水稻（Oryza sativa）遗传转化实验技术原理

水稻是重要的谷类作物，世界上一半以上的人口以它为主食。人们一直致力于水稻品质和产量的提高。此外，水稻还是研究基因功能和调控机制的重要模式植物。

农杆菌介导的遗传转化由于转化效率高、T-DNA整合拷贝数少，因此目前是常用的水稻转化方法。我们公司多种农杆菌介导的水稻转化方法，主要有以下几种：

• 共培养农杆菌与从成熟种子获得的愈伤组织（图1）。

• 共培养农杆菌与不成熟的胚。 

• 在用液体培养基浸润过的滤纸上共培养水稻愈伤组织和农杆菌。

• 共培养农杆菌与悬浮细胞。该方法可以提供转化效率。

• 将浸泡后的成熟种子的顶端胚性组织用针穿刺后与农杆菌共培养。接种后的种子可不经过组织培养的过程直接长成植株然后结籽。

• 原位蘸花法。

• 组织培养和植物生长条件。

• 多样的水稻品种： japonica 品种： Nipponbare、 Zhonghua11、 Akdong、 Suweon330、Anjungbyeo、 Taipei309、 Cheniere和Katy； indica 品种：9311、 Minghui86、 Minghui63、Kasalath、ASD16、White Ponni、BR29和IR64。

• 农杆菌菌株：GV3101、AGL-1、 EHA101、 EHA105和C58C1等。

• 多种筛选标记：Kanamycin、Hygromycin、Phosphinothricin和G418等。

图 1. 农杆菌介导的indica水稻成熟种子诱导的愈伤组织转化（Sahoo and Tuteja, 2012）。

参考文献：

• Sahoo R. K.; Tuteja N. (2012) Development of Agrobacterium-mediated transformation technology for mature seed-derived callus tissues of indica rice cultivar IR64, GM Crops and Food: Biotechnology in Agriculture and the Food Chain, 3 (2), 123-128.