pUAST载体系统是一个良好、高效的转基因果蝇制备和基因表达控制系统。该系统来源于常用的果蝇P元件转座子，结合强诱导型启动子Gal4以调节转基因表达。
完整的pUAST系统包含两个载体，一个载体被称为pUAST质粒，包含两个P元件末端重复，包括待转座的区域或基因；另一个载体称为辅助质粒或转座酶质粒，编码P转座酶。
当pUAST与转座酶质粒共转染靶细胞时，辅助质粒产生的转座酶识别pUAST质粒上的两个P元件末端重复序列，然后将待转座区和两个P元件末端重复序列插入到宿主基因组中。
P元件属于II类转座子，通过“剪切—粘贴”的机制移动，从一个地方转座到另一个地方，而不留下序列本身（恰好相反，I类转座子是通过“复制—粘贴”的方式移动），在每一个插入位点都会产生一个8 bp的正向重复序列。
通过将pUAST和辅助质粒共注射到果蝇早期胚胎中可以产生转基因果蝇。P转座酶介导两个P元件末端重复序列之间的重组导致生殖系重组交换，以致产生携带靶基因的转基因后代。P转座酶仅在短时间内表达，并且随着辅助质粒的丢失，转座子在宿主基因组中的整合便成为永久性的。pUAST载体上的 mini white基因的表达，可以使果蝇的眼色发生变化，是鉴定转基因果蝇成功与否的标记。或者也可以使用 PCR或其他分子方法鉴定转基因细胞或动物。
在pUAST系统中，目的基因将被克隆到合成诱导型启动子的下游，该启动子由5个串联排列的GAL4结合位点（5xUAS）和hsp70 TATA box组成。目的基因依赖于GAL4的表达，GAL4蛋白在与pUAST质粒上的UAS位点结合后会激活目的基因的转录。因此，在没有GAL4表达的情况下，目的基因保持沉默，但是通过与表达GAL4的果蝇系杂交后，在GAL4表达的细胞中，目的基因会被转录激活。
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