氯化钠对几种常见菌的抑制作用

（天津科技大学，天津300457） 文章主要研究了NaCI对几种常见菌的抑制作用，设计了梯度平板实验和肉 汤增值实验。梯度平板实验表明：很低的NaCI 浓度就能抑制假丝酵母和乳酸杆菌生长；NaCI 溶液浓度大约在5%以下对大肠杆菌具有抑制作用；浓度大约为8. 5%的NaCI 溶液对金黄色 葡萄球菌具有抑制作用。肉汤增值实验表明：浓度4%的 NaCI 溶液对大肠杆菌具有抑制作 用，浓度 5%的NaCI溶液对乳酸杆菌和假丝酵母具有明显抑制杀灭作用，浓度7. 5% NaCI溶液对枯草芽孢杆菌具有抑制作用，浓度10%的NaCI 溶液对金黄色葡萄球菌具有抑制 作用。实验结果为NaCI 抑菌作用提供了数据支持，所设计的实验方法为进一步开展NaCI 菌抑菌作用的研究奠定了基础。关键词： NaCI；乳酸杆菌；白色假丝酵母菌；金黄色葡萄球菌；枯草芽孢杆菌；大肠杆菌 中图分类号：TO 124. 文献标识码：A文章编号：1673 -6850（2007）01 -0012 -04 nhibitoryFunction FewCommon Bacteria SUN Zhinan，WANG Juan，LU Meifang， BA Jing，NNG Zhuo，WU Oian （Tianjin University TechnoIogy，Tianjin300457，China） Abstract： textmainIy studied inhibitoryfunction fewcommon bacteria， designed gradientfIat paneI experiment brothincrement experiment. gradientfIat paneI experiment testified：The very Iow NaCI concentration can retard grow；beIow5% concentration 5%concentration NaCIhave bacteriostasis Staph.aureus. brothincrement experiment tesified：The concen tration strongIyretard kiIIlactobacillus retardBac. subtillis retardStaph. aureus resuItprovides datasup porting bacteriostasisfunction designedexperimentaI methods provide furtherresearch bacteriostasisfunction NaCI.Key words： NaCI；lactobacillus；C. albicans；Staph. aureus；Bac. subtilis；E. coli. 收稿日期：2006 -07 -06 前言NaCI 易溶于水，溶液显中性，性质稳定，具有很 好的渗透性，能抑制细菌生长且不易蒸发等特点；盐 的硬度为2 ，有一定硬度，能起按摩作用，且不会划伤皮肤，使皮肤细腻光滑 ，因此，很早以来，人们利用盐疗法消除牙齿、眼睛、喉咙、皮肤的炎 疾，消除疼痛。近年来，在精细化工产品的开发中利 用NaCI 作为组份的产品不断出现，NaCI 具有消毒 杀菌功效的宣传也不断出现，但至今尚未发现 NaCI 具有杀菌抑菌作用的实验数据。 微生物无处不在，与人有着非常密切的关系，甚 至是维持人体健康不可缺少的。正常菌群与人体保 持着平衡，正常菌群之间也相互制约，所以不会使人 致病，但是当机体防御机能减弱，如受凉、过度疲劳、 电离辐射、大面积烧伤、恶性肿瘤及慢性消耗性疾病 时，某些正常菌也可以引起疾病，这些菌多数为条件 致病菌。一般人体各部位常见的微生物有：葡萄球 盐业与化工第36 菌、甲型链球菌、粪链球菌、枯草芽孢杆菌、类白喉杆菌、抗酸杆菌、奈氏菌属、乳酸杆菌、梭状杆菌、大肠 杆菌、变形杆菌、产气夹膜杆菌、绿脓杆菌等细菌以 及少数放线菌和真菌。