1 水产疫苗的种类
水产疫苗按抗病原的种类可分为细菌疫苗、病毒疫苗和寄生虫疫苗;按组成成分可分为单价疫苗、多价疫苗和混合疫苗(多联疫苗);按疫苗制备方式可分为活疫苗、灭活疫苗(包含土法疫苗)、亚单位疫苗及生物技术疫苗等。
1.1 灭活疫苗
灭活疫苗是经理化方法将病原微生物灭活,但其仍保持免疫原性,接种后使水生动物产生特异性抵抗力的疫苗。灭活疫苗是目前报道和应用于水产养殖最多的疫苗种类,该疫苗包含多种组织浆灭活疫苗、弧菌灭活苗、嗜水气单胞菌疫苗、链球菌疫苗,以及欧美国家鲑鳟鱼养殖中常用的冷水病疫苗、VHS 疫苗、PHV 疫苗等。灭活疫苗研制周期短,使用安全,易于保存,但其接种后不能在体内繁殖,因此需要接种剂量较大,免疫持续时间短,且需要加入适当的佐剂并制成多价苗或联合疫苗等方法改善其不足。
1.2 减毒活疫苗
减毒活疫苗主要指利用基因工程技术,定向控制变异,或将保护性病原体蛋白编码基因插入活载体中制备的能够在机体内增殖并且能够诱发免疫应答的疫苗。减毒活疫苗接种后接近于自然感染,能够有效激发鱼体细胞免疫,并能在体内繁殖,因而疫苗用量少,免疫持续时间较长,且不必添加佐剂。但其不足之处主要是活疫苗在自然条件下安全性差,可能会导致病毒的转变而在生态环境中失去控制 ;同时,活疫苗贮存运输不方便,且保存期短。
1.3 亚单位疫苗
亚单位疫苗是去除病原体中与激发保护性免疫无关甚至有害的成分,但保留有效免疫原成分制成的疫苗。在水产上研究较多的有外膜蛋白、脂多糖等保护性抗原的免疫原性,大部分处于试验阶段。亚单位疫苗具有免疫效果好、毒力小、副作用小、性能稳定、易于保存的特点,但免疫原性不强,通常需添加佐剂,或与载体偶联,以增强其免疫原性。
1.4 基因工程疫苗
基因工程疫苗指应用重组 DNA 技术,将病原的保护性抗原基因在细菌、酵母或细胞等基因表达系统中体外表达,生产能诱导机体产生保护性免疫反应的病原蛋白质,再经过分离纯化而制备的疫苗。应用基因工程技术能制备不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗以及多价疫苗,其兼具亚单位疫苗的安全性和活疫苗的免疫效力。
1.5 核酸疫苗
核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗。核酸疫苗是指将含有编码某种抗原蛋白基因序列的质粒载体导入宿主体内,通过宿主细胞表达抗原蛋白,诱导宿主细胞产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到免疫效果。核酸疫苗免疫保护力增强,制备简单,省时省力,应用较安全且免疫应答持续时间长。但这种疫苗易导致免疫耐受,而且质粒DNA有较低概率整合到宿主基因组,并造成自体免疫疾病和插入突变。核酸疫苗是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗,已成为水产疫苗研究和开发的热点。
2 水产疫苗的接种方式
水产疫苗的接种主要有注射、口服和浸泡(或喷雾)3 种方式。
2.1 注射法
国内外水产疫苗以注射接种免疫为主。根据注射接种部位的不同可分为皮下注射、肌肉注射和腹腔(胸腔)注射 3 种,其中腹腔(胸腔)注射接种是疫苗接种的最常用方法。注射免疫能有效刺激机体产生相应抗体,具有用量少、抗体滴度高、免疫持续时间长等特点,但只适合较大规格个体,易引起机体的应激反应,而且费时费力。目前,国外已开发出专门的机器用于注射免疫,但国内尚未见相关报道,不过在疫苗推广比较好的广东等地区有专门从事鱼类注射免疫的队伍。
2.2 浸泡(喷雾)法
浸泡(喷雾)免疫方法操作简单,适用于鱼苗的大规模接种,且应激作用小。多种因素影响机体对浸泡免疫抗原的摄取,包括疫苗浓度、浸泡时间、水生动物大小、佐剂、抗原形态及水温等。通常为了提高浸泡免疫的效果,可以采用延长免疫时间,增加动物体表的通透性等方法。
2.3 口服法
疫苗的口服免疫不受水产动物大小的限制,且方便、省时、省力。与其他免疫接种方法相比,口服法免疫更适合大规模养殖或分散养殖水产动物的免疫,尤其适合于多次重复免疫操作。但口服疫苗在实际应用中易受胃肠道消化酶的消化,破坏其免疫原性。因此,目前有关口服疫苗的研究主要集中在探索一种有效的载体投递系统,避免疫苗受消化酶及酸环境的影响。
水产疫苗的推广可以减少养殖生产中药物的使用量,减少药物造成的环境污染及对水产品的品质的影响,避免养殖动物体内的药物残留引起食品安全问题。目前我国水产疫苗发展缓慢,与疫苗研究基础薄弱和给药方式的限制有重要关系,因此应该加强基础领域的研究,加强技术推广工作,为水产疫苗的产业化和市场化奠定基础。
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