接收标本后,立即对标本进行编号,然后在LIS系统中签收。
将标本分别接种于血琼脂平板和麦康凯琼脂平板,置于5%~10% CO2环境中35℃培养18~24h,观察细菌生长情况。
观察各种固体培养基上的细菌生长情况及其处理, 并将其记录在程序单上(日期、涂片、分纯、继续培养、上机、手工生化、药敏等)。
血琼脂平板:打开血琼脂平板首先观察是否有细菌生长,如果有细菌生长,初步确认是阳性菌还是阴性菌,挑取可疑菌落涂片染色进一步确认。如果没有菌生长,则继续培养24h;
麦康凯琼脂平板:观察麦康凯琼脂平板上有无细菌生长,如果有细菌生长(粉红色、无色等其他颜色的菌落),进行生化鉴定和药敏试验,若没有菌生长,则继续培养24h。
鉴定:根据菌落观察和涂片结果确认为阳性或阴性菌后,选择合适的鉴定卡片,挑取菌落制成菌悬液,用微生物鉴定仪、传统生化试验、MALDI-TOF-MS进行鉴定。
阳性结果
仪器报告细菌鉴定结果,需再次观察原始平板上的菌落特征,判断其与仪器结果是否相吻合,相吻合时才可以发出报告;不符合时再查找原因,是平板菌落不纯还是机器鉴定结果有误或者其他原因等。
脓液及伤口分泌物培养出的细菌或真菌均为病原菌,应进行鉴定药敏试验,报告菌名和药敏试验结果。
阴性结果
经培养48h,仍无细菌生长者,报告“培养2日无细菌生长”。
人工关节置术后感染,假体松动,伤口内有恶性液体流出。局部消毒后,用穿刺针穿刺关节液或手术中组织标本送细菌培养。
乳房植入物大多数最常见感染的原因是破裂、植入物周围形成的胶原被摸挛缩以及感染。感染局部有分泌物直接取标本作细菌培养。
分枝杆菌也可引起乳房植入物感染,特别是龟分枝杆菌和偶发分支杆菌导致的感染。真菌如曲霉也可通过直接接种或在植入物填充物中休眠多个月后而感染植入物。放线菌是一种可通过胸壁侵蚀的细菌感染,并且据报告在少数情况下可表现为乳房肿物。
人体植入物引起的感染主要致病菌革兰阳性球菌为主,包括金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌,链球菌和肠球菌为主;而革兰阴性菌以鲍曼不动杆菌、铜绿色假单胞菌、大肠埃希菌等为主。其次分支杆菌和厌氧菌。
葡萄球菌属多发生于假体周围感染、糖尿病是极易继发葡萄球菌感染的重要危险因素;同时葡萄球菌易于形成生物被膜且长期寄植于感染部位,难以清除。即使体外敏感的抗菌药物如万古霉素,也难于穿透而杀灭被膜内细菌,这也是导致假体周围感染经久难愈的原因。而革兰阴性菌中,铜绿假单胞和鲍曼不动杆菌也具有形成生物被膜的能力,故也同样导致慢性感染而难于用药物清除。
(责任编辑:陈众)
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