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黑老虎(布福娜)植物资源的生物学特征


黑老虎作为药材时伪品暂未见报道,但从广西玉林、广东清平、江西樟树等药材市场上调研情况来看,多以黑风藤等价格较便宜的藤类根部充当黑老虎根作药用,其与黑老虎的化学成分、药理活性差异较大,使用不当即可发生严重不良反应。故黑老虎的生物学特征描述与分类研究及其药材鉴别对于良好市场风气的形成至关重要。

1.黑老虎植物形态特征

1.1 1 整体形态

常绿藤本,全株无毛,根肠状肉质横走,树皮灰黑或暗褐色,有环状缢痕和不规则纵裂纹,并有瘤状凸起,有辛香味。

叶革质,单叶互生,具柄,叶面有蜡质覆盖、光滑,叶脉羽状网脉,叶基楔形,叶尖渐尖,有托叶,长圆形至卵状披针形叶革质,长圆形至卵状披针形,长7 - 18cm,宽3-8cm,先端钝或短渐尖,基部宽楔形或近圆形,全缘,侧脉每边6-7 条,网脉不明显;叶柄长1~2. 5cm。

花单生于叶腋,稀成对,雌雄同株,异花授粉。雄花:花被片红色,10- 16 片,中轮最大l 片椭圆形,长2-2. Scm,宽约14mm,最内轮 3 片明显增厚,肉质;花托长圆锥形,长7 -10mm,顶端具 1-20 条分枝的钻状附属体。雄蕊群椭圆体形或近球形,径6- 7mm,具雄蕊14 -48枚;花丝顶端为两药室包围着;花梗长1- 4cm,雌花:花被片与雄花相似,花柱短钻状,顶端无盾状柱头冠,心皮长圆体形. 20-80枚,具无乳突光滑型柱头,花梗长5 -10mm。聚合浆果近球形,由 30 - 70个小浆果聚合而成,红色或暗紫色,形似足球,径6- 10cm或更大;小浆果倒卵形,长达4cm,外果皮革质,不显出种子。种子心形或卵状心形,种脐向内凹陷,长l-1. 5cm,宽0.8- 1cm。花期4-7月,果期7-11月。

苗木联系方式微信;18374545223

1.2 花粉和种子微形态

(1)花粉形态

花粉扁球形,极面观为6裂圆形,赤道面观长椭圆形,大小约9.7X 20.8μm。异极6沟,3 条沟在一极汇合,形成3合沟;极面观不汇合沟的长度约为极面半径的1/2;沟较窄,中间具粗线形加厚;外壁厚,网脊粗,网眼较小。

(2)种子形态

种子心形或卵状心形,大小约为7.9- 18. 0mmx6.7 - 10. 9mmx3.1 -6.0mm,淡黄色至褐色,有光泽。背部钝尖状凸起,腹部有窄而浅的凹缺,一侧面平,另一侧面弧形凸出,或两侧面均弧形凸出;种脐位于腹部近中央凹缺处,长条形,延伸至种子两侧,轮廓清晰,较小,浅褐色。种皮表面近平滑或有细皱纹:微形态特征为负网纹型,网眼隆起,不规则条形或菱形,表面常有凹坑,网脊凹陷。

1.3 花的形态发生

①花被片的发生 当年生枝条中下部的叶腋或芽鳞腋内形成l小突起,即为刚萌生的花原基。首先发育的是l枚小苞片,在苞片的对侧,发育第1枚花被片。在圆锥形花顶的侧面基部,花被片原基螺旋状向顶发生,相邻原基之间的角度约为137.5°。花被片原基初呈小圆突状,后随着分生组织的活动而不断增高长大,进而侧向生长,最后形成花被片。

②雄蕊的发生 在最内轮 3枚花被片发生的同时,在花被片之间,雄蕊原基螺旋状向顶发生。雄蕊顶端膨大,出现两侧隆起中间微凹,形成幼期花药。花药继续发育的同时,花丝与药隔纵向剧烈伸长,药隔横向生长不明显,顶端被花药包围。在花顶顶端的雄蕊:花药不分化,,或分花不完全,形成少数钻形退化雄蕊。

