作者:解螺旋.静静(本文为解螺旋征稿)
如需转载请注明来源:解螺旋·医生科研助手
PCR是生物科学中常见的实验方法,而那些网上的教程对于初学者来说还是过于复杂了,这次解螺旋吐血介绍种炒鸡简单的方法来做PCR。
"偷什么懒,网上这么多方法,自己不会学呀!!!",额-_-||,说好的亲师兄呢?!!!
好吧,那就让我自立自强吧。
你妹儿!!!我要弄这么多条引物,还要不要人活了呀!!!电视剧不用看了呀,淘宝不用逛了呀,恋爱不用谈了呀。。。我想静静。。。(好吧,其实我就叫静静,昂~,好害羞啊)
好吧,差不多得了。。。写这里重点也应该来了,用脚趾头想都知道,如我一般懒的同学当然不会就此罢休咯,一番痛苦挣扎以后,静静发现了一个超级简单的方法哟。。。
!以下图片请点击查看清晰大图 !
首先呢,进入pubmed (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/)在gene栏搜索指定基因(例如:erk2);
然后在浏览器中打开另一个网页primerbank (https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/),选择NCBI Gene ID,在For text中 输入该基因ID:5594,点击submit;
哈哈哈,你不会真的以为就这么结束了吧?居然还有比我更懒的人-_-||,你真的敢用?
所以下一步呢,我们就是打开这个网页https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/index.cgi?LINK_LOC=BlastHome,在图示对话框中输入上图得到的三条引物中的任意一条的前引和后引(例如:第一条序列TACACCAACCTCTCGTACATCG 和 CATGTCTGAAGCGCAGTAAGATT),然后点击页面底部的get primer图标;
耐心等待。。。等待。。。等待。。。待。。。
再点击画绿圈圈的Transcript (2),就得到下面两条转录异构本啦;
最后,将这个界面中画红线的代码与前面那张保留界面中划红线部分的代码进行比较,完全匹配的话(数量相同且代码都能找到对应的,某些转录异构本太多的除外),那么,恭喜你,你已经成功找到了你想要的引物序列。。。
咳咳,这位同学,你是隔壁实验室派来砸场子的吧。。。
年轻人,要脚踏实地,不要整天想着这些歪门邪道!!!再见
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