SpCas9完全性敲除小鼠模型介绍

CRISPR Cas9基因编辑技术( Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) 是最新出现的一种由gRNA介导Cas9蛋白核酸酶特异靶向到靶位点，从而对目的基因进行编辑的技术。CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击演化而来的获得性免疫防御机制。CRISPR基因编辑技术利用RNA与DNA杂交的原理，通过合成一个与特定DNA互补的gRNA，将CAS9蛋白靶向到靶位点，并进行切割产生DNA双链损伤。这种DNA双链断裂可以提高这个特定位点的重组效率，从而可以利用细胞的同源重组和非同源末端结合机制来进行基因组的编辑，如基因的敲入、敲除和定点突变。

细胞质注射法获取F0转基因小鼠

制备流程 　　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 Cas9的结构

SpCas9完全性敲除小鼠应用

·简化了流程，缩短了制作周期，降低了成本

·可以制作多个基因同时敲除的动物

·可以制作不同种属的基因敲除动物.如猪、牛、斑马鱼