自1985 年PCR 技术被正式发明以来,该技术迅速在生命科学界得到了普遍认同,Kary Mullis 也因此而获得1993 年的诺贝尔化学奖。从那之后PCR 技术始终没有停止过朝着“更好、更快、更强”目标的前进步伐,其经历了从终点法定性PCR 检测到实时荧光“相对”定量PCR 再到绝对定量数字PCR 技术的发展历程。与传统技术不同,数字PCR 技术将DNA 或RNA 样品分散成大量的微反应单元,然后对众多微反应单元内的靶序列进行单分子模板PCR 扩增、荧光检测和统计学分析,实现绝对定量,不依赖于标准曲线和已知浓度的多个梯度标准品,直接检测样品中核酸的原始浓度。由于这种检测方式具有比传统荧光定量PCR 更加出色的灵敏度和精确性,数字PCR 迅速得到广泛的关注,尤其在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测、核酸拷贝数变异和基因表达量微小差异鉴定方面表现出的优势已被普遍认可。
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彭年才教授在2015 年美国圣地亚哥数字PCR 技术国际会议参会期间,深深感受到数字PCR这一技术的发展潜力和在低丰度核酸样本检测的巨大优势,尤其是意识到国内外该技术发展的巨大差距。因此,开始组织团队编著了这本涵盖数字PCR 原理技术、仪器芯片、数据分析、实验设计和应用发展的专业书籍。旨在将目前数字PCR 技术的发展现状全方位的呈现给读者,也为我国高端科学仪器及医学诊断装备的研发、微机电系统、光机电检测系统的微型化和集成化贡献自己微薄的力量。
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《数字PCR——原理、技术及应用》取材既包括目前数字PCR 技术国内外的发展现状,也包括作者团队近几年的部分研究成果和实验总结,以及作者团队对这些技术内容的系统认识和理解。全书共分6 章,其中第1 章介绍了数字PCR 技术的发展史和基本分析方法;第2 章介绍了现有的数字PCR 仪器系统并进行了对比分析;第3 章描述了数字PCR 实验设计方法和注意事项;第4 章介绍了数字PCR 实验数据处理方法;第5 章介绍了数字PCR 的应用领域;第6 章讨论了数字PCR 技术与其他基因分析技术的对比和发展方向。可作为生命科学、仪器科学与技术、医学、药学、检验检疫相关专业本科生和研究生教材。
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