一、Map viewer查找基因序列,RNA,启动子
下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤
1、A. 打开Map viewer页面,网址为
在search的下拉菜单里选择物种,for后面填写你的目的基因。
2、B. 点击“GO”:
C. 在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的
小方框里打勾,然后点击Filter:
说明一下:
1.1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。
1.2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,
但总体来说基本相同。尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本
一致,不影响大家研究分析序列。现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范
围的生物科学家用计算机合成的一个序列。我也推荐大家使用这个序列。
1.3、 点击上述三条序列第一条序列(即reference)对应的"Genes seq",出现新的页
面,
1.4、 点击上图出现的“Download/View Sequence/Evidence ”,即下载查看序列等功
能,先对上面这张图做点简要的说明,在Sequence Format(序列输出格式)后面是一个
下拉式选择菜单,默认的为FASTA格式,还有一个是GenBank格式。我推荐大家选择
GenBnak格式,因为这个格式提供了很多该基因的信息,而FASTA格式只有基因序列。
1.5、在Sequence Format后选择GenBank,然后点击下面的Display,目的基因的相关信
息和序列就出现在眼前了。
在上述打开的网页中,你可以看到基因长度,基因序列,以及这个基因是如何被报道出来的
等各种信息。
你会看到: mRNA join(3598..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057, 7803..8394) 这代
表了从基因的3598位开始就是转录区了,即我们常说的mRNA片断,由于内含子的存在,
所以mRNA在DNA序列上分成了几段。
CDS join(3660..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057, 7803..7970)
CDS代表编码序列,即蛋白编码区是从3660开始的(ATG),由于剪接作用所以CDS区也是
不连续的。
说到这里,可能很多朋友都已经明白了promoter即启动子区域在哪里了。但我还是再唠叨
几句:转录起始位点前面是基因的调控区,启动子区没有明显的位置定义,大家也只是猜测
它的大体位置,如果你要研究promoter区的话,建议你选择转录起始位点前的2000个碱基
进行研究,一般默认的是这样。当然你如果觉得长度太长不好研究的话,也可以只研究-
1000到0这一千个碱基,因为一般情况下,启动子区的变异都在这个区域内。
这样大家就可以找到自己的目的基因序列和启动子了,这种方法可能使用的人不是很多,
但我个人比较喜欢,因为它最大的优点是可以找到启动子区域和其他调控区域。希望大家可
以发帖交流,让我们把NCBI用的更好!
出现了很多基因序列,在每个序列的右边还有“Order cDNA clone” 的链接,这些序列中
有些序列是跟你的目的基因同名的,有些是别名(Other Aliases)与你的目的基因一致,根
据每个序列的介绍认真选择你的目的基因。上图中我需要的IL6是标号为2的序列。
2.1、查找cDNA序列
2.1.1、点击Order cDNA clone, 出现目的页面如图所示:
2.1.2、点击Clone Sequence后面的链接即可得到cDNA序列。点击后如图所示(只抓取其
中一部分):
2.2、查找mRNA、蛋白序列
回到步骤1点击“Go”之后出现的页面,点击目的基因的名字,出现以下页面(只抓取相关
部分):
页面的下半部分,即可以获取mRNA和蛋白序列的部分:
找到“NCBI Reference Sequences (RefSeq)”,它分为几个板块,第一个“mRNA
and ProteinMoon”区可以让我们找到连续的编码mRNA序列和蛋白序列。在mRNA
and ProteinMoon下面有两个序列代码(中间划有一个箭头),这代表了mRNA序列和
蛋白序列。分别点击就可以得到相应的序列页面。点击后如图所示,mRNA序列:
蛋白序列如下:
NCBI Reference Sequences (RefSeq)的第二个板块是Reference assembly,它下面显示
的是Genomic ,点击Genomic下面Reference assembly对应的Genbank或FASTA即可出
现编码的DNA序列(注意:只是编码序列,其中包括内含子,但一般没有5'非编码区)。
这一步就不做贴图演示了吧。
这样我们就可以找到基因的cDNA序列、连续的编码mRNA序列、蛋白序列以及含有内含子
的编码DNA序列了。相信这些操作对很多战友还是有用的。
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