织的肿胀和收缩有一定的抑制作用，细胞的形态和结构与常规的石蜡切片相差不大，见表2。

表2 苦味酸固定液配制方法

品种重量

苦味酸85%

酒精饱和液75ml

甲醛10ml

丙酮10ml

冰乙酸5ml

乙酸钠1g

4、染色和封片

切片后做快速HE染色，苏木素染色过程需加热进行，一般1min～2min即可。这样做出来的快速切片镜下观结构完整、平坦、无皱折，细胞核与细胞质染色色泽鲜艳，对比清晰，细胞无肿胀，无收缩，近似常规石蜡切片，封片时注意无起气泡及无溢液，切片整洁，标签清楚端正。根据需要可切出半张玻璃片大小、厚薄均匀，一层细胞的组织切片[3]。

5、讨论

由于各种原因影响，冰冻切片的质量不好，会拖延病理报告发出的时间，直接影响着病理诊断的及时性、准确性，归纳下来有几个方面的的因素影响快速切片质量：不适宜的温度；切片皱折过多；组织固定不及时；不适当的固定液以及取材时组织带有水分。冰冻组织带有水分会产生冰晶，引起细胞间针状裂隙，导致正常结构改变，细胞核普遍增大，容易导致误诊。而一张制作精良的快速冰冻切片为病理医生在短时间快速准确的发出病理报告提供了可靠的保证。

参考文献：

[1]洪玉萍。介绍一种快速冰冻切片方法[J].临床与实验病理学杂志，1999，15（5）：351.

[2]骆新兰。冰冻切片常见问题探讨[J].临床与实验病理学杂志，1999，15（4）：273.

[3]列增辉。病理染色技术[J].北京：人民卫生出版社，2000.