王玉肖1，赵 灿2，李娟娟3，狄柯坪4，田洪彪1，王彩虹1
（1.唐县人民医院，河北 保定 072350；2.保定市第一中医院，河北 保定 071000； 3.保定市疾病预防控制中心，河北 保定 071000；4.解放军白求恩医务士官学校，河北 石家庄 050081）
摘要：目的对2012—2015年保定市唐县地区手足口病的病原学特征进行分析，为唐县地区手足口病的防控提供科学依据。 方法 采用荧光逆转录聚合酶链反应（PCR）对1 652例手足口病疑似病例咽拭子样本进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）以及柯萨奇病毒A16型（CA16）核酸检测，对结果进行统计描述和分析。结果 在1 652例手足口病疑似病例中，检出肠道病毒阳性病例511例，其中EV71阳性占31.31%，CA16阳性占21.72%，其他肠道病毒阳性占46.97%。2012年唐县地区手足口病的病原体以EV71为主，2013—2015年其他肠道病毒成为优势病原体。手足口病全年均可发病，具有明显的季节性，5—8月为其发病高峰期。不同季节病原体构成不同，1—6月病原体构成以其他肠道病毒为主，7—9月病原体构成以EV71为主，10—12月CA16成为优势病原体。病例多集中于5岁以下儿童且EV71为重症病例的主要病原体。结论应加强病原学监测，在5—8月对重点人群采取综合防控措施，以防手足口病的暴发和流行。
关键词：病原；肠道病毒；手足口病
手足口病的病原复杂，近50年来，在肠道病毒中至少有23种血清型与其有关，其中以肠道病毒71 型（enterovirus 71，EV71） 和柯萨奇病毒A16型（coxsackievirus A16，CA16） 较为多见[1]。但近年来，非EV71非CA16的其他肠道病毒感染引起的手足口病也逐渐被认识[2]。为了解保定市唐县地区手足口病的病原学特征，本研究对2012—2015年唐县地区手足口病疑似病例的咽拭子样本进行病原检测，从而掌握不同病原的流行规律，为手足口病的科学防控提供实验依据。
1.1 研究对象
收集2012—2015年唐县人民医院手足口病疑似病例咽拭子样本，置-20 ℃冻存，冷藏运输至保定市疾病预防控制中心进行检测。样本在-70 ℃下长期保存。
1.2 手足口病的临床分类
根据国家卫生部《手足口病诊疗指南（2012年）版》的诊断标准将手足口病进行临床分类。普通病例为出现手、足、口、臀部皮疹，伴或不伴有发热的病例；重症病例为出现神经系统、呼吸系统及循环系统受累表现的病例。
1.3 方法
采用MagMaXTM-96 Viral RNA Isolation Kit（美国Ambion公司）进行自动 RNA提取。采用肠道病毒通用型核酸检测试剂盒、肠道病毒71型病毒核酸检测试剂盒和柯萨奇病毒A16型核酸检测试剂盒（江苏硕世生物科技有限公司）进行病毒 RNA检测，具体操作及反应条件见试剂盒说明书。
1.4 统计学方法
应用SPSS 11.5软件对检测结果进行χ2检验，以P＜ 0.05为差异有统计学意义。
2.1 手足口病病原体的检测
2012—2015年共检测手足口病疑似病例1 652例，肠道病毒核酸检出阳性病例511例，阳性检出率为30.93%。其中EV71阳性160例，占阳性样本总数的31.31%，CA16阳性111例，占阳性样本总数的21.72%，其他肠道病毒阳性240例，占阳性样本总数的46.97%。
2.2 手足口病病原体的年份分布
2012—2015年间，2015年肠道病毒核酸阳性检出率最高，为58.31%。在病原体构成上，2012年以EV71为主，2013—2015年均以其他肠道病毒为主。2012—2014年，CA16的构成比逐年下降，构成比最低为8.70%，而在2015年CA16的构成比则明显回升，达到29.95%。肠道病毒阳性检出率及各型阳性病例病原体的构成比在不同年份之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
2.3 手足口病病原体的月份分布
手足口病阳性病例主要集中在5—8月，1—6月病原体构成以其他肠道病毒为主，7—9月病原体构成以EV71为主，10—12月CA16成为优势病原体。各型阳性病例病原体构成比在不同月份之间差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。
2.4 手足口病原体的年龄分布
