1、选用健康实验用兔为实验对象
2、模型制备步骤
（1）将实验动物在恒温18℃环境下单笼饲养，以便实验动物标准化3周.
（2）模型制备前，将后肢膝关节至踝部毛剃去。
（3）在模型设备箱内冰架上置入冰块。
（4）将实验动物去毛的后肢固定在造模设备箱内
（5）接通喷雾水流、风扇、半导体温湿度计电流
（6）调节模型设备箱内环境至刺激强度要求。
（7）先持续刺激动物肢体8小时后，单笼饲养11小时，再重复刺激1次，刺激过程中，按常规饲养。
（8）制备风寒模型时，关闭喷雾水流装置，制备湿寒模型时，切断风扇电流。
（9）对照组不予任何刺激，其余准备与实验组相同.
3、实验方法
（1）分组和处理
将实验动物随机分对照组与实验组，实验组模型建立之后，从规定取材部位、组织，分批分期处死动物，取下规定检验的组织或肢体。可分初期（即刻、24小时、72小时）；后期（7天、14天、2l天）取材。根据需求进行各项检验。
4、观察指标
（1）风寒湿刺激后软组织光镜观察
局部先出现微血管收缩，然后扩张，接着再度收缩，并伴有一时性心率、呼吸加快，全身血管收缩，最后局部微血管又呈扩张状态。此时毛细血管呈充血情况，血细胞聚集，血管开放数量增多。模型形成后以21天区间连续观察，光镜下见到组织水肿，表现渗出为主的炎症变化。
（2）风寒湿刺激后软组织超微结构改变
皮肤 初期见到部分毛细血管内皮细胞收缩，红细胞进入边流，随即红细胞、血小板着边，红细胞间局流消失，相互聚集。接着出现血浆蛋白、炎细胞、红细胞及血小板渗出。渗出的血小板在胶原纤维处聚集。后期浸润的白细胞吞噬颗粒增多，并有脱颗粒现象。组织细胞吞噬能力增强。整个观测期间未见到细胞、纤维成分、毛细血管及附件结构的病理改变。
肌肉 初期见到灶性肌丝紊乱，肌节模糊及肌浆网扩张。后期，肌浆网扩张趋于消退，出现少量空泡；灶性肌丝紊乱和松散显著，并见到肌节收缩现象。
神经 初期见到无髓鞘神经轴突内线粒体和许旺氏细胞内质网有空泡、髓鞘灶性板层膨胀分离、郎飞氏结鞘膜不连续现象。后期，上述空泡基本消失，分离膨胀的髓鞘被吞噬细胞吞食，并见有轴突新芽长出。
小静脉 初期内皮细胞收缩和炎细胞附壁；后期见其周围有炎细胞浸润。
5、实验性慢性肢体软组织损伤后检测结果的评价
根据以上各种实验检测，慢性软组织损伤（痹症）风寒湿邪是其病原因子；经络气血运行不畅，造成气滞血瘀，津液涩渗，肢体失于濡养为其病理机制；肢体失于濡养为其病理机制；肢体疼痛、肿胀、重着、无力麻木是主要的临床症状。实验中，在恒温18℃环境中尽管对照组去毛，造成卫外能力减弱的虚体，但未遭风寒湿侵袭，结果与正常组相同，没有产生病理变化，证明虽俱虚体“不与风寒湿合不为痹”的论证是合乎逻辑的。
经模拟自然风寒湿对健康家兔模型形成后所得各项结果提示：风寒湿确能造成肢体气滞血瘀，津液涩渗，以及肢体失于温养后，组织产生病理改变。当风寒湿刺激后，毛细血管扩张充血，开放数量增多，血管血细胞聚集，表明了风寒湿致痹后气滞血壅的病理状态。由于气滞血壅，使津液涩于络内，渗于络外，这在模型形成后表现出水分增多，肌浆网扩张等病理改变。
根据痹证的临床症候表现，模型出现了疼痛、重着、无力麻木的病机因素。形态学所见的神经髓鞘灶性膨胀，郎飞氏结鞘膜不连续，肌丝紊乱等变化，说明了风寒湿导致肢体重着、无力麻木、疼痛的现代医学依据。
该试验的目的是，临床大量的疼痛均是由该途径导致，充分论证了中医痛则不通，通则不痛的病因病理学。
而由风寒湿侵袭造成的1-3个月的颈肩腰腿痛，毫无疑问，均应该是局部肌肉、筋膜的无菌性炎性渗出，局部压力增高，而肿胀疼痛不通所致，临床时，针刀往往纵切2-3刀，即可消除症状。
6、结果
