细胞的配体与受体相互作用对于信号传递和粘附是非常关键的,但是目前寻找未知配体对应的内源受体以及未知受体对应的配体在技术上仍然具有挑战性。最近在 Genome Biology 上描述了一种基于利用CRISPR激活来识别特定配体的受体的新方法。应用这一技术作者鉴定了粘附 G 蛋白偶联受体的配体,并显示Nogo髓鞘相关抑制蛋白是ADGRB 1的配体。这种方法将能够在全基因组范围内识别细胞外受体-配体相互作用,极有非常大的应用前景。
技术路线
首先设计所有的膜蛋白的启动子的 sgRNA,然后包装入慢病毒中,进一步感染相应的细胞系。然后利用荧光标记的配体分子分选出被荧光标记的细胞。对相应的细胞进行测序,并分析富集的 sgRNA对应的基因。
作者以一些已知的受体-配体相互作用来判断该技术的靠谱程度,可以看到相应的分子被显著的富集出来。
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