手足口病阳性病例主要集中在5岁以下儿童，占阳性病例总数的92.17%，其中1～3岁阳性病例数最多。在病原体构成上，各年龄组均以其他肠道病毒为主，各型阳性病例病原体构成比在不同年龄组间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。
2.5 手足口病病患者的性别分布
手足口病阳性病例中，男性多于女性，二者之比为1.30∶1。在病原体构成上，各种阳性病例病原体的构成比在不同性别之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表4。
表1 2012—2015年不同年份手足口病病原体的检测结果 [例（%）]
注：不同年份肠道病毒阳性检出率比较，*χ2=173.39，P＜0.05；不同年份EV71阳性构成比比较，#χ2=72.83，P＜0.05；不同年份CA16阳性构成比比较，△χ2=18.97，P＜0.05；不同年份其他肠道病毒阳性构成比比较，▲χ2=46.73，P＜0.05
年份 例数 阳性*病原构成EV71# CA16△ 其他肠道病毒▲2012 442 131（29.64） 75（57.25） 28（21.37） 28（21.37）2013 455 81（17.80） 21（25.93） 13（16.05） 47（58.02）2014 400 92（23.00） 35（38.04） 8（8.70） 49（53.26）2015 355 207（58.31） 29（14.01） 62（29.95） 116（56.04）合计 1 652 511（30.93） 160（31.31） 111（21.72） 240（46.97）
表2 2012—2015年不同月份手足口病病原体的检测结果
注：不同月份EV71阳性构成比比较，*χ2=49.39，P＜0.05；不同月份CA16阳性构成比比较，#χ2=49.31，P＜0.05；不同月份其他肠道病毒阳性构成比比较，△χ2=82.92，P＜0.05
月份 阳性数 病原体的构成[例（%）] EV71* CA16# 其他肠道病毒△1—4月 40 6（15.00） 7（17.50） 27（67.50）5月 99 8（8.08） 15（15.15） 76（76.77）6月 141 48（34.04） 21（14.89） 72（51.06）7月 90 41（45.56） 20（22.22） 29（32.22）8月 62 28（45.16） 13（20.97） 21（33.87）9月 49 22（44.90） 14（28.57） 13（26.53）10—12月 30 7（23.33） 21（70.00） 2（6.67）合计 511 160（31.31） 111（21.72） 240（46.97）
表3 2012—2015年不同年龄组手足口病病原体的检测结果
年龄组 阳性数 病原体的构成[例（%）] EV71 CA16 其他肠道病毒0～＜1岁组 35 11（31.43） 6（17.14） 18（51.43）1～＜2岁组 125 36（28.80） 27（21.60） 62（49.60）2～＜3岁组 186 56（30.11） 47（25.27） 83（44.62）3～＜4岁组 98 36（36.73） 20（20.41） 42（42.86）4～＜5岁组 27 8（29.63） 5（18.52） 14（51.85）≥5岁组 40 13（32.50） 6（15.00） 21（52.50）合计 511 160（31.31） 111（21.72） 240（46.97）
表4 2012—2015年不同性别患者手足口病病原体的检测结果
性别 阳性数 病原体的构成[例（%）] EV71 CA16 其他肠道病毒男性组 289 96（33.22） 64（22.15） 129（44.64）女性组 222 64（28.83） 47（21.17） 111（50.00）合计 511 160（31.31） 111（21.72） 240（46.97）
2.6 手足口病的病例类型分布
手足口病阳性病例中，普通病例475例，重症病例36例，其中并发脑炎27例，并发肺水肿9例。普通病例与重症病例之比为13.19∶1。EV71在普通病例中的构成比低于重症病例，CA16和其他肠道病毒在普通病例中的构成比高于重症病例。各型阳性病例病原体的构成比在不同病例类型中的分布差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表5。
表5 2012—2015年不同病例类型手足口病病原体的检测结果
注：与普通病例比较，*χ2=38.88，P＜0.05；#χ2=5.95，P＜0.05；△χ2=14.28，P＜0.05
