儿茶素增加人肝癌细胞放射敏感性的实验研究

【摘要】：目的： 本课题旨在研究儿茶素对人肝癌细胞放射敏感性的影响，并且进一步探讨其机理。着重解决以下问题：（1）儿茶素能否增加人肝癌细胞的放射敏感性及不同浓度的儿茶素的增敏效果如何。（2）探讨儿茶素放射增敏的机制。方法： （1）以体外培养的人肝细胞癌细胞株HepG2为靶细胞，用台盼蓝拒染法和MTT法探讨儿茶素对HepG2细胞经2Gy照射后存活情况的影响，并用克隆形成法研究儿茶素对两株人肝细胞癌细胞株HepG2和BEL-7402的放射敏感性的影响，拟合细胞剂量存活曲线，计算细胞放射敏感性参数D_0、D_q、SF_2、α和β等，计算10％存活水平上儿茶素增敏的SER。 （2）两株人肝细胞癌细胞株HepG2和BEL-7402用儿茶素处理后接受5GyX线照射，用HE染色和流式细胞仪测定不同时间的细胞凋亡比例，与单独照射5Gy的细胞凋亡水平进行比较；通过免疫组织化学方法和流式细胞仪测定儿茶素处理HepG2和BEL-7402后细胞bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化。结果： （1）台盼蓝拒染法和MTT法显示：儿茶素能够降低HepG2细胞经2Gy照射后的细胞存活率，并且这种作用与儿茶素作用的浓度、时间呈相关。克隆形成法证明儿茶素能够增加HepG2和BEL-7402细胞的放射敏感性，1、10μg/ml儿茶素使两株细胞的D_0、D_q、SF_2、α和β均降低；在10％的存活率水平上，1、10μg/ml儿茶素对HapG2的SER分别为1.25和1.54；1、10μg/ml儿茶素对BEL-7402的SER分别为1.21和1石2。 门）用 HE染色和流式细胞仪测定HepGZ 禾 BEL－7402受 SGy 照射后的细胞凋亡水平，结果显示，两株细胞在用 1、10 u g／ml儿茶素处理后接受SGy照射，其细胞凋亡率高于单独接受SGy照射的细胞的凋亡率；而免疫组化法和流式细胞仪测定结果表明，儿茶素处理HepGZ和 BEL刁402后细胞比上蛋白表达降低，Bax蛋白表达增高。结论： ＊V茶素能够增加两株人肝癌细胞HepGZ和 BEL刁402的放射敏感性。 c厂茶素增加 HepGZ和 BELJ402细胞放射敏感性可能是通过增加细胞照射后凋亡率实现的，其分子机制是儿茶素通过改变细胞内bclZ、Bax蛋白表达，从而使细胞凋亡的易感性增加，细胞照射后的凋亡增加。