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江西株安全性存疑是被“冤屈”?多名专家再论我国高蓝史
——2017温氏大华农猪蓝耳病专题研讨会圆满举办
 
农财宝典-新牧网 记者 王之娴
 
    1927年,在江西井冈山走出了中国工农红军,星星之火可以燎原。
    而2007年,在江西走出了中国高致病性蓝耳病的确诊和第一个高蓝疫苗JXA1株。
    2017年,在一个全新的蓝耳病防控形势下,温氏大华农猪蓝耳病专题研讨会5月23日在井冈山召开,多名蓝耳病领域专家与集团猪场技术骨干在此聚首,再次深入探讨蓝耳病话题。
 
研讨会现场

    广东温氏大华农副总裁方炳虎致开幕辞。方炳虎表示,十年前田克恭主任和遇秀玲博士团队在江西深入一线取得了蓝耳变异株JXA1,大华农作为首批受让企业率先上市了JXA1-R高致病性蓝耳病疫苗,十年后的今天在此再论蓝耳病,将要开诚布公,还蓝耳机制和预防的一个真面貌。

广东温氏大华农副总裁方炳虎致开幕辞
 
历经考验的JXA1-R株蓝耳苗的诞生
   国家兽用药品工程技术研究中心主任、JXA1株蓝耳病弱毒疫苗创始人、时任农业部中国动物疫病预防控制中心诊断室主任的田克恭再次回顾了当年对高致病性蓝耳病病因的确诊和JXA1株蓝耳病弱毒苗的诞生历程。
   

JXA1株蓝耳病弱毒疫苗创始人田克恭回顾研发历程
 
    2006年春夏之交,我国江西等省份首次暴发猪“高热病”疫情,引起大量生猪不明原因的死亡。根据国家统计局数据,2007年比2006年牲畜出栏下降4699万头,减少7.68%。随之越南和老挝也发生了症状类似的高热病,一时间成为东南亚地区威胁最大的疾病。
    2006年8月田克恭团队深入发病最严重的地区,从一头发病仔猪脑组织中分离出高致病性猪蓝耳病病毒NVDC-JXA1株。通过全基因序列的测定和分析和攻毒实验复制病例,几经严肃讨论,最终证实了JXA1株这种变异的蓝耳病毒是导致高热病发病的原因。田克恭团队紧接着开始了疫苗的研发。
    安全性是蓝耳病疫苗最重要的属性,农业部对其慎之又慎。田克恭介绍,当年申报JXA1株疫苗时被要求反复提交的就是安全性的评价实验数据,因此安全性实验做了一轮又一轮。
    通过标准化的毒力返强实验,使用PRRSV JXA1-R株82代基础种毒在猪体内连续传代至第5代。临床观察、体温测量、增重情况以及统计学分析,血液和脏器组织中PRRSV抗原检测、定量分析和病毒分离,大体剖检和组织病理学观察,结果均未见异常。使用JXA1-R株82代基础种毒接种第1代(重复)和传至第5代的猪同时进行21天的试验观察,两组猪在临床表现、病理变化、生长性能、病毒含量等方面均无差异。证实了JXA1-R不存在毒力返强威胁。
    随后又相继做了配种日母猪、怀孕后期母猪、临产母猪的超剂量安全实验,证实了JXA1-R株疫苗不会引起母猪的流产、胎儿的带毒等。
    其次才是有效性。包括最小免疫剂量实验、免疫持续期实验等、母源抗体的保护和干扰性实验等。田克恭表示,在产前30天进行母源抗体保护实验,给予母猪足够的免疫,母源抗体可持续至21天,能在持续期内为小猪提供很好的母源抗体保护。而在28天母源抗体消失之后攻毒将则仔猪死亡,这进一步说明JXA1株疫苗对高致病性蓝耳病毒是具有有效的保护作用的。
    随后,田克恭又验证了JXA1-R株疫苗对经典株毒的保护作用。证实JXA1-R株对我国分离的PRRS经典强毒株HB2株和美国VR2386经典强毒株免疫保护率均为100%。
    2008年8月,农业部召开会议,组织完成针对当时的3个变异活苗、2个经典活苗和2个基因工程活苗疫苗免疫效力评价的双盲实验,JXA1-R株疫苗以80%的保护率拔得头筹。
    2009年,农业部下发对JXA1-R株活疫苗进行评审的通知,在6个省份对其进行本底调查、小试、普免三个阶段的临床应用试验,共普免3407.058万头猪,并最终获得了副反应低、临床效果好的一致结论。
    最终,农业部将高致病性蓝耳病列入重大疫病防控强制免疫方案,在全国强制免疫JXA1-R株高蓝疫苗。
    于2011年3月4日,江西株、湖南株、天津株高致病性蓝耳病疫苗同时获得正式批文。2013年,田克恭等人因为在高致病性猪蓝耳病的病因确诊及防控关键技术研究应用上做出的突出贡献,获得国家科学技术进步二等奖。
    截至2016年底,蓝耳病疫苗在我国及亚洲国家应用75.2亿头份,对稳定控制疫情发挥了主要作用,经济和社会贡献显著。
 
