杨本善，李 雪，文江平，刘向祎
（首都医科大学附属北京同仁医院检验科，北京 100730）
摘要：目的 建立60～80岁表观健康人群血清铁蛋白的参考区间。方法 采用微粒子酶促化学发光法检测239名60～80岁表观健康个体的血清铁蛋白，按性别进行分组比较。以
关键词：铁蛋白；参考区间；老年人
铁蛋白是人体内除血红蛋白外含铁最丰富的蛋白质[1]，是反映人体内铁储存重要的生物学标志物。已有研究证实铁蛋白在铁超负荷疾病中升高，在铁缺乏疾病中降低[2]。铁蛋白还被确定为肿瘤相关标志物，许多恶性肿瘤均可发现含H亚基的铁蛋白增高，与其他肿瘤标志物联合检测有更明确的临床价值，且多数肿瘤在有效治疗后铁蛋白降低[3]。随着年龄的增长，肝、脾、骨髓及全身网状内皮细胞发生退行性改变，含铁组织被激活，崩解、释放铁蛋白增加[4]。血清铁蛋白含量可能随着年龄增长而发生一定的变化。
目前，国内大部分实验室的血清铁蛋白参考区间采用试剂厂商提供的参考区间。因不同国家或地区的人群生活习惯、饮食、遗传等因素不同，且不同方法学结果的相关性也较差，因此各地区实验室有必要为不同年龄、不同性别的人群分别建立血清铁蛋白的参考区间[5]。有研究结果表明，随着孕期的增加，血清铁蛋白水平逐渐降低，孕期妇女血清铁蛋白明显低于正常对照者（P＜0.05）[6]。3～6岁儿童铁蛋白的参考区间也明显低于健康成人，这与铁蛋白的生理功能和3～6岁儿童骨骼、肌肉、内脏的生长发育较快有关[7]。60～80岁老年人是社会的一个大群体，发生各种疾病的概率相对更大，故建立这部分人群血清铁蛋白参考区间的意义尤为重大。但目前对60岁以上人群重视不够，仅有少量文献报道过老年人血清铁蛋白的参考区间[8-9]。我们在对检测方法进行性能验证的基础上，依据美国临床实验室标准化协会（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）C28-A3文件推荐的方法[10]，初步探讨60～80岁老年人群微粒子酶促化学发光法测定血清铁蛋白的参考区间。
1.1 研究对象
选取2014年11月—2015年3月首都医科大学附属北京同仁医院行健康体检的60～80岁老年人群。入选标准：血压、B超、胸片正常，肝功能、肾功能、血脂常规、血常规和尿常规均正常。排除标准：（1）血糖异常人群；（2）尿中有红细胞、白细胞、蛋白的人群；（3）平均红细胞体积、平均血红蛋白浓度、平均血红蛋白含量异常的人群。经以上入选标准和排除标准剔除不合格者，最终入选239名60～80岁表观健康人，其中男120名、女119名。严格按照上述入选标准在2015年3—5月的健康体检人群中选取40名表观健康人用于参考区间验证，其中男20名、女20名，年龄60～80岁。
1.2 样本收集
采集所有对象空腹静脉血3 mL，1 400×g离心10 min分离血清，待完成生化检测后收集剩余血清。排除溶血、乳糜和黄疸等样本，将样本保存于-80 ℃待测，避免反复冻融，冷冻样本仅在检测前复融1次[11]。
1.3 检测方法
采用BECKMAN-COULTER UniCel DxI 800免疫分析系统及配套试剂（微粒子酶促化学发光法，美国Beckman-Coulter公司，试剂批号为435680，配套定标液批号为523562）检测血清铁蛋白。量值溯源至世界卫生组织（World Health Organization，WHO）第2代国际标准物质（IS 80/578），质控品为BIORAD 370（美国伯乐公司，批号为40300）。血红蛋白（hemoglobin，Hb）采用BECKMANCOULTER LH780血液分析仪及配套试剂（美国Beckman-Coulter公司）检测。丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、尿素和肌酐（creatinine，Cr）均采用BECKMANCOULTER AU5800全自动生化分析仪及配套试剂（美国Beckman-Coulter公司）检测。冻存血清统一复融，高速离心后取上清进行检测。操作严格参照仪器和试剂说明书进行。
1.4 质量保证
严格执行室内质控程序，采用BIO-RAD不定值常规生化质控血清（水平1批号为16741，水平2批号为16742）进行室内质控，本实验室铁蛋白项目近1年的平均变异系数（coefficient of variation，CV）为6.6%；2014年室间质评的平均偏移为7.9%。在进行血清铁蛋白定量检测前，对仪器重新进行定标，检测铁蛋白2个水平质控品，确保质控在控。同一天在4 h内完成全部样本检测，避免天间变异。
1.5 统计学方法
采用SPSS 16.0软件进行统计分析。离群值的判断方法依照CLSI C28-A3文件，疑似离群值与相邻值之差（D）与数据全距（R）之比（D/ R）≥1/3判断为离群值。采用Dixon法剔除离群值后使用Kolmogorov-Smirnov法进行正态性检验。结果显示数据均呈正态分布，以
2.1 239名60～80岁表观健康人一般检测项目分析
239名60～80岁表观健康人分别测定Hb、ALT、尿素和Cr，除Hb外，男、女性之间ALT、尿素和Cr差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。
表1 不同性别60～80岁表观健康人一般检测项目分析
注：与男性组比较，*P＜0.05
组别 例数 Hb（g/L） ALT（U/L） 尿素（mmol/L） Cr（μmol/L）男性组 120 109.80±7.00 31.7±7.95 4.95±0.93 86.70±12.10女性组 119 98.55±6.53* 31.5±7.65 4.95±1.03 86.25±12.03
2.2 离群值检验
