最近，各地养殖鱼类细菌性疾病暴发比较严重，养殖业者采用各种抗微生物药物也难以控制。面对这样的问题，我们认为主要原因是因为长期地盲目地滥用抗微生物药物所致。
滥用药物不仅难以有效地治疗养殖鱼类的细菌性疾病，而且容易导致致病性细菌对抗微生物药物产生耐药性，最终不仅会危及到水产养殖业的健康发展，而且还可能威胁到人类的健康。
针对水产养殖业者至今依然是滥用抗微生物药物的现象，我们再次提醒对养殖鱼类细菌性疾病的治疗，要在分离致病菌株、完成药物敏感性的基础上，正确地选择药物、精准地使用药物。
摘要：本文介绍了养殖鱼类细菌性疾病的科学治疗方法。提出对于养殖鱼类细菌性疾病的治疗，正确地采用抗微生物药物是能获得良好药物疗效的首先药物。而为了获得对养殖鱼类细菌性疾病的良好治疗效果，必须要做到从患病鱼体内分离致病菌株，完成分离菌株对各种抗微生物药物敏感性检测的基础上，正确地选择和精准地使用抗微生物药物作为治疗养殖鱼类细菌病的药物，才有可能获得有效治疗养殖鱼类细菌性疾病的结果。盲目地滥用抗微生物药物，不仅难以有效地治疗养殖鱼类的细菌性疾病，而且容易导致致病性细菌对抗微生物药物产生耐药性，最终会危及到水产养殖业和人类的健康。鉴于目前细菌性疾病在我国养殖鱼类中频繁暴发的现象，推测长期以来的滥用抗微生物药物，可能是导致我国养殖鱼类细菌性疾病频繁暴发且难以控制的主要原因。
关键词：养殖鱼类；细菌性疾病；抗微生物药物；药敏试验；最小抑菌浓度
最近一段时间，我国淡水养殖业较多的地区，由各种细菌性疾病导致养殖鱼类的所谓“春季鱼瘟”来势凶猛，各种养殖鱼类因为细菌性疾病暴发而无法有效地治疗，导致了养殖鱼类不同程度地死亡，给近几年来原本就经济效益差的广大水产养殖业者，带来了更大的水产养殖业危机。
根据来自各地养殖鱼类病害防治工作者的相关报道，最近养殖鱼类暴发的细菌性疾病，致病菌的种类比较多，常见的致病菌种类主要包括柱状黄杆菌（Flavobacterium cloumnare）、温和气单胞菌（Aeromonas sobria）、鮰爱德华菌（Edwardsiella ictaluri）、鰤诺卡菌（Nocardia seriolae）等。不同养殖区域危害养殖鱼类的致病菌种类有所不同，譬如南方和北方的水产养殖区域致病菌种类存在一定的差异。
对于由致病性细菌引起的养殖鱼类疾病，国内、外大多是采用抗微生物药物给予治疗。为了有效地治疗养殖鱼类的细菌性疾病，正确地选用药物的种类和精准地确定用药剂量是至关重要的。如果水产养殖业者在治疗养殖鱼类细菌性疾病时，不能正确地选择抗微生物药物，也不能精准地确定用药剂量的话，不仅难以有效地治疗养殖鱼类的疾病，而且容易导致致病性细菌产生对抗微生物药物的耐药性（drug resistance）。
一旦致病性细菌对抗微生物药物产生了耐药性，就会导致抗微生物药物在防控致病性微生物感染中失去治疗效果，导致养殖鱼类细菌性疾病越来越难以有效地治疗，这将持续威胁着水产养殖业者有效防控养殖鱼类的细菌性疾病。
要实现对养殖鱼类细菌性疾病的科学、有效治疗，就需要做到正确地诊断疾病、科学地选择药物和精准、使用抗微生物药物的剂量。本文内容是介绍解决这几个问题的基本方法。
养殖鱼类细菌性疾病的种类众多，要有效地治疗养殖鱼类的细菌性疾病，就必须对患病养殖鱼类的疾病做出正确地诊断。利用微生物技术，从患病鱼类体内分离致病性细菌，就是正确诊断养殖鱼类疾病的重要途径。
将患病养殖鱼类带到实验室，在超净工作台上对患病养殖鱼类解剖后（图1），从内脏（肾脏）中做致病性细菌的分离，获得分离菌株。在有必要的时候，对分离菌株进行种属的鉴定，确定致病性细菌的种类，对患病鱼类所患疾病完成确诊。
利用从患病鱼体中获得的分离菌株，完成分离菌株对各种抗微生物药物敏感性试验，简称药敏试验。常用的药敏试验测方法主要牛津杯法、液体培养基稀释法等，本文仅对这两种方法做简要介绍。
2.1牛津杯法
牛津杯法药敏试验的原理是，将灭菌后的牛津杯稳定低安放在接种有待测菌的固体培养基上，将定量的抗微生物药物物置放于牛津杯中，随着药物在培养基中向周围扩散，观察牛津杯周边是否出现抑菌圈，根据抑菌圈的大小推断抗微生物药物是否能抑制供试细菌的生长。因此，试验者可根据出现的抑菌圈的大小，判定供试药物对致病性微生物的抑制作用强弱。
