打开APP
未登录
开通VIP,畅享免费电子书等14项超值服
开通VIP
首页
好书
留言交流
下载APP
联系客服
食管癌miRNA预后
yjt2004us
>《待分类》
2020.01.08
关注
Reduced miR-203 predicts metastasis and poor survival in esophageal carcinoma
miR-203
的降低预测食管癌的转移和生存不良
首先我们一起来看一看这篇文章的主要内容,作者分析了
GEO
中的两个非编码
RNA
谱,发现了
17
种
miRNA
在恶性以及正常食管组织之间有明显的差异表达。这
17
种
miRNA
的表达与患者的临床病理特征之间的相关性分析表明,食管癌(
EC
)组织中
miR-203
的表达下调,并且与淋巴结转移和较差的总生存率显著相关。
miR-203
的过表达显着减弱了培养中
EC
细胞的细胞增殖,迁移和侵袭。此外,基因表达谱和生物信息学分析表明,
KIF5C
是
miR-203
的直接靶标,而
KIF5C
的过表达部分抵消了
miR-203
对
EC
细胞的肿瘤抑制作用。作者还观察到,
miR-203
可降低
KIFC5
蛋白水平,促进
Axin2
的胞质积累,并逆转
EC
细胞的侵袭性表型。这些数据表明
miR-203
在
EC
细胞中是一种肿瘤抑制因子,其表达水平有可能被用作
EC
患者的预后指标。
结果展示
1.
miR-203
预测
EC
患者的总体生存
为了鉴定在
EC
中具有预后潜力的
miRNA
,作者首先分析了
GEO
中的两个非编码
RNA
分析阵列的数据
GSE43732
和
GSE6188
。在每个数据集中进行癌组织与正常组织的比较来识别差异表达的
miRNA
。结果作者发现了
17
种差异表达的
miRNA
(图
1
,表
1
)。
图
1.
识别差异表达的
miRNA
表
1.
食管恶性组织与正常组织之间差异表达的
miRNA
接下来作者对来自
TCGA
的
97
名
EC
患者的肿瘤组织的
miRNA
测序数据进行了这
17
种
miRNA
的表达与临床病理特征之间的相关性分析。结果显示只有
miR-203
的表达与
EC
患者的总体生存率相关。
miR-203
也与淋巴结转移密切相关(图
2
)。因此,作者主要评估了
miR-203
在
EC
中的作用。
图
2. miR-203
与
EC
患者的总体生存率相关
2. miR-203
抑制
EC
细胞系的迁移和侵袭
在这里,作者分析了
miR-203
在两种具有不同转移潜能的人
EC
细胞系
KYSE30
(转移潜能较小)和
KYSE510
(转移潜能较大)中的表达。结果显示与正常食管细胞系
HEEC
相比,
KYSE30
和
KYSE510
中
miR-203
的水平均显著降低(图
3A
)。此外,
KYSE510
细胞的
miR-203
水平比
KYSE30
细胞低得多(图
3A
)。然后,作者应用
miR-203
模拟物或抑制剂转染
KYSE30
和
KYSE510
细胞。结果显示与
miR-NC
组相比,
miR-203
抑制剂在体内和体外均显著增加
EC
细胞的增殖,而
miR-203
模拟物的引入导致细胞增殖的明显降低(图
3B
和
3C
)。体外
Transwell
和伤口愈合试验以及体内肺转移试验表明,
miR-203
抑制剂可显著增强
KYSE30
细胞的迁移,侵袭和转移,而
miR-203
模拟物在
KYSE 510
细胞中产生相反的结果(图
3D–3H
)。
图
3. miR-203
在体内和体外抑制
EC
细胞的增殖,迁移和侵袭
3. KIF5C
是
miR-203
的直接靶标
为了确定哪些
miR-203
靶标是其对癌细胞迁移和侵袭的影响的原因,作者通过非常严格的富集分析通过
TargetScan7.1
预测了
miR-203
的功能,并发现了
162
个预测为
miR-203
潜在靶标的基因(图
4A
)。在这
162
个潜在靶标中,只有
SEMA6D
,
VEGFA
,
KIF5C
,
CBLL1
,
FGF1
,
PIK3R1
,
PLAU
,
CCAR1
通过
GO
富集分析显示与细胞迁移的阳性调节相关(图
4B
)。然后,作者在
TCGA
网站中分析了
EC
患者的
RNA-seq
数据中这
8
个基因的
mRNA
表达。有趣的是,与邻近的正常组织相比,癌组织中仅
PLAU
和
KIF5C
表达升高(图
4C
)。相关性分析表明,在
EC
患者中,
KIF5C
与
miR-203
表达呈显著负相关,而
PLAU
没有相关性(图
4D
)。接下来,作者针对
miR-203
