肺炎支原体检验

肺炎支原体(M. pneumoniae，Mp)是引起人类支原体肺炎的病原体，支原体肺炎占非典型肺炎的1/3以上，其病理变化以间质性肺炎为主。肺炎支原体感染呈世界性分布，但以温带地区为主。四季均可发病,以秋、冬季节多见，大流行很少，小流行可呈周期性发生，间隔时间为 3～5 年，平时多为散在发病。传染源为患者或带菌者，主要经飞沫传播，患者以儿童和青少年居多，多在学校、家庭和军队中流行。

肺炎支原体主要侵犯呼吸系统，引发原发性非典型性肺炎。潜伏期 2～3 周，首先引起上呼吸道感染，然后下行引起气管炎、支气管炎、毛细支气管炎和肺炎。以隐性感染和轻型感染较常见，也可导致严重肺炎或伴发肺外组织、器官病变，如皮肤黏膜的斑丘疹、溶血性贫血、心肌炎、心包炎、脑膜炎或脑炎等。此外，致病性也与迟发性超敏反应有关。

生物学特性

1.形态染色

肺炎支原体无细胞壁，最外层为细胞膜，呈高度多形态性，主要为丝状，长 2～5 um在丝状体尖端有一特殊球状结构，有时可见球形或双球形的菌体，革兰染色镜检阴性，但不易着色，姬姆萨染色呈淡紫色。

2.培养特性

对低渗透压敏感。营养需求高于一般细菌，培养基中必须添加 10%～20%的人或动物血清，初次分离培养时尚需添加 10%的新鲜酵母浸液。最适pH值为7.8～8.0，pH值7.0以下可致其死亡。5%CO₂条件下生长最好，最适生长温度为 36～37℃。

支原体生长缓慢，在液体培养基中有极微弱的混浊，在固体培养基上孵育 5～7天后出现菌落。肺炎支原体的菌落较大，直径为10～100μm。初次分离时为细小颗粒状菌落，多次传代后形成典型“油煎蛋”样菌落，菌落中心较厚，向下长人培养基中，周边为一层薄而透明的颗粒区。菌落能吸附豚鼠红细胞；能产生溶血素，可迅速而完全地溶解哺乳动物红细胞。半固体培养基中呈现肉眼可见的细小粒状菌落。

3.生化反应

肺炎支原体分解葡萄糖产酸，不分解精氨酸，尿素试验阴性。

4.抗原与分型

支原体无细胞壁，其抗原性主要取决于细胞膜上的蛋白质和糖脂。糖脂的抗原性很强，但特异性较差，与多种其他支原体、细菌（如肺炎链球菌 23 型及 32型、MG链球菌）及宿主细胞（如人红细胞I型抗原）有共同的抗原决定簇。

所有肺炎支原体均具有分子质量为1.7X10⁵Da的P1外膜蛋白和4.3X10⁴Da 的菌体蛋白，特异性强，可刺激机体产生持久的高效价抗体。肺炎支原体P1外膜蛋白是支原体的主要型特异性抗原，其抗原性可用GIT 与MIT 进行鉴定，通过该试验可将肺炎支原体分成若干血清型。部分肺炎支原体菌株在细胞膜外还有一层荚膜，主要成分是多糖，也具有一定的抗原性。

5.抵抗力

4℃放置不超过3天，56℃很快被灭活。对热于燥非常敏感，冻干能长期保存。因无细胞壁，对青霉素、头菌素等作用于细胞壁的抗生素不敏感，故常在分离培养中加人青霉素。对脂溶剂、去垢剂苯酚和甲醛等常用消毒剂敏感。