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恶性黑素瘤是一种皮肤黏膜的恶性肿瘤。在世界范围内,皮肤恶性黑素瘤发病率的年增长率3% ~ 5%。在我国每年新发病例约2万。2007年,国外两个微小RNA(miRNA)芯片研究发现黑素瘤特异表达的miRNA(miR)。后续的基因芯片实验结果发现,miR-200家族、miR-211、miR-141、miR-182、miR-183等在皮肤黑素瘤组织、细胞水平特异性表达。研究发现,miRNA除了能够精确地确定单一肿瘤的类型,还能够发挥重要的抑癌基因和(或)原癌基因的作用。因此,miRNA不仅可以成为新型的生物标志物,进一步研究特异表达的miRNA可以为肿瘤的临床治疗提供新的方向。
miRNA211在人皮肤黑素瘤的表达及功能研究
徐妍 董达科 华海康 朱小红
作者单位:无锡市第二人民医院肿瘤科(徐妍),皮肤科(董达科、华海康、朱小红)
甲基纤维素实验比较转染后第6天阴性对照组、空载体对照组和miR?211过表达组A375细胞的致瘤能力 1A ~ 1C:每组随机选取30个克隆,并计算出每个克隆大小的x[±]s(× 100); 1D ~ 1F:GelDoc拍摄了1组实验在观察至转染后第12天,3个组细胞克隆的数量大体观
已有研究证明,基质金属蛋白酶(MMP)1、2、3、9、14、15、16在体内外均高表达,并表现出侵袭的表型。徐妍等通过Diana Tool筛选miRNA211(miR-211)的靶基因时,发现在357个预测靶分子MMP-16排在17位,但尚无实验相关数据。因此,他们初步探讨了miR-211新的靶分子MMP-16与miR-211表达的相关关系。
研究结果
1. 研究显示,miR-211在黑素瘤细胞G361、C32和A375表达量分别是0.09 ± 0.02,0.000 52 ± 0.000 20,0.000 03 ± 0.000 01(F = 10410,P < 0.01)。mir-211在黑素瘤标本的表达量(0.17="" ±="" 0.03)显著低于痣的表达量(0.87="" ±="">t = 9.118,P <>
2. 体外实验中将黑素瘤细胞分为阴性对照组、空载体对照组、miR-211过表达组。结果显示,miR-211过表达组的细胞增殖与细胞周期分布与阴性对照组及空载体对照组比较,差异无统计学意义。miR-211过表达组的克隆形成力及细胞迁移能力(0.49 ± 0.05、0.49 ± 0.06)均显著低于空载体对照组(0.85 ± 0.09、0.82 ± 0.09,均P <>
3. 转染miR-211 mimics后24、48、72 h,miR-211过表达组的MMP-16 mRNA水平(0.33 ± 0.02、0.52 ± 0.01、0.71 ± 0.01)均显著低于空载体对照组(0.91 ± 0.03、0.96 ± 0.02、0.97 ± 0.03,均P < 0.05),而空载体对照组与阴性对照组在3个时间点的比较,差异均无统计学意义。提示mir-211表达上调后,mmp-16="">
DOI:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2016.09.006
《中华皮肤科杂志》,2016,49(9):630-635
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