病例类型 阳性数 病原体的构成[例（%）] EV71 CA16 其他肠道病毒普通病例 475 132（27.79） 109（22.95） 234（49.26）重症病例 36 28（77.78）* 2（5.56）# 6（16.67）△合计 511 160（31.31） 111（21.72） 240（46.97）
手足口病是世界范围内的儿童常见传染病，大多数症状轻微，主要表现为发热，手、足、口等部位的皮疹和疱疹，少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症，个别重症患儿病情发展快，可导致死亡[3-4]。自2008年3月安徽省阜阳市发生多名儿童EV71感染致死事件后，我国相继多个城市出现手足口病暴发[5]。2008年5月2日，国家卫生部将手足口病纳入丙类传染病管理并在2009年要求提高手足口病病原学检测的比例[6-7]。
从本研究的结果可以看出，在2012—2015年唐县地区手足口病疑似病例中，2013年肠道病毒检出率最低，之后阳性检出率逐年增加，在2015年达到最高值（58.31%）。在病原体构成上，不同年份也有所改变，2012年的优势病原体为EV71，而2013—2015年非EV71非CA16的其他肠道病毒在病原体构成上居第1位。这与廖琳虹[8]等的报道一致，此改变可能与手足口病的流行周期以及病原毒株流行后人群普遍具有一定的免疫力有关[9]。
从发病时间上看，手足口病流行具有明显的季节性，高峰期为5—8月，这与保定地区的手足口病流行特征基本一致[10]，但不同月份病原体构成具有差异，1—6月病原体的构成以其他肠道病毒为主，7—9月以EV71为主，10—12月CA16成为优势病原体。说明不同型别肠道病毒具有各自的流行特征，这与不同的肠道病毒对季节适应性具有差异有关[11]。
从人群分布上看，手足口病好发于5岁以下儿童，男性多于女性，这可能与男童喜好活动，相比女孩，相互接触更密切，相互传染的概率增加有关[12]。但母传抗体的保护[13]以及随着年龄增长自身免疫水平的提高，使手足口病病例集中在了1～3岁儿童。而且各年龄组均以非EV71非CA16的其他肠道病毒感染为主，这可能与非EV71非CA16的其他肠道病毒病原复杂，多种肠道病毒间无交叉免疫有关[14]。
从病例类型分布上看，EV71为重症病例的主要病原体，其在重症病例中的构成比显著高于普通病例，而CA16和其他肠道病毒在重症病例中的构成比显著低于普通病例。说明EV71与手足口病重症病例的发生密切相关[15]。
综上所述，唐县地区2012—2015年手足口病病原体的构成发生了改变，优势病原由EV71转变为非EV71非CA16的其他肠道病毒，但EV71仍是重症病例的主要病原体，手足口病的防控重点应放在5岁以下儿童，并加强病原监测，以防因优势病原体的变化导致手足口病的暴发。
参考文献：
[1]LEI X B，CUI S，ZHAO Z D，et al. Etiology， pathogenesis， antivirals and vaccines of hand，foot，and mouth disease[J]. Natl Sci Rev， 2015， 2（3）：268-284.
[2]HE Y Q，CHEN L，XU W B，et al. Emergence，circulation，and spatiotemporal phylogenetic analysis of coxsackievirus A6- and coxsackievirus A10-associated hand， foot，and mouth disease infections from 2008 to 2012 in Shenzhen， China[J]. J Clin Microbiol，2013，51（11）：3560-3566.
[3]郑鹏，曾祥洁，檀晓娟，等. 2010年海南省手足口病流行病学和病原学特征分析[J]. 病毒学报，2013，29（2）：162-168.
[4]张世英，王显军. 聊城市手足口病重症病例流行病学特征及影响因素分析[J]. 现代预防医学，2013，42（2）：204-207.
[5]杜玉忠，廖国平，孙小康，等. 2008-2011年清远市手足口病流行特征[J]. 职业与健康，2013，29（1）：85-87.
[6]杨洪，何雅青，张泽娜，等. 2011年广东省深圳市手足口病的病原学监测[J]. 疾病监测，2013，28（3）：189-192.