③雌蕊的发生 雌蕊的发生早期与雄蕊的发生方式相似。雌蕊原基近轴面两侧侧向生长迅速,初期呈“V”字形,后两侧逐渐向中央靠拢呈狭缝状,继而发育成无乳突光滑型钻状柱头,腹缝线由 顶端向基部逐渐愈合。

2 黑老虎的鉴定研究

由于黑老虎可做药材使用的资源不多,临床需求量又非常大,市场混伪品时常可见。早在20世纪90 年代就有学者关注黑老虎的鉴别研究,致力于规范药材的来源,为保障市场药材的质量以及确保黑老虎临床应用的安全有效做出贡献。

1994 年,谭立英等总结黑老虎药材的性状鉴别、组织鉴别(根和藤茎的横切面)、药材粉末鉴别和理化鉴别方法。张春辉等在薄层鉴别的基础上,又基于高效液相技术针对黑老虎中原儿茶酸建立了含量测定方法。王秀芹等基于2015 版《中国药典》薄层色谱法建立黑老虎药材的定性鉴别方法。同时,徐亮利用日本南五木脂素A对照品对17 批次的黑老虎进行薄层鉴定和基于高效液相色谱法技术以日本南五木脂素A、乙 酰基日本南五木脂素A、二氢愈创木脂素、kadsuralignan I对照品建立对17 批不同产地黑老虎特征谱图的检测方法,还按照 2010 版《中国药典》的相关要求测定黑老虎药材中的浸出物、水分、灰分、重金属和有害元素以及农药残留等的含量,初步建立黑老虎的质量标准。

2. 1 性状鉴别

黑老虎主根呈圆柱形,直径1- 5cm。表面色泽黑褐或灰褐,常见多数纵皱纹和横裂纹,皮孔椭圆形。质地坚韧,不容易被折断,断面呈粗纤维性,皮部为棕色,容易剥离b木质部为浅棕色,可见放射状导管小孔密布。气微香,味微苦涩。

黑风藤为番荔枝科瓜馥木属植物黑风藤Fissisfigmapolyaruhum( Hook.F. et Thorns.)Merr.,民间以根和藤人药。主根呈圆柱形,长20 - 60cm,直径2- 8cm,表面色泽灰黄或棕褐,体轻,质地较硬,不容易折断,断面呈纤维性。切片为椭圆形的斜切片,厚1-2cm,外皮色泽灰褐,皮厚2-3mm,色泽棕,易与木质部分离;木部色泽灰白,有放射状纹理和密集小孔。气微,味苦而涩。

黑老虎与黑风藤的主要区别是黑老虎主根略为扭曲,直径略小,侧根上有许多须根,表面色泽为黑褐或灰褐,同时还可见多数纵皱纹和横裂纹,弯曲处常裂成横沟,具椭圆形皮孔。

2.2. 显微鉴别

①黑老虎 黑老虎藤茎横切面:木栓层为4列细胞,皮孑L明显,栓内层为4-8列细胞组成,常散有石细胞。中柱鞘部位可见少量石细胞,微木化的纤维群断续成环。韧皮部窄,薄壁细胞含有少量的石细胞,形成层明显。木质部射线宽广;导管散在,类圆形,直径39 -195μm。髓部发达,由较大的薄壁细胞组成,并散有石细胞。黑老虎药材粉末鉴别:本品粉末介于红棕色和黑褐色之间。纤维单一或成束,草酸钙小方晶密布在纤维壁中,构成嵌晶纤维,直径为20- 80μm。多破碎的网纹导管和具缘纹孔导管,直径为30~50μm。淀粉粒单粒或复粒。石细胞类方形或椭圆形,偶有嵌晶,壁孔明显。

