酿酒酵母蛋白表达载体是什么？

酿酒酵母基因表达载体系统是基于广泛使用的pYES2载体而构建的，它是一个可用于在酵母中表达重组蛋白，或者通过在酵母中进行过表达以研究基因功能的强大而有效的系统。目的基因可以克隆在该载体上，通过客户选择的启动子来介导表达。VectorBuilder上有几种可供选择的标准启动子，其中之一是来自酵母半乳糖激酶（GAL1）基因的强诱导型启动子，它是酵母重组蛋白表达系统中最常用的启动子。

在典型的酵母实验菌株（如INVSc1）中，GAL1启动子的转录活性与培养基中的碳源有一定的关系。在葡萄糖存在的情况下，GAL1启动子的的转录受到抑制；半乳糖则会激活该启动子。因此，通过简单地去除葡萄糖的培养基，并用含有半乳糖的培养基替代，可以实现目的基因的诱导表达。

或者，将棉子糖作为碳源。棉子糖既不抑制也不诱导GAL1启动子的转录，即使在棉子糖存在情况下，加入半乳糖也足以激活GAL1启动子。与使用葡萄糖培养基培养的细胞相比，半乳糖对使用含棉子糖培养基培养的细胞诱导更快。然而，由于棉子糖无法抑制GAL1启动子，所以该方法会导致诱导前目的基因的“泄漏”表达。

通常情况下，利用葡萄糖维持培养的细胞经半乳糖诱导后约4小时可检测到重组蛋白的表达，而用棉子糖培养的细胞仅需约2小时即可。建议您设置一个时间梯度来优化重组蛋白的表达。