（1）肉眼观察（以大耳白兔为实验对象）
造模手术后十天。筋膜与皮肤形成粘连，面积为2cm×lcm左右，并有脂肪样物质产生，可能是一些炎性渗出物。有一只动物左腿腓肠肌与比目鱼肌发生轻微粘连。肌肉伤口及附近表面粗糙，有包块，损伤部位明显发白，并有黏液，手触时感到比较硬。
造模手术后20天。
①自然恢复组：筋膜与皮肤仍有少量粘连，损伤部位与正常部位稍有差别，仍有少量脂肪组织，损伤部位与正常部位颜色仍有差异，肉眼可直接找到受损部位。
②针刀治疗组：筋膜与皮肤没有粘连，肌肉与皮肤和比目鱼肌无明显粘连，没有脂肪样物质，没有黏液，肌肉表面光滑，损伤部位与正常部位颜色稍有差异，不易区分，需借助缝合线标记找到受损部位。
造模手术后28天。
①自然恢复组：筋膜与皮肤已无明显粘连，但仍有少量脂肪样物质，肉眼不能直接找到受损部位，必须借助标记才能找到。
②针刀治疗组：肌肉颜色正常，没有异常物质增生，肌肉表面光滑，在体视解剖镜下才能找到受损部位。
（3）光镜观察
可见到损伤10天后所填充的肉芽组织，紧靠肉芽组织的是一些空泡，这是正常血液循环被破坏，肌纤维缺乏营养供应，发生坏死、萎缩而形成的。有时肌纤维在不同平面内扭曲，以致在同一视野中观察到纵切和横切共存的图像。肌细胞核变形，由椭圆形变为梭形，并大量增生和聚集。创伤愈合中，伤处有大量成纤维细胞，它是主要的修复细胞，来源主要为邻近组织中未分化的间质细胞和其他部位成纤维细胞在生长因子和化学趋化物作用下分化、迁移而来。
肉芽组织的照片，则表现为较多成纤维细胞和巨噬细胞；疏松的细胞间质，其主要成分为胶原：含有较多的纤维连接蛋白酸性黏多糖、透明质酸等。以及丰富的新生毛细血管。
如果用免疫荧光术研究实验性肉芽组织，可以发现创伤组织内很早就出现巨噬细胞产生的纤维粘连蛋白，它在创伤区内的浓度比周围组织高得多，它吸引周围组织的成纤维细胞向创伤区移动。此外，创伤区内血小板凝集，释放出血小板生长因子和p-转化生长因子，它们对成纤维细胞均有趋化作用。
损伤后20天自然恢复组切片,新生肌纤维稍有扭曲，新生的细胞核居中，核仁明显，这说明新生的肌纤维还比较幼稚。周围仍有增生的结缔组织，变形的细胞核和成纤维细胞、巨噬细胞。
为什么选在损伤后十天进行针刀治疗?是因为肌肉损伤后第1、2天，所有动物的损伤部位都存在剧烈炎性反应，表现为出血、肿胀和肌纤维坏死，坏死肌纤维及其周围有大量炎细胞的聚集与浸润。损伤后第三天，损伤部位出现再生肌管。炎性反应之后，肌纤维再生：首先是吞噬细胞清除坏死肌纤维和细胞碎屑，遗留基板；然后以此为支架，出现卫星细胞（成肌细胞）在基板上的排列。除再生肌管外，损伤后第三天，损伤部位可见肌膜纤维化。损伤后十天是肉芽组织机化与部分瘢痕正在形成的时期，此时进行针刀治疗效果显著，治疗的结果是促进肌卫星细胞的分裂生长，减少瘢痕形成。
其原理是解除压迫或缓解肌张力，松解变性组织，减压、减张的同时改善局部的微循环。对研究结果的评价：以往针刀在治疗慢性软组织损伤方面虽取得了巨大成就，但从未涉及对急性软组织损伤的治疗，并将其列为禁区。本基础科学研究的成果在这方面作了大胆的尝试，实验结果表明：针刀对急性软组织损伤的疗效肯定。针刀治疗组明显优于常规方法治疗组，可促进肌肉组织修复，减少组织粘连和瘢痕形成。用针刀早期对急性损伤进行干预，可预防软组织粘连和结瘢，及早阻断疾病的发展。
因此，急性闭合性软组织损伤的针刀治疗的理论是成立的，其早期的软组织的减压作用，是必须的，对筋膜间室综合症、挤压综合症2种重症疾病的针刀减压治疗，及急性风湿性肌炎、肌筋膜炎的治疗的肯定的临床疗效，均证明，急性闭合性软组织损伤，针刀治疗是其适应症，而非禁区。
