细胞增殖研究攻略（上篇）

细胞增殖是生物体的重要生命特征,是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。上期我们为大家讲解了有关细胞毒性方面的产品知识，其实细胞毒性与增殖是紧密相连的，毒性越大，便会越影响细胞进行正常增殖。那么，细胞增殖检测产品及产品特征都有哪些？

在细胞群落中通过测定代谢活性对细胞活力、增殖或毒性进行定量，罗氏应用科学部提供三种微板检测试剂盒,其通过活细胞能将四唑盐还原成甲瓒盐(Formazan)的机理检测细胞活性。

Cell Proliferation Reagent WST-1

Cell Proliferation Reagent WST-1是一个非毒性,非放射性的试盒,其能简单而准确地测定细胞活力、细胞增殖(图1)及细胞毒性(图2)。该一步法ELSA试剂盒是基于活细胞能将四唑盐WST-1还原成可溶性的甲瓒盐。只需简单地将试剂添加到细胞中,孵育后可直接进行检测。

图1. 添加human interleukin-2(hIL-2)后使用WST-1检测CTLL-2细胞增殖

图2. 用WST-1检测human tumor necrosis factor-α(TNF-α)对WEHI-164细胞的细胞毒性

产品特点

1.高度准确地检测细胞增殖，吸光率同细胞数紧密相关；

2.同MTT法及XTT法相比能检测更低的细胞数目,灵敏度更高；

3.一步法实验,无溶解及漂洗步骤,无须其他试剂,节省实验时间；

4.配合使用报告基因检测能对细胞数目进行标准化；

5.适用于96孔板培养的贴壁或悬浮细胞。

Cells Proliferation Kits(MTT and XTT)

除了提供最新的Cell Proliferation Reagent WST-1外,罗氏应用科学部还提供其他产品,分别是第一代产品Cell Proliferation Kit Ⅰ(MTT)及第二代产品Cell Proliferation Kit Ⅱ(XTT)。MTT可被活细胞中的脱氢酶还原成不溶于水的甲瓒,在添加试剂盒提供的溶解剂后可进行检测。而XTT会形成可溶性甲瓒盐,其能直接进行检测。

图3. 使用Cell Proliferation Kit Ⅰ(MTT)检测human interleukin-6(hIL-6)对小鼠杂交瘤细胞系7TD1的效果。2×10³/孔的细胞添加不同浓度的hIL-6,经过Cell Proliferation Kit Ⅰ(MTT)进行检测。

图4. 用Cell Proliferation Kit Ⅱ(XTT)检测human tumor necrosis factor-α(TNF-α)对WEHI-164细胞的作用。在用1μg/ml的 Actinomycin C预孵育细胞(1×10⁶/ml)3小时后,5×10⁴的细胞添加不同浓度的TNF-α孵育24小时。使用Cell Proliferation Kit Ⅱ(XTT)检测细胞反应。

产品特点

1.快速检测细胞添加了细胞因子、生长因子、促分裂素及营养物质后产生的细胞增殖；

2.更少的操作，无清洗步骤,无需额外试剂，节省时间，整个实验在一块微板中即可完成；

3.分析抗癌药物和其他合成药物的细胞毒性及细胞抑制作用；

4.评估生产抑制抗体及生理调节因子效果;

5.适用于96孔板培养的贴壁或悬浮细胞。

产品清单