免疫表型分析是流式细胞术中最常用的应用。它利用流式细胞术的独特能力同时分析混合细胞群的多个参数。用针对细胞表面抗原荧光抗体染色。大多数这些抗原被人类白细胞分化研讨会赋予“分化簇”编号或 CD 编号,以便使用通用命名法来定义针对特定细胞抗原的单克隆抗体。例如,CD3 是“3 号分化簇”,用于定义存在于所有 T 细胞上的 T 细胞共同受体。
大多数免疫细胞具有特定的 CD 标记物,将它们定义为细胞群。这些用于定义特定细胞群的细胞标记称为谱系标记,如 T 细胞标记(CD3、CD4、CD8)、B 细胞标记(CD19、CD20)、单核细胞标记(CD14、CD11b)和 NK 细胞标记(CD56、CD161)。
除了定义细胞群的谱系标记外,还使用其他标记来表征每个细胞群。这些标记可以包括激活标记(CD69、CD25、CD62L)、记忆标记(CD45RO、CD27)、组织归巢标记(α4/β7)和趋化因子受体标记(CCR7、CCR5、CXCR4、CCR6)。通常,免疫表型实验还包括细胞内标记物,例如 FoxP3(定义 Treg细胞)、细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-2 定义 TH1 细胞)、增殖标记物(Ki67、CFSE)和抗原特异性标记物(主要组织相容性或 MHC 四聚体)。当前的仪器和试剂能够进行多达40 种颜色的免疫表型分析实验,但是,在 12-15 种颜色范围内进行实验更为常见。
表格1. 15色 Treg 细胞免疫表型方案示例。
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