模拟物或抑制剂处理,测量了
EC
细胞系中
KIF5C mRNA
和蛋白的表达。与
miR-203
表达相反,与正常细胞相比,
EC
细胞中
KIF5C
的
mRNA
和蛋白表达均增加(图
4E
,
4F
)。
miR-22
抑制剂在
KYSE30
和
KYSE510
细胞中强烈上调
KIF5C
(图
4G
,
4H
)。对
miR-203
模拟来说,作者在
KYSE30
和
KYSE510
细胞中均观察到
KIF5C mRNA
和蛋白水平的显著下调(图
4I
,
4J
)。这些结果表明,
KIF5C
是
EC
细胞中
miR-203
的直接靶标。
图
4. miR-203
通过直接靶向
KIF5C
表达来抑制
EC
细胞的迁移和侵袭
4. miR-203
通过靶向
KIF5C
减少细胞迁移和侵袭
为了阐明
KIF5C
对于
miR-203
介导的细胞迁移和侵袭抑制的重要性。作者将
KIF5C
表达质粒转染
KYSE510
细胞,并与
miR-203
模拟物进行比较。结果显示
miR-203
模拟物对
KYSE510
细胞迁移和侵袭的抑制作用在
Transwell
和伤口愈合试验中被
KIF5C
的过表达部分补偿(图
5A
)。体内试验显示了相同的结果(图
5B
)。这些数据表明,
KIF5C
的下调可能是
miR-203
过表达时观察到的细胞迁移和侵袭减少的重要原因之一。
图
5. KIF5C
的过表达部分挽救了
miR-203
在体外和体内对
EC
细胞迁移和侵袭的抑制作用
5. miR-203
抑制
β-catenin
信号传导
作为重要的肿瘤抑制因子,
KIF5C
可以提高
Axin2
的水平(图
6A
)。在
EC
患者样本中,
Axin2
的水平降低了(图
6B
)。相关分析进一步表明,
Axin2
与
miR-203
表达呈正相关,与
KIF5C
表达呈负相关(图
6C
)。接下来,作者检查了
miR-203
和
KIF5C
对
KYSE510
细胞中
Axin2
表达的影响。
KIF5C
的过表达导致
Axin2
的总表达和细胞质表达降低(图
6D
)。但是,在
miR-203
模拟物的存在下,
KIF5C
对
Axin2
的作用被明显逆转(图
6D
)。此外,值得注意的是,单独的
miR-203
不会降低
KYSE510
细胞中
AXIN2 mRNA
的表达(图
6E
)。由于
Axin2
是已知的
β-catenin
抑制剂,作者进一步发现
miR-203
抑制了
KIF5C
诱导的
β-catenin
表达和相关的转录活性(图
6D
,
6F
)。因此,这些结果表明,
miR-203
通过抑制
KIF5C
而促进
Axin2
的细胞质累积,从而抑制
β-catenin
活性。
图
6. miR-203
通过增强
Axin2
表达来促进
β-catenin
的核表达
KYSE510
细胞中
KIF5C
的过表达显著增加了
N-
钙粘蛋白,
MMP2
和
MMP9 mRNA
的表达,并抑制了
E
钙粘蛋白的表达(图
6G
)。更重要的是,
miR-203
和
IWR-1-endo
对
E-
钙粘蛋白,
N-
钙粘蛋白,
MMP2
和
MMP9
的表达具有协同作用(图
6G
)。因此,这些数据表明
Axin2
是
miR-203
的必需间接下游分子。
好啦,这篇文章的内容就这么多啦
~
明天再见!
本站仅提供存储服务,所有内容均由用户发布,如发现有害或侵权内容,请
点击举报
。
打开APP,阅读全文并永久保存
查看更多类似文章
猜你喜欢
类似文章
【热】
打开小程序,算一算2024你的财运
科研│暨南大学:miR-515-3p及其靶点vimentin和MMP3在食管癌转移中的功能和临床意义(国人佳作)
Cancers:RNF128通过EGFR/MAPK/MMP-2通路促进食管鳞癌的侵袭和转移
生物信息学分析揭示胶质瘤恶性进展中干细胞circ-Serpine2分子介导的miRNA与mRNA调控子网络
外泌体miRNA这样搞,10+SCI随便发
(文章篇)S5E28:同一个miRNA发5分和8分差距真的这么大么?
ceRNA套路解析:lncRNAs-miRNA-mRNA的爱恨情仇!
更多类似文章 >>
生活服务
热点新闻
留言交流
回顶部
联系我们
分享
收藏
点击这里,查看已保存的文章
导长图
关注
一键复制
下载文章
绑定账号成功
后续可登录账号畅享VIP特权!
如果VIP功能使用有故障,
可点击这里联系客服!
联系客服
微信登录中...
请勿关闭此页面
先别划走!
送你5元优惠券,购买VIP限时立减!
5
元
优惠券
优惠券还有
10:00
过期
马上使用
×