背景:
中药汤剂是祖国医学中应用最普遍、最古老的剂型之一。因服用后吸收快、疗效好、不良反应少,许多患者乐于接受。我国古人已注意到煎药器具对中药质量的影响,认为“凡诸草药皆忌铁器”,因此传统中药的汤剂煎煮器具,大多为瓦罐、陶罐、砂锅等。随着现代生活节奏的加快,汤剂煎煮器具在不断发展,采用不锈钢材质的全自动常压煎药机和高压煎药机,由于其煎药操作的方便、高效、不易污染,目前在医院煎药室广泛应用,但是对其煎煮质量的研究数据较为缺乏,尚未有可参照的煎煮技术标准。
黄连阿胶汤出自“医圣”张仲景所著《伤寒杂病论》,其组成为:黄连12g,黄芩6g,白芍6g,阿胶9g,鸡子黄2枚。原书用治“少阴病,得之二三日以上心中烦,不得卧”,疗效确切。是由中医药经典著作提出并经受长期临床实践考验的“经方”,疗效为历代医家所认可。
目的:
1.结合医院药房实际操作流程,采用正交试验,对黄连阿胶汤的机器(全自动常压煎药机和高压煎药机)煎煮工艺进行优化。
2.比较全自动常压煎药机和高压煎药机、陶瓷药壶煎煮的汤剂质量。
3.比较阿胶烊化方式对汤剂质量的影响。
4.选择PCPA(对氯苯丙氨酸)失眠大鼠模型,考察主药黄连用量及鸡子黄、阿胶在本方中应用的必要性,为黄连阿胶汤的正确调配应用提供实验依据。
方法:
1.机器煎煮工艺的优化采用正交设计实验,在参数设计方面,以本院煎药室的实际操作为基础,以有效成分煎出率为评价指标,对其工艺进行优化。
2进一步通过检测全自动常压煎药机、高压煎药机、陶瓷药壶三种煎煮方法所得药液的有效成分和浸出物含量,比较其煎药质量。
3.阿胶烊化方式:加入阿胶粉,直接烊化或另烊后倒入药液中,测定有效成分含量前后变化;通过柱前衍生化-高效液相色谱法测定两种烊化方式后药液中的氨基酸含量,并进行对比。
4.参照本方剂的证候特征,选择PCPA(对氯苯丙氨酸)失眠大鼠模型,SD大鼠腹腔注射PCPA300mg·kg-1,连续注射2d,大鼠失眠模型成功后,灌胃黄连阿胶汤的高、中、低剂量,通过检测其血清中的神经递质变化及外观表现,探索黄连阿胶汤的有效剂量。
5.设置动物分组:正常组、模型组、原方组(黄连12g组)、黄连9g组、黄连6g组、去鸡子黄组、去阿胶组、阳性对照组,对黄连用量及鸡子黄、阿胶在本方中应用的必要性进行考察。
6.根据黄连阿胶汤证候特征选择甜梦胶囊、交泰丸、天王补心丸、养心安神丸等常用于治疗失眠的中成药作为对照药,进行药效实验,判断PCPA模型对黄连阿胶汤证型的适用性,并进一步证明黄连的作用。
结果:
1.黄连阿胶汤高压煎煮最佳工艺是:浸泡30min,一煎30min,二煎30min;常压煎煮最佳工艺是:浸泡30min,一煎40min,二煎40min。黄芩苷、芍药苷、小檗碱每剂的含量分别是高压:458.02,128.97,412.64mg;常压:454.19,116.01,349.15mg。
2.HPLC法测定三种指标成分含量:陶瓷药壶煎煮黄芩苷、小檗碱、芍药苷溶出量均高于常压型机器煎煮和高压型机器煎煮,部分数据有显著性差异;其中以一煎溶出量差异尤为显著。浸出物称定:一煎以陶瓷药壶煎煮药液产生的浸出物最多,而浸出物总量以高压型机器煎煮药液最多,但与陶瓷药壶煎煮相比无显著性差异。
3.直接烊化:加阿胶前后芍药苷、黄芩苷、小檗碱含量明显降低,但无显著性差异。另烊:加阿胶前后各成分比较无显著性差异。直烊脯氨酸含量明显高于另烊,丙氨酸与甘氨酸两者比较无显著性差异。
4.对黄连阿胶汤的有效剂量进行考察,各给药组与模型组均无显著性差异,但中剂量组(7.5g·kg-1)与正常组亦无显著性差异,可以作为黄连阿胶汤的有效剂量。而对照药甜梦胶囊,与正常组有显著性差异。
5.原方组与黄连9g组5-HT均与正常组无显著性差异,所以黄连在本方中用量可以减少到9g;而在文献中提及的鸡子黄可不入药也在本实验中进行了考察,结果显示,鸡子黄在本方中引经作用不可小觑;阿胶与黄连作为本方的君药,黄连苦寒入心经直折君火,阿胶补血滋阴,与黄连合用一清一补,养阴清热,安眠作用得以巩固。本实验证实了中药复方的整体性及配伍的科学合理性。
6.黄连阿胶汤全方组、天王补心丸组均与模型组有显著性差异,表明黄连阿胶汤与天王补心丸对该失眠少寐模型均具有治疗作用,且黄连作为该方中的君药具有重要作用。结论:
1.黄连阿胶汤高压煎煮优化工艺是:浸泡30min,一煎30min,二煎30min;常压煎煮优化工艺是:浸泡30min,一煎40min,二煎40min。
2.三种煎煮方式比较结果表明在单剂量、少量煎煮时,以选择陶瓷等传统器具为宜,而机器煎煮可解决多剂量、较大量煎煮的需求,同时应进行二次煎煮。
3.用PCPA失眠大鼠模型检测黄连阿胶汤的药效是合理的,方中黄连的用量可以减少到9g,鸡子黄和阿胶的应用必不可少,本实验证实了黄连阿胶汤组方的合理性和科学性。
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