1938年1月新四军军部建立后，各部队迅速完成集中整训。随后，相继挺进华中各个地区开展游击战，建立抗日根据地。在江南，由粟裕率领的先遣支队和陈毅、张鼎丞率领的第一、第二支队在苏南敌后同日军展开多次战斗，取得胜利，初步建立了以茅山为中心的苏南抗日游击根据地。谭震林率领第三支队进入皖南，战斗在东起芜湖、宣城，西到铜陵、青阳的沿江地带。在江北，高敬亭率领第四支队进入舒城、桐城、卢江、无为地区。第四支队在安庆到合肥公路两侧进行了大小数十次伏击战，给西进的日军以有力的打击和牵制，还先后攻克了卢江、无为两座县城，初步打开了这一地区的抗战局面。
新四军各部队遵照中央和中原局的指示精神，进一步向敌后挺进，发展抗日武装，扩大抗日阵地，在华中敌后同日军展开英勇斗争。第一、第二支队在巩固苏南茅山根据地的同时，积极实行东进北上。留在皖南的新四军军部直属队及第三支队，在铜陵、繁昌和泾县地区对日作战200余次，保卫了皖南抗日根据地。为了加强对江北新四军的指导，
然而，从1939年初起，国民党开始实行防共、限共的反共方针，日益发展壮大的新四军抗日力量越发遭到国民党顽固派的仇视。1941年初，国民党制造了震惊中外的企图消灭新四军的“皖南事变”，新四军遭受严重损失。国民党这一倒行逆施引起全国人民的强烈不满和国际舆论的谴责，中国共产党毅然宣布重建新四军军部。
1941至1942年，华中抗日根据地遭到日、伪军的疯狂“扫荡”和“清剿”。经过两年艰苦卓绝的奋战，华中敌后军民不仅巩固了原有的各抗日根据地，而且还开辟了浙东新的敌后根据地。新四军发展到7个师和1个独立旅，共计9万多人。1943年，又经过1年奋战，华中敌后根据地得到进一步巩固和发展，新四军达12万人，民兵也发展到60多万人，为展开全面对敌反攻创造了条件。从1944年到1945年抗战胜利，新四军以四个主力团西进萧县、永城、夏邑地区，恢复了豫皖苏根据地，并打开了商丘、毫县地区的局面。新四军还先后派粟裕、叶飞率领部队南下苏浙，巩固了苏南和浙西根据地。在此期间，华中军民还开辟了苏浙皖边和湘鄂赣边两个新区。到抗战胜利时，华中抗日根据地已经形成了拥有苏北、苏中、苏南、皖北、淮南、皖江、浙东、豫鄂边、苏浙皖边和湘鄂赣边等10个区，把华中和山东两大战略区连成一片，为抗日战争的最后胜利奠定了坚实的基础。
从1941年开始，华中各根据地针对日、伪军的大“扫荡”和“清乡”，进行了艰苦而又坚决的反“扫荡”、反“清
华中抗日根据地是新四军用枪杆子开辟的，而根据地的人民又用源源不断的人力，物力，财力支持了新四军。华中人民与新四军结下了深厚的鱼水之情。为全国的解放胜利做出了很大的贡献。
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