将所有对象的血清铁蛋白检测结果按性别升序排列，有7个结果D/R≥1/3，判定为离群值并剔除，其中男4名（结果为363.1、540.5、804.4、1 201.2 μg/L）、女3名（结果为331.6、492.1、732.85 μg/L）。
2.3 建立参考区间
239名60～80岁表观健康人血清铁蛋白结果呈正态分布，采用
2.4 验证参考区间
另外选取40名60～80岁老年表观健康人进行参考区间验证，男、女性各20名。男性20名均通过验证，女性19名通过验证。
铁蛋白在肝内合成，除了存在于肝、脾、骨髓等网状内皮系统内外，也广泛存在于其他组织细胞中，在正常情况下为骨髓合成血红蛋白供铁，并按机体的需要向血清中释放。当人体某一系统出现疾病时，铁蛋白可出现异常改变。人血清铁蛋白含量增高是贮存铁组织老化、破坏释放增加和骨髓铁利用功能减退的重要标志之一。因此，血清铁蛋白是反映机体铁负荷最敏感的指标。不同年龄、不同生理状况者血清铁蛋白差异比较大。60～80岁老年人作为一个特殊人群，其生理特征使某些检测项目的结果与健康成人有明显差异，因此建立老年人铁蛋白的参考区间具有重要的意义。
参考区间是目前的研究热点之一。由于居住环境、饮食习惯、情绪和生长特点等生物固有变异的影响，参考区间不会是一个固定的范围[12]，会因地区、性别、年龄、生活水平等不同而出现差异。另外，检测方法、使用仪器、选用试剂的不同，可能也会对参考区间产生一定影响。本研究与其他文献[7-9]报道的参考区间见表2。从表2可以看出，各地报道的铁蛋白参考区间有一定的差异。本研究建立的60～80岁表观健康人血清铁蛋白参考区间男性为15.2～243.9 μg/L、女性为14.6～224.6 μg/L，与厂家提供的参考区间（男性为29.3～336.2 μg/L，女性为11.0～306.8 μg/L）相比较窄，与实验预期相符，其原因可能与厂家提供的参考区间跨越不同年龄阶段有关，也可能与老年人饮食、消化系统等与其他年龄段的成年人有所差异有关。因此，建议各实验室为不同年龄、不同性别人群分别建立血清铁蛋白的参考区间。
表2 本研究及其他文献[7-9]报道的参考区间
建立参考区间首先要保证检测方法有溯源性，本研究所用的血清铁蛋白检测系统可溯源至WHO第2代国际标准物质。其次要保证检测方法性能达标，本研究所用检测方法室内质控不精密度低于目前国家卫生计生委临床检验中心最大允许误差（＜25%）的1/3，室间质评的平均偏移也低于最大允许误差的1/2。目前，各临床实验室使用的参考区间多来源于《全国检验操作规程》（第4版）或试剂盒说明书，其设定未考虑到年龄、种族和地域的不同。合适的参考区间作为保证临床检验工作质量的重要部分，其建立需要经过一系列的分析和不断的数据积累，排除可能的影响因素，使其具备地域性、时代性的特点，更适用于各实验室的覆盖人群[13]。
综上所述，本研究成功建立了60～80岁表观健康人血清铁蛋白的参考区间，并按性别进行了区分，有助于老年人相关疾病的诊断。当然，本研究也存在一定的局限性：（1）在研究对象入组标准中没有排除吸烟、酗酒及补充铁剂等药物；（2）本研究采用的样本是剩余血清，由于取材的原因，有些样本没有经过传染病项目的检测，无法排除研究对象患有某些疾病，这使得结果有一定的局限性；（3）由于铁蛋白试剂昂贵，本研究经费有限，样本量不够大（仅入组239例），无法细化分组，无法再扩大样本进行验证。今后，将在严格筛选入组对象的基础上扩大样本量，验证此次建立的血清铁蛋白参考区间。
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Reference interval of serum ferritin in 60-80-year-old apparently healthy people
YANG Benshan，LI Xue，WEN Jiangping，LIU Xiangyi.
（Department of Clinical Laboratory，Beijing Tongren Hospital，Capital Medical University，Beijing100730，China）
Abstract：Objective To establish reference interval of serum ferritin in 60-80-year-old apparently healthy subjects. Methods A total of 239 60-80-year-old apparently healthy subjects were enrolled，and they were classified into male and female groups. Their serum ferritin levels were determined by microparticle enzymatic chemiluminescence method. The reference interval was determined with
Key words：Ferritin；Reference interval；Elderly people
文章编号：1673-8640（2017）03-0161-04
中图分类号：R446.1
文献标志码：A
DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2017.03.001
（收稿日期：2016-03-03）
（本文编辑：龚晓霖）
作者简介：杨本善，男，1960年生，学士，主管技师，主要从事临床生化检验工作。
通信作者：刘向祎，联系电话：010-58268695。
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