AGE对光损伤皮肤成纤维细胞的CatD有影响吗？

?????

晚期糖基化终末产物对UVA照射皮肤成纤维细胞组织蛋白酶D表达及其活性的影响

许新雅    许庆芳    郑跃    黄云芬    赖维    龚子鉴    陆春

作者单位：中山大学附属第三医院皮肤病与性病科

晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products，AGE）是指蛋白质、脂类、核酸等大分子物质的游离氨基与还原糖发生缓慢非酶糖化反应，最终形成结构稳定、不易降解的大分子棕色产物。AGE与衰老、氧化应激密切相关。新近研究发现，AGE在光老化皮肤中堆积，并在光老化中起重要作用。组织蛋白酶D（cathepsin D，CatD）是降解AGE的重要蛋白酶之一，在光老化皮肤及皮肤成纤维细胞中表达降低，机制未明。许新雅等对比检测AGE-牛血清白蛋白（BSA）对UVA照射和未照射的皮肤成纤维细胞CatD表达和活性的影响，探讨CatD在光老化皮肤AGE堆积中的作用机制。

 

-------方   法

原代培养来自儿童包皮成纤维细胞。CCK-8法筛选对成纤维细胞无细胞毒性的AGE-牛血清白蛋白（BSA）浓度。分别以50、100、200 mg/L AGE-BSA孵育细胞24 h，以未处理细胞作为对照组，采用RT-PCR、Western印迹及荧光法检测AGE-BSA对细胞CatD表达和活性影响。将部分成纤维细胞分为6组，即对照组、AGE-BSA组、BSA组、UVA组、UVA-AGE-BSA组、UVA-BSA组。AGE-BSA组加入最大无细胞毒性浓度AGE-BSA孵育24 h，BSA组加入相同浓度BSA孵育24 h，后3组除分别接受上述处理外再接受10 J/cm2 UVA照射。处理结束后，收集细胞mRNA和蛋白，采用RT-PCR、Western印迹及荧光法检测细胞CatD表达和活性。

 

-------结   果

50、100、200 mg/L AGE-BSA对皮肤成纤维细胞增殖活性无显著影响。50 mg/L组、100 mg/L组 、200 mg/L组细胞CatD mRNA水平分别为0.267 ± 0.007、0.348 ± 0.007、0.418 ± 0.006，CatD蛋白水平分别为1.403 ± 0.181、2.233 ± 0.090、2.477 ± 0.111，CatD活性分别为1.760 ± 0.080、2.330 ± 0.060、2.890 ± 0.080，较相应对照组显著升高（均P < 0.05）。age-bsa呈剂量依赖性地刺激细胞catd表达和活性。对照组、uva组和uva-age-bsa组细胞中catd="" mrna表达水平分别为0.155="" ±="" 0.005、0.480="" ±="" 0.005、0.394="" ±="" 0.008，蛋白表达水平分别为0.920="" ±="" 0.235、2.583="" ±="" 0.199、2.070="" ±="" 0.125，catd活性分别为1.110="" ±="" 0.040、2.970="" ±="" 0.110、2.560="" ±="" 0.060；uva组catd="">P <>P <>

 

-------结   论

AGE可升高未接受UVA照射的皮肤成纤维细胞CatD表达和活性，但AGE却抑制UVA照射上调的CatD表达和酶活性，这种抑制的机制尚待深入研究。

DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2016.08.013

《中华皮肤科杂志》，2016，49（8）：582-586

喜欢这篇文章，就在下面

吧！