江西株毒力返强传言的回应
 
研讨会现场

    时间来到2017年,事实上在近年来开始出现关于江西株高蓝耳苗致弱代次不足、存在返强风险的传言,而本次研讨会上,许多专家和集团猪场技术骨干也提出了这类行业内一直关心的问题。田克恭对此作出了回应。
    对于现在临床不稳定的猪场上中分离出多毒株与江西株毒株相近的现象,田克恭表示,“目前所有疫苗毒株,只有江西株将不同代次的基因序列全部上传在Genbank上,这就是为什么只要分离到蓝耳病毒一经测序比对都会显示和江西株接近。”田克恭说,“而之所以公布序列,是因为站在科学家的角度,我希望能够将它分享将来供大家将来研究所用。”
   而关于传代弱化的问题,田克恭表示江西株在研发时,传代到118代时蓝耳病毒在细胞上的含量可以达到7.5,但是打到猪身上既不产生抗原也不产生抗体,再往回做到110代则是不完全保护。因此江西株使用的是82代的基础种毒,出苗是在95代,但在95代和118代之间还有一些空间。
    有猪场表示由于临床上和实验上不一样,实验中使用5头猪做实验动物,死亡率不超过20%往往难在数据上体现,但在临床上即使遇到哪怕死亡超过3-5%就会觉得非常不稳定。对此田克恭认为,事实上到目前为止还并没有非常完美的蓝耳病解决方案,安全性是蓝耳病疫苗普遍存在的困扰,也是蓝耳病先天决定的。如果确实存在使用高蓝苗出现不稳定现象,要有针对性地进行分析,无论是疫苗情况、还是猪场本身的情况都要加以分析。
    遇秀玲也认为,临床有很多猪群处在潜伏感染的状态,在接种疫苗7天的时候反而会起到抗体依赖作用增强临床发病反应。因此这时要知道问题到底是出在疫苗含量上还是其他问题上,诊断是最重要的。
 
稀释后依然可以达到毒价标准,可以小剂量免疫
    对于蓝耳病的认识还在不断总结,比如蓝耳苗的免疫保护期到底有多长?活以及疫苗抗原滴度为什么不设上限,只有下限?一些猪场只免疫半头份或者稀释10倍免疫的做法是可行的吗?