牛津杯法属于对抗微生物药物定性的方法，水产养殖业者可以根据牛津杯法测定分离菌株对抗微生物药物的实验结果，决定采购什么种类的抗微生物药物，作为治疗养殖鱼类细菌性疾病的药物。
2.2液体培养基稀释法
该方法适用于需氧及兼性厌氧的快速生长型致病性微生物，如肠杆菌科、葡萄球菌属和肠球菌属；嗜血杆菌属、奈瑟菌属、肺炎链球菌及其他链球菌等菌株，还适用于厌氧菌、酵母样真菌及支原体等。
根据每种药物、致病性微生物种类和感染部位的不同，选择不同的抗生素浓度稀释范围，用阳离子调节的M-H肉汤以2n进行倍比稀释抗微生物药物（如256、128、64、～0.125……）。将稀释后的药物加入试管，或加入冷却至45~55℃M-H琼脂培养基中，立即在无菌条件下制作系列药物浓度梯度的药敏试验试管（图3）。
用无菌生理盐水或M-H肉汤配制成0.5麦氏单位浊度的菌悬液。在配制好的含药浓度梯度液体培养基试管中加入上述供试致病性微生物的菌悬液，使其终浓度为105cfu/mL。制备好的药物敏感测试试管放置于培养温度和时间为28℃条件下，培养24h以上，再观察试验结果（图4）。
液体培养基稀释法获得的是供试抗微生物药物对来自患病养殖鱼类分离菌株的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration，MBC）。
MIC的判读即为肉眼观察无致病性微生物生长试管中的最低药物浓度，为该该供试药物的MIC。MBC的判读即为供试药物杀灭99.9%或以上受试致病性微生物所需的最低浓度。具体做法是将高于MIC 1~3个稀释度的试管中的培养液，转接种于相应的培养基平皿上，在28℃恒温条件下培养18~24h，与无致病性微生物生长的平皿对应的药敏试管中的药物浓度，即判为杀灭99.9%或以上受试菌所需的MBC。
对从患病鱼类体内获得的分离菌株，完成的药物敏感性检测获得的MIC，表示的是将这种药物用于治疗患病鱼类的细菌性疾病时，这种抗微生物要在鱼类血液中达到这个MIC时，才能抑制病原微生物的生长或繁殖，实现治疗疾病的作用。这里需要回答读者的问题是，我们究竟要在养殖鱼类饲料中添加多少剂量的抗微生物药物，才能让所给予的抗微生物药物能够在鱼体的血液中达到MIC的浓度？
3.1要考虑环境因素对养殖鱼类吸收药物效率的影响
抗微生物药物的用药途径，是针对生活在养殖水体中的养殖鱼类使用的。因此，添加在饲料中的抗微生物药物对水生动物的作用与治疗疾病的效果，会或多或少地受到水体环境和给药方式等因素的影响。如养殖水体的水温和pH等均会影响到抗微生物药物的用药效果。当人们对养殖鱼类口服给药时，还会受到作为抗微生物药物载体的鱼用饲料的理化特性等因素的影响。因此，在对养殖鱼类使用抗微生物药物时，必须要充分地考虑到养殖水体中各种环境因子对于用药效果的影响。
3.2对不同养殖鱼类的用药系数
日本学者通过对各种养殖水环境，以及不同种类鱼类对抗微生物物药的生物利用度等内容的试验研究，采用日清制药公司生产的水产用医药品，在完成一系列如同上述内容的试验研究后，确定了对日本的几种养殖鱼类，在患病时投与抗微生物药物时的用药系数（coefficient of administration）。如对锦鲤（Cyprinus carpio）使用日清公司的水产用医药品时，要在饲料中添加MIC的8.1倍药物（即用药系数是8.1），才能在患病鱼类摄食药物饲料后，其血液中的药物浓度达到MIC的抑菌浓度。
我们参照日本学者完成的这类试验数据，对我国人工养殖的大量理科鱼类给予抗微生物药物，也取得了比较好的用药效果。
最后，还要提醒广大的水产养殖业者注意，对养殖鱼类口服投与抗微生物药物时，要达到药物对鱼类疾病良好的治疗效果，还必须要满足如下的一些基本条件：
（1）给予的药物在饲料中能均匀地分布。
（2）在饲料中含有抑制和杀灭致病菌所需要的充分药物剂量，当鱼类正常摄食饲料后能在鱼体内达到治疗疾病所需要的药物浓度。
（3）给予的药物在饲料中的稳定性良好。
（4）制备的药物饲料对鱼类具有良好的适口性。
（5）饲料中的化学成分对药物理化性能不会产生明显的影响。
（6）在药物饲料被鱼类摄食之前，其中含有的药物不会大量地从饲料中溶出。
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