本文从中选择具有代表性的 菌进行NaCI 的抑菌试验。 菌种的选取根据人体各部位存在的微生物种群，选择革兰 氏阴性代表菌为大肠杆菌；革兰氏阳性杆菌代表菌 为乳酸杆菌；革兰氏阳性球菌代表菌为金黄色葡萄 球菌；芽胞杆菌的代表菌为枯草芽孢杆菌；真菌的代 表菌为白色念珠菌（即白假丝酵母）。用以上几种 常见菌进行尝试性实验 ，具体依据如下：（l）大肠杆菌是最常见的致病菌之一，其侵入 人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀 胱炎及腹泻等。大肠杆菌是化妆品类必检菌种。 （2）人体出汗后容易产生乳酸杆菌，导致人体 身上有难闻气味。 （3）金黄色葡萄球菌产生的致病物质主要是凝 固酶和肠毒素，凝固酶能使血浆或体液中的纤维蛋 白原变成纤维蛋白，沉积于细菌表面，使细菌不易被 吞噬细胞吞噬，金黄色葡萄球菌具有溶血性，使有伤 口的肌肤化脓。 （4）白色假丝酵母菌是一种呈椭圆形的假丝酵 母，通常存在于正常人的口腔、肠道、上呼吸道等处， 能引起鹅口疮等口腔疾病、妇科疾病及其他疾病。 （5）枯草芽孢杆菌在自然界分布最广，其自身 的芽胞也是抗逆性最强的，而且能在含7%NaCI 培养基上生长。以上实验所用测试菌均由天津科技大学菌种保 藏中心提供。 抑菌实验为了缩短实验时间、减少工作量，实验分两步进 行，首先对除枯草芽孢杆菌外的试验菌作NaCI 梯度 平板实验，以观察 NaCI 溶液有无抑菌作用，并掌握 抑菌的大致浓度范围；然后通过肉汤增值实验获得 氯化钠杀菌抑菌的准确浓度值。 梯度平板实验设计倾斜放置培养皿，倒入不含氯化钠的培养基，待 其凝固后放平，再倒入不同浓度氯化钠的培养基，凝 固后将实验所选菌均匀涂布于其上方。再将培养皿 置于37培养箱中，培养 24h 后观察菌的生长情 况，以确定NaCI 对该菌种有抑制作用的大概浓度范 梯度平板实验示意图如图l所示：图中下层示 意的是不含NaCI 的普通培养基，上层示意的是根据 不同的菌种设定的不同NaCI 浓度的培养基，图中黑 点示意的是生长出的菌落。由于渗透作用培养基内 NaCI 浓度成梯度分布，理想状态下菌落会随 NaCI 浓度的增加而减少，由菌落不生长处便可估计出抑 制该菌生长的NaCI 浓度值。 肉汤增值实验设计一般的细菌在普通肉汤培养基中都会很好的生 长繁殖，因此选择肉汤培养基为该实验的基础培养 基，其中测试菌会迅速增长。在加入 NaCI 的肉汤 中，如果菌不增长或增长数量降低，表明该浓度的 NaCI 溶液具有抑菌作用，如果菌的数量减少，则说 明具有杀菌作用。 根据梯度平板实验结果，确定各种菌的肉汤培 NaCI的浓度，并设计空白肉汤实验进行对 比。在一定浓度 NaCI 的肉汤培养基和空白肉汤培 养基中投入实验菌，分别在Oh、3h、6h、9h 涂平板记 ，获得实验菌的生长数。氯化钠杀菌抑菌的准确浓度值是通过一系列不 同NaCI 浓度的肉汤增值实验获得的，实验设计如图 所示。图中试管标注浓度为NaCI浓度。 梯度平板实验根据实验所选菌耐盐能力的经验值，确定铺梯 度平板的培养基的盐浓度。按照实验设计中的方法 进行实验，各实验菌实验情况见表l。 酵母乳酸杆菌大肠杆菌 金黄色 葡萄球菌 梯度平板盐浓度（%） 1515 平板培养基 麦芽汁琼脂 改良MC 营养琼脂 营养琼脂 选用仪器 高压灭菌锅，恒温培养箱，烘箱，锥形烧瓶， 试管，培养皿，移液枪 梯度平板实验结果见图3。 NaCI梯度平板实验结果 可见：假丝酵母菌和乳酸杆菌的梯度平板一直没有长出可见菌落，表明较低的NaCI 浓度就 能抑制其生长：NaCI 对金黄色葡萄球菌具有抑制作 用的浓度大约在8%以上；NaCI 对大肠杆菌具有抑 制作用的浓度大约在5%以下。 肉汤增值实验根据梯度平板实验结果，确定测试菌于肉汤培 养基的含盐浓度在界限值的上、下各选适当浓度，由 于乳酸杆菌和白假丝酵母菌对NaCI 较敏感，因此低 盐浓度下的进一步详细试验只选择乳酸菌为代表 大肠杆菌乳酸杆菌 金黄色 葡萄球菌 枯草芽 胞杆菌 肉汤盐浓度 10，10.5，11 6，7，7. 