兽医专家对蓝耳病问题的讨论和经验分享

    对此遇秀玲表示,蓝耳苗的保护期可以持续六个月,之所以定在4个月是因为申报上的原因以及根据肉猪的上市节奏制定。蓝耳苗的免疫剂量毒价一般可以达到6.5,标准是4.0,考虑保存期、运输等各个环节的衰减,因此定为一头份不低于5.0。
    而上限则是由成本决定的,曾经蓝耳苗的效价是很难做高的。疫苗厂家出于成本的考虑,一般就不会刻意做高抗原含量。但现在可以做到7.0以上,悬浮培养可以做到8.0,又因受招标政策引导,厂家纷纷开始做高蓝耳苗抗原滴度。但对使用者来说毒价特别高的情况下可能会出现问题。方炳虎也认为,现在的疫苗生产企业应当摸索出一个科学合理的上下限的区间来,不能盲目提高毒价。
    为了和猪瘟避开免疫时间点上的干扰,通常仔猪在14天做蓝耳首免,遇秀玲指出,这种做法实际上是存在一定免疫干扰的,所以有些场仔猪还会再做二免。这时这些猪场就会使用小剂量免疫,但遇秀玲认为小剂量免疫是没有问题的。“因为从现在出苗质量来看,稀释十倍,20倍,都是可以达到最小免疫剂量标准。唯一的问题是,比如疫苗出苗6.0的毒价,稀释100倍后在临床免的过程中,保存一个小时还行,两个小时就开始下降,三个小时就不行了。因此要很快地打过去,打到后面就不起作用了。在临床操作过程中细节要注意,这就是为什么我们经常感觉一次和一次之间免疫效果不一样。”遇秀玲说。
 
蓝耳病是猪病的源头
    南京农业大学教授周斌在谈到华东地区的蓝耳病防控案例时认为,蓝耳病是猪病的源头。蓝耳病的感染会造成免疫抑制,促进PCV2的繁殖和扩增能力,混合感染和继发感染严重,还会出现后遗症。引种是我国蓝耳病流行的重要原因,饲养密度大、管理水平差、疫苗种类多、饲料抗生素广泛添加和饲料霉菌毒素的存在使得蓝耳病在场内难以平复。

南京农业大学教授周斌谈华东地区的蓝耳病防控案例

    对于蓝耳病阳性场,周斌建议科学使用弱毒苗,明确猪场存在PRRSV感染,摸清感染的状况,然后加强饲养管理,采用进口头孢药物控制,熬米汤+湿拌料加强仔猪适口性,让小猪多吃快长,能使得小猪恢复率达到40-50%。建议增加一些相关考核激励措施,加强猪场内环境消毒与带猪消毒,最大限度控制激发感染,控制好猪瘟、伪狂犬、气喘病等其他疾病。
    华南农业大学副教授黄毓茂也认为,我国猪病流行情况复杂,但基本上蓝耳病是许多其他疾病的根源,所谓“蓝耳病是个筐,什么毛病都往里装。”针对目前蓝耳病的变异情况黄毓茂表示自然科学家不要忘记基本的哲学思想,变化是由量变到质变,在同一个血清型内,可以弱化变异。黄毓茂指出目前行业的普遍问题:猪现在陷入疫苗万岁的境地,有打不完的疫苗和加不完的药,使得猪的基本系统反过来受伤害。认为“做兽医应该围绕经营转,而不是围着猪病转”。猪场对猪病防控有三个层次:最基本的层次是能尽快控制疾病稳定生产;再高明一点则是做好防控预案,使得猪场基本不发生重大疫情(全程存活率95%以上);而最高明的应该是结合生产实际,再造生产流程、简化养猪程序、重构防疫体系,提高劳动效率、降低操作成本。“不能让养猪人都成为养猪专家,下面的人不需要懂猪病,专业兽医懂就行了。养猪行情好的时候,先赚钱再说,行情不好的时候,净化、淘汰什么事都可以干。水平不够的时候,稳定压倒一切。”黄毓茂说。
 
华南农业大学副教授黄毓茂谈蓝耳病流行动态和防控策略

    在蓝耳病的控制上,黄毓茂建议条件一般猪场的不建议做净化,使用蓝耳苗是当前最经济简单的手段。“无论用什么疫苗,坚持排他主义,只用一种苗。”并且应当根据猪场具体情况制定免疫程序,比如有些猪场跟胎免优于普免,但只有一个怀孕舍的猪场不能跟胎免。如果因为某些原因要换蓝耳苗疫苗,那么从应该母猪开始换而不是从仔猪开始。
 
