谈到外泌体大家多少都有所耳闻，有人或许正在做这个方向的研究，那么关于外泌体有哪些常用知识点呢？
— Exosomes —
一、外泌体的基本信息
⊙外泌体的大小：外泌体的直径约40-150nm
⊙从研究上来讲并不太严格区分外泌体（exosomes）或微泡（microvesicles）
⊙外泌体属于胞外囊泡类，除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡
⊙外泌体的直接比微泡的要小，后者直径为100nm-1μm
⊙外泌体的数量：人体中大约有1014个，近乎于平均每个细胞产生1000-10000个
⊙外泌体的细胞源：人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体
⊙外泌体具有异质性，即使是同一种细胞分泌的外泌体都有可能具有很大功能区别
⊙外泌体的存在：外泌体几乎存在于所有的组织、细胞间隙、体液中
⊙外泌体产生于细胞中的多泡体
二、外泌体的相关成分
⊙外泌体的膜同细胞一样，是磷脂双分子层
⊙外泌体膜含有MHC-1/2蛋白，能绑定特异性的肽链
⊙外泌体膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2
⊙外泌体膜中有膜转运融合蛋白annexins、RAB、GTPases
⊙外泌体膜上有脂质筏Chol、ceramide、SM、PC，限制膜流动，参与包括跨膜信号转导、物质内吞、脂质及蛋白定向分选的多种功能
⊙外泌体中含有核酸，包括miRNA、DNA、lncRNA、mRNA；同时还有一些蛋白、脂类也能被包裹到外泌体中
⊙与外泌体产生相关的重要分子：Ral、ARF6、PLD2、RAB家族
⊙一些物质进行外泌体中是特异性的：如hnRNPA2B1能结合lncRNA或miRNA特异性的序列（GGAG/CCCU），进行主动包埋
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外泌体含有他们父本细胞的分子，包括一些蛋白、核酸、脂类。主要组织相融性复合体MHC-1/2；四分子交联体家族成员CD9、CD63、CD81、CD82；ESCRT复合物Alix、TSG101；脂质筏Chol、ceramide、SM、PC；跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2；膜转运融合蛋白annexins、RAN、GTPases；粘附分子MFGE8、integrins。
三、外泌体的角色
⊙外泌体发挥功能并一定需要受体细胞摄入外泌体：外泌体的膜蛋白有可能与细胞膜蛋白作用，激活细胞内通路
⊙外泌体的角色之一：细胞-细胞通讯，比如抗原递呈
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⊙外泌体的角色之二：垃圾箱，外排多余或者无功能的细胞成分
肿瘤来源的EVs对受体细胞有多种影响。在某些原发性肿瘤上，EVs能通过沉积胞外基质中的如纤连蛋白这样的物质到小胞外囊泡中（sEVs），稳定细胞的突出物从而增加肿瘤细胞的运动，促进细胞迁移。EVs中的金属蛋白酶参与胞外基质的重塑，促进细胞伪足形成。EVs能促进成瘤基质细胞的分化与富集。由肿瘤邻近环境中成纤维细胞分泌的EVs能增强肿瘤细胞的运动以及获得性耐药作用。原发肿瘤的sEVs能进入到循环血中并实现远端迁徙。一些sEVs能促进血管新生，并且EVs能进入远端组织，通过诱导细胞外机制重塑生成预转移小体，富集骨髓来源的细胞及肿瘤细胞。
四、为什么要研究外泌体？
⊙揭示疾病发病机制：从微环境角度揭示细胞之间通讯促进疾病发生的原因。
细胞分泌的EVs参与肿瘤的整个进程。首先，在肿瘤起始阶段，周围环境中正常细胞（上皮细胞）的EVs能携带一些miRNAs抑制肿瘤细胞的生长。一旦这种抑制作用失败后，肿瘤细胞分泌的EVs能促进肿瘤的恶性程度。此外，肿瘤细胞分泌的EVs能激活成纤维细胞，导致胞外基质降解并诱导肿瘤促进的细胞因子。当肿瘤微环境是缺氧状态时，肿瘤细胞会分泌血管新生诱导EVs，激活内皮细胞，刺激血管形成，帮助肿瘤克服氧气及营养的缺乏环境，以至于促进诸如转移的肿瘤进程。
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⊙寻找疾病诊断和预后的分子标志物
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⊙外泌体作为药物载体，实现靶向给药
五、外泌体的分离和鉴定方法
⊙外泌体的分离：差速离心、密度梯度离心、体积排阻色谱法、过滤法、聚合物沉淀法、免疫分离、隔离筛选法
⊙外泌体分离后需要进行粒径分析：如NanoSight NS300
⊙外泌体检测的marker：常用的有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70
六、外泌体的相关数据库
⊙Vesiclepedia：http://microvesicles.org/index.html
⊙ExoCarta：http://exocarta.org/index.html
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