研究背景
EGFR基因突变检测对于确定初治非小细胞肺癌(NSCLC)患者治疗策略的制定至关重要。此外,对EGFR突变阳性NSCLC患者疾病进展后进行二次活检以阐明耐药机制方面也很重要。但由于活检的侵袭性和不可及行,收集患者的组织学标本往往是非常困难的。在一些只能收集到细胞学标本研究显示,细胞学标本也可用于EGFR基因突变的检测。Cobas®EGFR突变检测试剂在日本被批准作为第三代EGFR-TKI药物奥希替尼的伴随诊断试剂。但尚不确定是否可以使用此试剂检测细胞学标本的EGFR T790M突变。本研究的主要研究重点为使用Cobas®EGFR突变检测试剂评估组织标本与细胞学标本EGFR T790M检测结果的一致性。
研究方法
在日本进行了一项多中心观察性研究,入组了41例EGFR突变的NSCLC患者,在二次活检时同时取到患者的组织及细胞标本。两种标本均用Cobas®EGFR突变检测试剂进行检测,并比较结果的一致性。
图1 细胞学标本采集流程
研究结果
在全部入组的40例患者中,EGFR敏感突变检测结果如表1所示,EGFR T790M的组织学及细胞学标本突变率分别为42.5%与37.5%。60%的组织标本与57.5%的细胞标本出现EGFR 19缺失。27.5%的组织标本与25%的细胞标本出现EGFR L858R的突变。
表1 EGFR基因突变检测结果
EGFR T790M的组织及细胞学标本检测结果的一致性见表2,敏感度、特异性及一致率分别为87.5%、95%及91.7%。
表2 组织及细胞标本EGFR T790M检测结果一致性
两种标本的EGFR 19缺失及L858R突变的一致性见表3,表4。研究中两类标本各种突变检测结果的一致率较高,未见显著差异。
表3 组织及细胞标本EGFR 19缺失检测结果一致性
表4 组织及细胞标本EGFR 21 L858R检测结果一致性
结果讨论
EGFR T790M突变检测在组织学及细胞学标本间的一致率大于90%。在确定NSCLC患者的治疗策略时,检测基因突变状态及病理诊断结果至关重要。据报道二次活检的成功率约为80%,但病灶的不可及性及疾病进展后再活检的侵袭性可能是再活检的主要障碍。由于在部分患者的耐药机制尚不明确,影响了患者治疗策略的优化。目前已出现使用无侵袭性的ctDNA(如Cobas®EGFR血液检测试剂)检测EGFR基因突变状态的检测方法。建议使用已经验证的血液检测试剂进行血液标本的EGFR T790M检测,可以使部分患者避免二次活检。但在一些研究中也提出了血液检测的假阴性风险,约30%的血液检测EGFR T790M阴性标本二次组织活检检测结果呈阳性。因此对于EGFR T790M血浆检测阴性结果的患者,应使用肿瘤标本确认是否存在突变。
尽管EGFR T790M突变率在组织及细胞学标本检测结果的一致率大于90%,但依然存在一些不一致的病例。这可能与肿瘤细胞比例较低有关,即细胞学标本可能并不能完全代表所对应的组织标本。遗憾的是,我们并未在研究中评估染色样本中肿瘤细胞比例。为了提高检出率,必须在检测前确定样本中肿瘤细胞比例,必要时对检测样本进行调整。
对于细胞学标本除了使用细胞悬液法外还有细针穿刺法等。在本研究中细胞悬液法提取固定标本中的DNA除了利于控制肿瘤细胞比例外,也使操作流程更见简便。目前有多种方法可检测细胞标本中EGFR 基因突变状态,但本研究中只使用了Cobas®EGFR检测试剂,因其是日本批准的奥希替尼的唯一伴随诊断试剂。
本研究中评估了细胞学与组织学标本检测结果的一致性,但细胞学标本检测结果与临床3代TKI疗效的相关性仍需进一步研究。
知识要点回顾
1. 本研究中EGFR T790M的组织及细胞学标本检测结果的敏感度、特异性及一致率分别为87.5%、95%及91.7%。
2. 本研究中组织及细胞学标本各突变结果一致率均未见显著差异。
3. 细胞学标本检测结果与临床3代TKI疗效的相关性仍需进一步研究。
参考文献:
Miyako Satouchi, et al. Detection of epidermal growth factor receptor gene T790M mutation in cytology samples using the cobas® EGFR mutation test. Lung Cancer 111 (2017) 190-194.
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