除了血管特异性荧光斑马鱼以外,还能有标记其它器官吗?比如心脏啦、肝脏啦、淋巴细胞啦?
当然可以!只要借助斑马鱼转基因技术,就可以实现稳定的蛋白表达或是特定组织中目标蛋白的可调控表达。最常用的斑马鱼转基因系统是来源于青鳉的Tol2转座子体系。
将带有转座子的供体质粒与编码转座酶的mRNA一起通过显微注射注入到单细胞阶段斑马鱼胚胎中,转座酶催化Tol2转座子通过”剪切-粘贴“的方式进行转座,将转座子载体中的目的片段(组织特意性启动子-荧光蛋白)整合到斑马鱼基因组中。注射过的胚胎经培养后再从成鱼中筛选出在生殖细胞系中有插入片段并能传递到下一代的转基因斑马鱼。
Fig8. Schematic diagram of establishing a specific promoter driven EGFP transgenic zebrafish model.
例如:
肝脏特异性EGFP绿色荧光转基因斑马鱼模型Tg(fabp10a:EGFP):
Fig9. Tg(fabp10a:EGFP) transgenic zebrafish model generated by SMOC.
巨噬细胞标记EGFP绿色荧光转基因斑马鱼模型Tg(zlyz:EGFP):
Fig10. Tg(zlyz:EGFP) transgenic zebrafish model generated by SMOC.
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