②黑风藤 黑风藤茎横切面:表皮细胞1列,长方形,棕黄色,小茎有非腺毛。皮层细胞5 -10列,长圆形,棕黄色,部分细胞间有空隙。韧皮部为披针形,韧皮射线由内向外渐宽,薄壁细胞可见棕黄色分泌物质。木质部宽广,约为茎的2/3,木射线细胞1-3列,长方形,导管单或几个相连,呈放射状分布,直径36 -156μm。射线细胞散有草 酸钙小方晶。髓部小,由圆形或多角形薄壁细胞组成。黑风藤药材粉末:本品粉末呈淡黄色。纤维成束或分离,韧皮纤维壁较厚,微木化,直径20 - 36μm;木纤维壁较薄,木化,胞腔较大。具缘纹孔导管,淡黄色,直径23 -126μ.m。草酸钙方晶散在或分布在细胞中,直径15 - 26μm。非腺毛细胞2-6个。石细胞方圆形或不规则形,孑L沟明显。

2.3 理化鉴别

①显色鉴别 取样品粉末lg,加蒸馏水10mL,混匀,浸泡30min,滤过,备用。另取试管2只,各取滤液1mL,一只滴人乏氯化铁试液3-5滴;另二只滴人碘化钾试液5滴。黑老虎供试品溶液遇三氯化铁试液有棕色沉淀生成,遇碘化钾试液有红棕色沉淀生成,而黑风藤无此特征性反应。

②泡沫鉴别 取样品粉末lg,加蒸馏水10mL 浸泡30min,滤过;取滤液2mL,置于试管内,用力激烈振摇,黑老虎供试品溶液会有大量泡沫生成,并且在2h内不会消失,而黑风藤无此特征性反应。

③薄层色谱鉴别 方法1:取样品粉末各1g,加甲醇20mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20mL使其溶解,再用氯仿振摇提取2次,每次30mL,合并氯仿液,蒸干,残渣加甲醇2mL使溶解,再加在中性氧化铝柱(100 - 200目,4g,内径约]。5cm)上,用甲醇30mL洗脱,收集甲醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇0.5mL使溶解,作为供试品溶液备用。取黑老虎对照药材lg,同法处理后作为对照药材溶液。薄层色谱法试验,吸取上述3种溶液5μ.L,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯一乙酸乙酯一甲 酸(7:12:0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。黑老虎供试品溶液与对照药材溶液色谱相应的位置有相同的紫红色斑点,而黑风藤供试品色谱中无此特征斑点。方法2:取样品粉末各1g,加甲醇30mL,超声处理1h,滤过,滤坡蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取黑风藤对照药材 1g,同法处理后作为对照药材溶液。薄层色谱法试验,吸取上述3种溶液各5 - 10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,展开剂为石油醚一甲 酸乙酯一甲 酸( 15:5:0.4),展开,取出,晾干,再置于紫外灯( 365nm)下检视,黑风藤供试品溶液与对照药材溶液色谱相应的位置有相同颜色的荧光斑点,而黑老虎供试品色谱中无此特征斑点。

2.4 黑老虎与其混伪品黑风藤之间通用的可行性

,广州白云山和记黄埔中药有限公司黑老虎主要作为强腰壮肾丸、舒筋健腰丸的重要原料药,而在现行局颁标准中,对壮腰健肾丸的含量测定方法是对原儿茶醛、原儿茶酸进行测定。关于黑老虎和黑风藤的药材质量研究较少,其中黑老虎收载在《广东省中药材标准》《中华本草》和《广西瑶族习用药材质量标准》,而黑风藤还没有法定的质量标准。大量的文献调研显示,原儿茶酸和原儿茶醛是黑老虎、金毛狗脊、桑寄生、鸡血藤和金樱子等药材的共有成分,而黑风藤中暂未发现原儿茶酸和原儿茶醛。市面上由于黑风藤价格较黑老虎价格低,时有用其根冒充黑老虎药材使用的情况,但从来源、性味、功效、化学成分和药理作用等多个角度分析,二者区别较大,其通用可行性和鉴别方法有待进一步深人研究。

黑老虎国内外市场前景

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