5，8， 9，9. 5，10， 10. 5，11 平板培养基 营养琼脂 改良MC 营养琼脂 营养琼脂 肉汤增值实验数据记录图表肉汤增值实验数据整理如图4 NaC对大肠杆菌的抑制作用 表明：NaCI浓度在4%时就对大肠杆菌具 有较明显的抑制作用。当 NaCI 浓度为5% 时大肠 杆菌的生长就被完全抑制了。 NaCI对乳酸菌抑制作用 表明：在实验所确定的NaCI 浓度下，乳酸 杆菌的菌落数均有所降低，NaCI 浓度为1. 5%时抑 制作用就很明显了。同时证明了这类敏感菌在 NaCI 浓度为 5%以下甚至 1% 时生长就被抑制 NaCI对金黄色葡萄球菌的抑制作用 表明：在NaCI 浓度为8. 2%时对金黄色葡 萄球菌具有一定的抑制作用。NaCI 浓度为10% 表明：NaCI浓度在7. 5%时枯草芽孢杆菌 在最初的3h 内还是增加的，但在3h 以后就被抑制 了。然而，当NaCI 浓度为8%以上时生长被完全抑 盐业与化工第36 NaCI对枯草芽孢杆菌的抑制作用 结论（1）设计的NaCI 梯度平板实验和含 NaCI 肉汤 增值实验适用于盐的杀菌抑菌作用的研究； （2）梯度平板实验表明：较低的 NaCI 浓度就能 抑制假丝酵母和乳酸菌生长；大约8. 5%的 NaCI 液对金黄色葡萄球菌具有抑制作用；NaCI溶液浓度 大约在5%以下对大肠杆菌具有抑制作用； （3）肉汤增值实验表明：浓度在1. 5%以下的NaCI 溶液对乳酸杆菌和假丝酵母具有完全的抑制作用； 浓度为4%的NaCI 溶液对大肠杆菌具有抑制作用； 浓度为 5%的NaCI 溶液对枯草芽孢杆菌具有抑 制作用；浓度为8. 5%的 NaCI 溶液对金黄色葡萄球 菌具有一定的抑制作用，浓度为10%的 NaCI 溶液 对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用。 实验结果丰富了制盐工业的基础技术数据，为开 发盐的用途提供了技术支持。所设计的实验方法为 进一步开展NaCI 杀菌抑菌作用的研究奠定了基础。 〔参考文献〕 〔1〕制盐工业手册〔M〕 北京：中国轻工业出版社，1994. 美容皮肤科学〔M〕北京：人民卫生出版社，2002. 325. 系列健美盐的研究开发〔J〕海湖盐与化工， 2003，32（1）：30 -31 常见细菌系统鉴定手册〔M〕北京：科学出版 社，2001 〔5〕诸葛健，李华钟 微生物学〔M〕 北京：科学出版社， 2005（上接第11 准溶液中加入与待测溶液中相当浓度的Li ，可以消除此影响。 方法的精密度和准确度分别取4 个离子的试样各6 份，按各自实验条 件进行测定。其相对标准偏差小于3%；用加标回 收实验来检验方法的准确度，测得的回收率为 99. 8% ~107. 2%，测定结果见表8、表9。 精密度实验结果离子 方法 测定值（!g mL）平均值 mL）RSD 179发射 125Na 541发射 891Ca 234发射 652Mg 回收率实验结果离子 方法 测定值 mL）加标量 mL）测定总量 mL）回收率 437102. 467101. 60999. 089100. 575104. 028107. 358103. 结论通过以上对比实验可知：对于 Li 定，发射法受酸度的影响较小，灵敏度优于吸收法，且发射法不用元素灯，减少了因灯电流衰减引起的 误差，而回收率和相对标准偏差也比较接近，故发射 法优于吸收法。对于 Ca 的测定，由于吸收法受锂基体和酸度的影响较小，且吸收法的回收 率更理想，而镁在浓度较低时不能用空气———乙炔 火焰做发射实验，故测定以吸收法为宜。 〔参考文献〕 盐业与化工，2006，35（4）：27-28. 用原子吸收和火焰发射光谱法测定矿泉水中锂〔J〕 抚顺石油学院学报，2003，23（1）：26 -28. 共存碱金属离子在火焰发射分析中的干扰及消除〔J〕 2000，12（5）：22 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