生化检验结果审核之
生化项目不同方法学的影响因素
上周我们其他同事就自动复查的内容进行了分享，对日立生化分析仪分析参数进行设置，可以根据不同医院的自身需求，对某个或某几个检测项目，个性化的设置自动复查规则，减轻人工复查的压力，提高自动化检测的能力。除了自动复查外，其实检验结果的审核更多的是需要我们按照一定的流程和思路去分析和判断。本次日立课堂为大家带来生化结果审核中不同方法学的影响因素
项目 | 方法 | 检验原理 | 注意事项 |
TP | 双缩脲法 | 样品与双缩脲试剂作用，样品中蛋白的肽键与铜离子形成蓝紫色螯合物。通过测定蓝紫色的吸光度求得样品中总蛋白的含量。 | 1、血浆标本不适宜用血清的参考范围（血浆含纤维蛋白） 2、脂浊产生正干扰，严重溶血及黄疸是有干扰 |
ALB | 溴甲酚绿（紫） | 样品中的白蛋白与溴甲酚绿结合形成青色。测定青色的吸光度可求得样品中白蛋白的浓度。 | 1、BCG为酸碱指示剂，PH3.8-黄色，PH5.4-蓝绿色，保证试剂中缓冲体系准确的PH及足够缓冲容量是本法的关键。 2、BCP较少使用，且需要使用人源质控品，但它最低检测限更低，灵敏度好。 |
ALT | IFCC法，速率 | 当样本与底物酶液及a-KG溶液混合，L-丙氨酸和a-酮戊二酸通过样本中ALT的催化反应，生成丙酮酸和谷氨酸，丙酮酸在乳酸脱氢酶和NADH的作用下转变为乳酸，在此同时NADH被氧化成NAD，通过测定还原型的NADH在340nm处吸光度的下降速率，即可求得样本中的ALT活性。 | 1、大多试剂不含磷酸吡哆醛（P5P），含P5P结果偏高，但含P5P更合理。 2、 试剂1成分内如无NADH，并不是真正的双试剂，因为它无法避免体内α-酮酸的干扰，结果比对时可能会出现偏差。 3、红细胞内ALT含量时血清中3-5倍，溶血有干扰 |
AST | IFCC法，速率 | L-天门冬氨酸 + a-酮戊二酸 ALT 谷氨酸 + 草酰乙酸 草酰乙酸 + NADH + H LDH 苹果酸 + NAD | 同ALT |
T-BIL | 重氮法，酶法，钒酸氧化法 | 在PH=3附近时使样品中的表面活性剂与钒酸相互作用（有加速剂），则样品中的总胆红素会被氧化为胆绿素。这时胆红素特有的黄色就会减少，因此只要测定钒酸作用前后的吸光度差，即可求得样品中的总胆红素的浓度 | 1、结合胆红素包括（β/γ/δ），δ一般体内很少，氧化法时无法氧化，CB比较复杂，是很难标准化的主要原因 2、 非结合胆红素是α胆红素（未与葡萄糖醛酸结合） |
D-BIL | 钒酸氧化法 | 在PH=3附近时使样品与钒酸相互作用，则样品中的总胆红素会被氧化为胆绿素。这时胆红素特有的黄色就会减少，因此只要测定钒酸作用前后的吸光度差，即可求得样品中的总胆红素的浓度 | 同上TBIL |
CK | IFCC法 | 样品中加入含有CP、ADP、葡萄糖、HK、G-6PDH等的酶液，在样本中CK的作用下生成腺苷-5-三磷酸（ATP）。生成的ATP与酶液中含有的葡萄糖及HK作用而生成的葡萄糖-6-磷酸又受到G-6-PDH的作用被氧化，与此同时，NADH被还原成NADPH,导致340nm处的吸光度增加。测定该NADPH的生成速度，即可求得样本中的CK活性。。 | 1、 MG离子作为激活剂，Ca会抑制CK活性，所以很多试剂内含有EDTA，存在交叉污染时，会使得CA低MG高。但和光试剂的配方没有EDTA，MG是有的 2、 和光试剂DK模式，使得溶血干扰很少。红细胞本身是不含CK的，轻度溶血干扰少，但中重度溶血时因释放AK,ATP,G6PD等会影响结果，和光试剂R1会将这些物质中和，减少干扰。 3、有资料显示，生理盐水稀释会导致CK活性增加，建议用已知浓度的血清稀释 |
AMY | IFCC法 | 在GOOD缓冲液（PH7.6）中，BG5P在淀粉酶的作用下，加水分解成BG3和ρ-硝基苯-α-麦芽糖。Ρ-硝基苯α-麦芽苷在葡萄糖淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的作用下，游离出ρ-硝基苯酚的生成速度即可得到样本中淀粉酶的活性值。（五糖） | 1、 试剂中钙离子和氯离子是AMY的激活剂，和光试剂不详 2、和光采用5糖，国内一般采用的都是7糖，结果无法比对的原因。 |
以上就是本次日立小课堂的内容，希望可以给各位老师在工作中带来帮助，也欢迎各位老师留言，告诉我们您想了解的内容。
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作者：权 国强
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