前面我们一块学习了蛋白质的数据库及蛋白的提取过程,那么研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。 Trizol法是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。 虽然Trizol里面含有RNA酶抑制剂的,1ml的Trizol一般最多只能裂解100mg的组织。但是如果组织过量,Trizol无法完全浸润组织无法完全裂解组织,多余组织内的RNA酶等物质会导致RNA的降解。这是RNA降解的很重要的原因。 同时,由于RNA容易降解,在实验过程中一般都要求口罩的,避免组织的污染。同时选用的无RNA酶的进口枪头、EP管以及DEPC水,在提取过程中,一定要时刻提醒自已RNase Free-RNase Free-RNase Free,实验就成功一半啦~
医学方已推出“实验室那些事儿”“SCI写作技巧”“文献精读与解析”“医学英语轻松学”“国自然基金申请”“临床数据挖掘”、“基因数据挖掘”、“R语言教程”、“医学统计学”、“微创动物实验培训”等多个专题课程,如需了解课程详细推文,可关注“医学方”公众号,点击“精品专题”进入
联系客服