[7]黄威，周帅锋，张帆，等. 2008-2010年湖南省哨点医院手足口病病原学检测结果及基因特征分析[J].实用预防医学，2011，18（5）：779-784.
[8]廖琳虹，杨萍，廖亦红，等. 2012-2014年龙岩市手足口病病原学监测结果分析[J]. 中国病原生物学杂志，2015，28（6）：536-538.
[9]江敏，付继玲，马丽. 2009-2013年九江市手足口病流行病学特征分析[J]. 现代预防医学，2015，42（11）：1936-1938.
[10]李娟娟，倪祥文，苏明，等. 2009-2012年保定市手足口病病原学分析[J]. 职业与健康，2014， 30（13）：1797-1799.
[11]李博，张东晓，刘楚云. 2012-2013年深圳市南山区手足口病原学及初发临床症状分析[J]. 河南预防医学杂志，2014，43（4）：249-251.
[12]于秋丽，谢赟，刘莹莹，等. 2008-2011年河北省手足口病流行特征分析[J]. 预防医学情报杂志，2013，29（2）：89-93.
[13]吴楠，段永翔，王颖，等. 2012-2014年深圳市南山区手足口病流行病学和病原学分析[J]. 热带医学杂志，2015，15（5）：684-686.
[14]姜法春，郝毕，董礼艳，等. 青岛地区2007-2011年手足口病病原学分析[J]. 中华疾病控制杂志，2013，17（2）：153-155.
[15]XU W，JIANG L，THAMMAWIJAYA P，et al. Hand， foot and mouth disease in Yunnan Province，China， 2008-2010[J]. Asia Pac J Public Health，2015，27（2）：N769-N777.
Pathogenic characteristics of hand-foot-mouth disease in Tangxian of Baoding from 2012 to 2015
WANG Yuxiao1，ZHAO Can2，LI Juanjuan3，DI Keping4，TIAN Hongbiao1，WANG Caihong1.
（1. The People's Hospital of Tangxian，Baoding072350，Hebei，China；2. Baoding First Hospital of Traditional Chinese Medicine，Baoding071000，Hebei，China；3. Baoding Center for Disease Control and Prevention，Baoding071000，Hebei，China；4. Bethune Medical NCO School of Chinese People's Liberation Army，Shijiazhuang050081，Hebei，China）
Abstract：ObjectiveTo study the pathogenic characteristics of hand-foot-mouth disease in Tangxian of Baoding from 2012 to 2015，and to provide a reference for the prevention and controlling of hand-foot-mouth disease. MethodsFluorescence reverse transcription polymerase chain reaction（PCR） was used to determine throat specimens of 1 652 hand-foot-mouth disease suspected cases for enterovirus，enterovirus 71（EV71） and coxsackievirus A16（CA16）.ResultsOf the 1 652 hand-foot-mouth disease suspected cases，there were 511 positive cases for enterovirus. The positive cases for EV71，CA16 and other enteroviruses accounted for 31.31%，21.72% and 46.97%，respectively. In 2012，the primary pathogen causing hand-foot-mouth disease was EV71，but other enteroviruses became dominant pathogens for hand-foot-mouth disease from 2013 to 2015. The positive cases were determined all year round and distributed seasonally，with a peak appearing from May to August. Hand-footmouth disease changed its pathogenic constitution in different seasons. The main pathogens were other enteroviruses from January to June. The peak of EV71 appeared from July to September. CA16 became dominant pathogen from October to December. A majority of positive cases were children ＜ 5 years old. EV71 was a superior epidemiological enterovirus for severe hand-foot-mouth disease. ConclusionsThe pathogenic monitoring of hand-foot-mouth disease needs be enhanced. The comprehensive controlling measures should be taken in key population from May to August，in order to prevent form hand-foot-mouth disease outbreak and spreading.
Key words：Pathogen；Enterovirus；Hand-foot-mouth disease
（收稿日期：2016-03-05）
（本文编辑：姜 敏）
文章编号：1673-8640（2017）01-0018-04
中图分类号：R446.5
文献标志码：A
DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2017.01.005
作者简介：王玉肖，女，1969年生，副主任技师，主要从事临床医学检验工作。
联系客服
