这个课题方向再不下手就晚了

细胞间、组织间的通话靠什么？靠分泌到胞外的因子，以及细胞分泌出来“通信使者”：囊泡或者外泌体。

这种细胞间通话有时候是友好的，有时候是恶意的，外泌体在肿瘤的转移、细胞自噬、炎症反应、干细胞分化、免疫逃逸等发挥作用。

（1）国自然关键词：外泌体、微环境、ncRNA

18年国自然中共有249项外泌体的资助，其中111项是和肿瘤细胞的逃逸、耐药、转移等有关，102项和miRNA、lncRNA主题相关，众所周知外泌体中非编码RNA的比例中，miRNA为最多70%，其余的是lncRNA和circRNA等。

项目名称	依托单位	项目类别
外泌体miR-24调控MDSC促进结直肠癌免疫逃逸的分子机制研究	中山大学	青年
机械通气诱导外泌体miRNA在急性肾损伤自噬中的作用及分子机制	广州医科大学	面上
以外泌体为载体的miR-223通过调节SERCA2a和iNOS表达改善脓毒症心功能障碍的机制研究	哈尔滨医科大学	面上
成肌细胞外泌体microRNA对成骨分化的促进作用及其机制	山东省医学科学院	面上
lncRNA IL21-AS1经外泌体诱导肿瘤免疫逃逸微环境致卵巢癌铂类耐药的机制研究	同济大学	面上
卵巢癌外泌体向网膜递送miR-6780b-5p抑制FOXO3诱导微环境活化促进肿瘤转移的研究	华中科技大学	面上
癌相关成纤维细胞通过外泌体lncRNA激活自噬通路促进舌鳞癌化疗抵抗的机制研究	中山大学	面上
外泌体介导的circ-0076303在乳腺癌侵袭转移中的作用及机制研究	南京医科大学	青年
肿瘤干细胞外泌体Tetraspanin分子调节腺癌转移机制研究	南开大学	面上
肿瘤相关巨噬细胞来源CD14+B7-H3+外泌体在肾癌远处转移中的作用和机制	苏州大学	面上
食管癌乏氧微环境下通过外泌体传递microRNA-372诱导放射抵抗的机制研究	复旦大学	青年

外泌体（exosome），像“通信船”或“侦察舰”一样，它们确保了受纳器官做好准备招待肿瘤细胞。具体说来，外泌体触发了受纳器官中必要的分子反应——炎症、血管形成等来欢迎肿瘤细胞，使得当肿瘤细胞到达时可以进行增殖。

（2）外泌体miRNA、lncRNA的研究思路

例如咱们要研究A细胞分泌了外泌体，影响了B细胞或者B组织的功能

①鉴定外泌体

需要首先证明A细胞能分泌外泌体，并且提取鉴定，通过超速离心提取外泌体，并进一步经过密度梯度离心纯化外泌体，电镜观察+鉴定蛋白标志物，例如十大蛋白包括HSPA8，CD63，肌动蛋白，ACTB，GAPDH，ENO1，HSP90AA1，CD9，CD81等。

②外泌体转运能力检测

Transwell转移能力↔外泌体分泌阻断

这个过程要证明外泌体被母细胞分泌后可以迁移，而且能够被宿主细胞所内吞，外泌体的“货物”例如miRNA、lncRNA能被宿主细胞吞噬进去，用transwell和FISH探针来证明迁移能力。

如果能够利用exosome的阻断药物，阻断exosome的transwell的迁移实验，在胞内证明exosome的迁移被阻断后，miRNA和lncRNA在胞内的含量也降低了，这个是从正反两方面证明了外泌体的转运能力检测。

③细胞、动物表型验证

这一步还不简单？外泌体添加到细胞培养基或静脉注射到动物模型，观察表型，简单粗暴，无非就是外泌体的富集好不容易，好贵啊，嗷嗷的！

④ncRNA的测序、分子机制

什么？关注了这么久了，miRNA和lncRNA的机制不知道怎么做？

赶紧读读这些文章啊

（3）外泌体的临床应用

肿瘤早期发现和诊断，Exosome作为保护容器，保护一些肿瘤相关的非编码RNA不受降解，因此可通过检测从肿瘤原发或转移部位释放到血液中的exosome来检测癌症。

clinicaltrials.gov共有68项和“exosome”相关的临床试验，中国有5项，有金陵医院、瑞金医院、华西医院等。

参考文献：

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