免疫表型分析技术实验原理

免疫表型分析是流式细胞术中最常用的应用。它利用流式细胞术的独特能力同时分析混合细胞群的多个参数。用针对细胞表面抗原荧光抗体染色。大多数这些抗原被人类白细胞分化研讨会赋予“分化簇”编号或 CD 编号，以便使用通用命名法来定义针对特定细胞抗原的单克隆抗体。例如，CD3 是“3 号分化簇”，用于定义存在于所有 T 细胞上的 T 细胞共同受体。

大多数免疫细胞具有特定的 CD 标记物，将它们定义为细胞群。这些用于定义特定细胞群的细胞标记称为谱系标记，如 T 细胞标记（CD3、CD4、CD8）、B 细胞标记（CD19、CD20）、单核细胞标记（CD14、CD11b）和 NK 细胞标记（CD56、CD161）。

除了定义细胞群的谱系标记外，还使用其他标记来表征每个细胞群。这些标记可以包括激活标记（CD69、CD25、CD62L）、记忆标记（CD45RO、CD27）、组织归巢标记（α4/β7）和趋化因子受体标记（CCR7、CCR5、CXCR4、CCR6）。通常，免疫表型实验还包括细胞内标记物，例如 FoxP3（定义 Treg细胞）、细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-2 定义 TH1 细胞）、增殖标记物（Ki67、CFSE）和抗原特异性标记物（主要组织相容性或 MHC 四聚体）。当前的仪器和试剂能够进行多达40 种颜色的免疫表型分析实验，但是，在 12-15 种颜色范围内进行实验更为常见。

表格1. 15色 Treg 细胞免疫表型方案示例。