免疫组化的阴性、阳性对照

来源：衡道医学

　　阴性对照

　　阴性对照主要是为了排除阳性结果是否存在内源性生物素、内源性过氧化物酶和其他的非特异性着色。

　　在日常工作中最常见的是采用缓冲液替代一抗的方法。当抗体浓度过高、抗原修复过度、检测系统与一抗浓度不匹配等原因时，也会出现非特异性着色，因此，选择替代法阴性对照和用该抗体在正常浓度下不表达的组织（肝、肾组织存在很多的内源性生物素，有部分抗原修复过度或抗体浓度过高时，也会出现非特异性着色，可作为阴性对照组织的一种）做成阴性对照，与被检组织一起染色。

　　阳性对照

　　阳性对照又分自身对照和已知阳性组织对照。

　　自身对照是指被检组织内存在已知抗原的正常组织，自身对照结果阳性，说明本次实验操作过程是正确的，使用的抗体也是正确的，但不代表抗体稀释比是正确的，因为自身对照的组织都是正常组织，抗原表达很强，用很低的抗体浓度，就能有很好的表达，而肿瘤抗原通常表达都较弱，往往需要正常的稀释比才能正确表达，如果抗体浓度低，会出现假阴性的结果。

　　已知阳性组织对照是选择结果强阳性的肿瘤组织做阳性对照片，效果和自身阳性对照也是一样的。