有效血药浓度范围：取决于恶性肿瘤的种类，最小有细胞毒性浓度：1×10-8mol/L；大剂量用药高危药浓度：24小时＞10-5mol/L，48小时＞10-6mol/L，72小时＞10-7mol/L。
「生物学变异」
年龄：接受相同剂量的MTX治疗，可达到的血清MTX浓度与年龄成反比。
「病理学变异」
肾功能减退：任何原因引起的肾功能减退都会使MTX的清除速率下降，血药浓度升高。血MTX浓度升高。会进一步加重肾功能损害，形成恶性循环。
胸腹水：大量的胸腹水可增加MTX的分布容积和使终末消除半衰期延长。
肠梗阻：完全或部分肠梗阻通过胆汁由大使排出的MTX减少。MTX滞留在肠道内的时间延长，增加肠道的再吸收，使血药浓度升高。
脱水：患者水的入量不足或出量过大都会由于尿量过少而使MTX的肾清除率下降。
酸性尿：尿液呈酸性时，尿液中的MTX及其代谢产物未解离状态的比率增加而被再吸收，使血浓度升高。反之，碱性尿液时，MTX呈解离状态，而被清除，是加速MTX清除的重要措施之一。
「药代动力学参数」
口服吸收率有剂量依赖性及个体差异。剂量＜30mg/m2，吸收率：80%；剂量50mg/m2，吸收率：20%～50%；剂量80mg/m2，吸收率25%.口服达峰浓度时间：1～3小时；血浆蛋白结合率：50%～70%；分布容积：成人：0.75～0.8L/kg，儿童：1.10L/kg，口服达稳态时间：12～24小时；消除半衰期：始初清除半衰期3.5小时，终末清除半衰期成人：10.4小时，儿童：1.5小时；总清除率：150～180ml/min.60%～80%由肾脏消除，清除速率常数：成人：0.306/h，儿童：0.578/h。
「药物影响」
水杨酸：水杨酸与MTX同时服用会使血清MTX浓度升高或使持续在高浓度的时间延长。
羧苯碳胺：羧苯碳胺与MTX竞争肾小管分泌，合并用药时，MTX排泄减少。
卡那霉素：卡寻霉素抑制肠道菌群生长，减少菌群对MTX的代谢，使MTX的生物利用度增加。
新霉素：新霉素与MTX同时口服，MTX的吸收率可下降50%左右。
碳酸氢钠：碳酸氢钠能碱化尿液，加速MTX的肾脏清除，减少MTX在肾小管的沉着。
5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷和硫代鸟嘌呤与MTX同时使用都加强MTX的治疗作用和毒性作用。
甲酰四氢叶酸能对抗MTX对二氢叶酸还原酶的抑制作用。
头孢菌素及可的松可减低人体细胞对MTX的摄取，从而降低了MTX的细胞内浓度，使MTX的血药浓度增加。
长春新碱可阻止MTX向细胞外转运，从而提高细胞内浓度，降低血药浓度。
嘌呤醇可加强MTX的疗效。