活苗+灭活苗的免疫方法探索

广东省农业科学院兽医所副研究员蔡汝健介绍蓝耳苗活加死免疫方案的探索

    广东省农业科学院兽医所副研究员蔡汝健介绍了对蓝耳苗活加死的免疫方案的探索。目前我国市场上PRRSV弱毒苗的安全性一直是让业内头疼的问题,而灭活苗虽然具备安全性,但是保护效果不确切,免疫后48天才能起到一定的作用。因此是否能将二者结合使用发挥二者优点成为了研究的方向之一。实验结果显示,通过将二者结合使用能有效降低仔猪病毒血症、呼吸道疾病、发病率和死淘率。对此黄毓茂认为在有活毒感染基础下,使用灭活苗是有用的,但是需要多剂量注射,其效果较活苗会弱一点,但是灭活苗对阴性猪是无效的。
 
蓝耳病临床防控的六个要点
    蓝耳防控过程是十分曲折的,研讨会上包括温氏集团、正邦集团、中粮肉食等在内的多名分享了温氏在在蓝耳病防控上的经验,通过临床实践总结了蓝耳防控有六个要点。

兽医专家对蓝耳病问题的讨论和经验分享

    第一是策略,确定怎么去做,疫苗免还是不免。对于体量大、生产流程比较紧凑,猪来源比较复杂,调拨范围广,商品场的后备猪是不断补充的现实情况,大免疫策略是蓝耳苗一定要免。在局部区域可能可以做到不同的策略,但绝大部分还是免疫为主。
    第二是疫苗选择。现在市场上商品化疫苗多种多样,以温氏为例,也经历过不同疫苗的选择,但目前为止是以JXA1株为主导去免疫,局部区域会有使用普通蓝耳免疫。黄毓茂也建议有条件的猪场每一批蓝耳苗一定要经过试用。
    第三是怎么免。以温氏为例,倾向于高密度的免疫,一年在4-6次之间。在受普通蓝耳影响的场,基础母猪群也会有增加一次普通蓝耳免疫。在母猪基础免疫之后,小猪在肉猪期间也有2次的免疫。但免疫日龄在各个区域执行有所差异,有些在40天,有些在21天,有些在35天,有蓝耳影响的公司可能在100天会再增强一次。在小区域里受普通蓝耳影响的猪场可能会增加普通蓝耳的免疫。另外专家还是认为蓝耳要倾向于免疫的单一化,不要将蓝耳混的太多。
    第四个如何评价。专家认为可以通过大数据对比,看小猪的损耗、上市率、残次率和临床表现等。而对母猪来说,经过多次免疫之后,如果没有出现新毒株的影响,应该是达到一个平衡的状态。

兽医专家对蓝耳病问题的讨论和经验分享

    第五是如何看待蓝耳苗。近两年蓝耳病也在不断出现新的毒株,比如类NADC30毒株,目前认为和引种有重要关系。讨论认为蓝耳病出现问题以后,首先要考虑主流的应对措施,而不是期望一针疫苗解决问题。对于新出现的蓝耳问题,不一定是因为蓝耳苗本身,引种等因素对蓝耳稳定影响重大。尤其是目前疫苗对新毒株的交叉保护并不是那么完全。“仅靠疫苗去解决蓝耳病短期内是可行的,但是长期可能会出现一些问题。”
    第六点是如何监控的问题。由于蓝耳病的复杂性和目前检测手段不能区分毒株,监控能说明的问题有限,讨论认为仅仅依靠抗体、PCR结果来确定猪场蓝耳病影响程度有失偏颇,检到所谓疫苗毒株也不一定就是疫苗返强。如果有条件猪场可以通过临床症状、病院检测、回归实验等综合进行确诊。另外可以看生产指标是不是在可控范围内的,检到蓝耳毒株无论是野毒还是疫苗毒,全程达到95%上市率,那么可以认为不一定有大的影响。最后还要考虑混合感染的问题,即有可能造成危害的是其他的疾病。


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